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远慕技术：细胞伤口愈合实验
实验试剂
DMEM培养基
胎牛血清
PBS
BD24孔细胞培养板
Raininpipettips,1ml
戊二醛
乙醇
结晶紫
实验设备
细胞培养仪：37°Cand5%CO2
实验材料
人MDA-MB-231cell
实验步骤
1. 细胞在含有10%FBS的DMEM培养基中生长。
2. 细胞以一定密度接种到24孔细胞培养板中，生长24小时后，单层细胞融合度应达到70-80%。
3. 不要geng换培养基。用新的1ml枪头轻轻的在单层培养细胞间划痕，划痕横穿过孔，枪头尽量与板孔的底部垂直，不要倾斜。这样产生的gap的距离才与枪头末端的外直径相等。Gap的距离可以选用不同型号的枪头调节。划痕在同一方向成一条直线。
4. 在垂直与第一条划痕的方向制作另一条划痕，每孔划痕成十字交叉型。
5. 划痕后，用培养基轻轻的清洗板孔2次，以去除脱落细胞。
6. 每孔添加新鲜培养基。
7. (培养基中含有某些成分，如抑制/促进细胞迁移和/或增殖的化学物质)。
8. 细胞生长48小时(或根据时间需要)。
9. 1xPBS清洗细胞两次，然后使用3.7%多聚甲醛固定30分钟。
10. 0.1%的结晶紫(2%乙醇溶解)染色30分钟。
11. 染色的单层细胞选取不同的视野，显微镜拍照。gap的距离可通过Photoshop或ImagJ软件测量.为了降低实验结果的可变性，建议每孔选择多个视野观察，每组做多个重复。
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