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公司动态

纤维素酶与半纤维素酶的区别是什么

     纤维素酶是酶的一种在分解纤维素的时候起生物催化作用,是可以将纤维素分解成寡糖或单糖的蛋白质。纤维素酶不是单体酶,而是起协同作用的多组分酶系,是一种复合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成,还有很高活力的木聚糖酶。     半纤维素主要由木聚糖和甘露聚糖组成,是饲料中的关键抗营养因子,可阻碍营养成分消化,降低动物生长性能。 半纤维素酶为复合酶系,主要包括木聚糖酶和甘露聚糖酶,其功能是降解半纤维素,消除抗营养性。纤维素酶与半纤维素酶的区别:纤维素与半纤维素共同存在于大多数植物细胞壁中。纤维素全部由葡萄糖单位聚合而成,而半纤维素是一种杂聚多糖,常含有木糖,甘露糖,半乳糖,鼠李糖,阿拉伯糖等单糖单位。在酸性环境下半纤维素远较纤维素易于水解。半纤维素比纤维素的分子要小,大约含有500到3000个单糖单位,后者大约含有7000到15000个。半纤维素是分支的聚糖,而纤维素是不分支的。半纤维素具有亲水性能,可以造成细胞壁的润胀,赋予纤维弹性。一般木材中,纤维素占40~50%,还有10~30%的半纤维素和20~30%的木质素。

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2019.10.17

亚甲蓝竟然还有这神奇效果?

近日,美国马里兰大学(University of Maryland)的一个研究团队在《科学报道》上发表了一篇论文,声称?廉价又常见的染色剂亚甲蓝在抵抗皮肤衰老方面有着神奇的功效。亚甲蓝是一种拥有广泛用途的化学物质,主要被用作化学指示剂,染料,以及生物染色剂,偶尔也会被用于治疗尿路感染和氰化氢中毒。这个团队为什么会对一种染料感兴趣呢?早在 2015 年,他们就发现亚甲蓝可以修复早衰症患者的基因缺陷,以及由于加速衰老而受到损伤的皮肤细胞。这次的发现就是来自于他们进一步的探索,试图找出亚甲蓝是否对健康人群也起效。首先,研究人员从健康的中年人身上收集了一些皮肤细胞,在含有亚甲蓝的培养液中进行了为期四周的培养。作为对比,他们还选择了其他 3 种著ming的抗氧化剂进行了同样的实验:N- 乙酰半胱氨酸,MitoQ,以及 MitoTEMPO。结果显示,接触亚甲蓝的皮肤细胞有多个与衰老有关的指标得到了大幅改善:成纤维细胞(也就是合成胶原蛋白的细胞)中,会造成伤害的活性氧类物质出现了减少,细胞死亡速度减少了,细胞分裂速度也增加了。其整体的抗衰老效果远超其他 3 种对比。之后,研究人员又在老年人(大于 80 岁)的身上收集了一些皮肤(成纤维)细胞,又进行了为期 4 周的实验。结果显示,亚甲蓝对老年人同样有效。不但如此,甚至有两种与衰老有直接关系的基因表现都得到了提高:衰老相关β- 半乳糖苷酶(senescence-associated beta-galactosidase)和 P16。最终,研究人员选择在他们发明的一种超级拟真的人造皮肤上再一次进行实验。这种人造皮肤拥有除了毛囊和汗腺之外有人类皮肤的一切构造。这次的结果不但与之前人类皮肤细胞相同,研究人员们还发现受到亚甲蓝滋润过的人造皮肤可以留住了更多的水分,并且变厚了许多。这两种都是年轻皮肤才会拥有的特性。研究人员表示,他们已在人造皮肤上进行了计量测试,并发现亚甲蓝在高浓度下都不会对皮肤造成刺激。因此,他们已经开始研究可以把这种神奇又廉价的物质变成护肤品的配方。

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2019.10.17

常用的刚果红培养基,你知道属于哪一类培养基吗?

培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。一般分为天然培养基、组合培养基、固体培养基、液体培养基等,那我们常用的刚果红培养基属于哪一类的?刚果红培养基属于哪一类培养基:刚果红培养基属于固体培养基,因为最hou能在培养基上看到因分解纤维素形成的透明圈,在液体培养基中不可能形成透明圈.是鉴定培养基,因为该培养基上也能生长其他微生物,例如有些自养型微生物就能在该培养基上生存;不过只有纤维素分解菌周围才会形成透明圈,从而将该菌落鉴定出来.也是区分选择培养基,例如在配置培养基的时候不添加氮源,那么该培养基上只有有固氮作用的微生物才能生存!刚果红培养基的原理:?刚果红培养基中刚果红染料移动,刚果红染料进入产纤维素酶真菌,产纤维素酶真菌首先分解纤维素物质为含有葡聚糖等结构的多聚糖类物质,多聚糖与刚果红形成多聚糖-刚果红复合物,复合物不仅被吸附在菌丝外,而且能被进一步转运吸收至菌丝内部.通过进一步的降解,多聚糖被分解而加以利用,而刚果红则被保留在菌丝体内,使菌落呈现红色.所以,纤维素-刚果红培养基可作为分离、筛选纤维素分解真菌的特异性培养基.

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2019.10.14

基于抗体的滴眼剂有望治疗干眼症

伊利诺伊大学芝加哥分校的研究人员是第1个鉴定人眼泪液中是否存在特定类型抗体的抗体,这种抗体称为抗瓜氨酸化蛋白自身抗体或ACPA。他们也是第1个证明干眼病患者针对针对ACPA的新型眼药水疗法(由合并的人类抗体制成)后,症状和体征有所减轻的方法。他们早期临床试验的结果发表在“眼表面”杂志上。干眼病是由泪液的异常引起的,并导致角膜(眼睛的透明外层)上的干燥区域,严重的情况下可能导致眼睛疼痛和对光的敏感性丧失。该研究的高级作者,UIC眼科学和视觉科学教授桑迪普·贾恩(Sandeep Jain)博士说:“自身免疫性干眼症的负担远不只是偶尔感到干涩。”“这可能严重损害人们的生活质量,甚至使残疾人的视力下降。”在先前的研究中,Jain和他的同事发现,DNA链从一种中性粒细胞(一种白细胞)中挤出,在受严重干眼症影响的眼睛表面形成网状结构并引起炎症。在这项新研究中,研究人员将ACPAs识别为引起眼睛发炎的另一个原因,这也促进了这些网的发展,Jain称之为“炎症的恶性循环”。新的滴眼液通过至少部分地使免疫系统退出这一周期来治疗干眼症。这些滴剂使用汇集的抗体配制而成-抵抗了ACPA的负面影响-这些汇集的抗体是由成千上万个人捐赠血液中加工而成的免疫球蛋白制成的,所有这些抗体均包含各种类型的抗体。I / II期药物试验比较了基于抗体的滴眼液和不含抗体的滴眼液。“目前只有两种批准的药物可以治疗干眼症,而且它们并不适合所有人,尤其是那些患有严重疾病的人,因此,有一种新药可以通过针对不同的机制(在这种情况下为自身免疫)来治疗疾病。 ,这非常重要。”贾恩说。二十七名患有严重干眼症的参与者参加了试验。参与者被随机分为两组。一组被给予由合并抗体制成的眼药水,并被要求每天两次给每只眼睛两次,持续八周。对照组给予相同的指导,但不使用抗体滴眼剂。研究人员通过问卷调查评估了患者的症状,并在研究之前和研究期间测量了角膜损伤的程度以及眼表面促炎性生物标志物的数量。他们发现,与对照组相比,使用基于抗体的滴眼液的人在八周时具有统计学上显着且具有临床意义的角膜损伤减少。与没有抗体的滴眼液相比,与症状相关的问卷调查评分也反映了使用新型基于抗体的滴眼液的患者的显着改善。在测试组中,眼睛表面的促炎性生物标志物(或干燥区域)的数量也减少了。贾恩说:“该试验的参与者将滴剂与合并的抗体一起使用,其眼睛不适感有所减轻,其角膜更健康。”“来自这项早期临床试验的数据表明,含有合并抗体的滴眼液对于治疗干眼症可能是安全有效的,我们期待进行更大的随机试验,以明确证明其功效。” 

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2019.10.14

PBS磷酸盐缓冲液都用哪些用途及作用

磷酸盐缓冲液(Phosphate?Buffered?Saline)简称PBS,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl。用于生化、微生物、食品相关实验,pH=7.4,与人体血液等渗。PBS磷酸盐缓冲液的作用:PBS磷酸盐缓冲液一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首xuan。PBS也不是wan能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最jai的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。PBS磷酸盐缓冲液的常用范围:磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液:5.8-8.0;磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液:4.92-8.18;磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液:5.8-8.0;磷酸缓冲液和磷酸盐缓冲液的区别:磷酸缓冲液是鉴于PO43-,HPO42-,H2PO4-之间的缓冲能力而有其中的任意两种组成的缓冲液,而磷酸盐缓冲液是指由氯化钠,氯化钾,磷酸二氢钾,磷酸氢二纳而配成的溶液。远慕生物常备货产品为1×PBS缓冲液,经过除菌处理,可直接使用。?4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。1×PBS缓冲液工作液能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力,是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆及细胞培养等,pH为7.4,与人体血液等渗,本产品为1×工作液,经过除菌处理,可直接使用。?4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。?

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2019.10.11

血清蛋白电泳操作步骤及注意事项

血清蛋白电泳即用电泳方法测定血清中各类蛋白占总蛋白的百分比。下面详细介绍血清蛋白电泳操作步骤及注意事项。血清蛋白电泳操作步骤1、 开机,启动电泳仪。2、 将1个(用于7 PROTEIN或用于15 RPOTEIN)或2个(用于30 PROTEIN)加样梳置于平板上,有数字的一端向上,在2分钟内完成每块加样梳的加样,每孔加10ul样品,然后齿梳向上把加样梳放于湿盒内5分钟。3、选择相应的电泳程序,使用HYDRAGEL 7 PROTEIN(E)时选择仪器的“PROTEIN 7”电泳程序,使用HYDRAGEL 15/30 PROTEIN(E)时选择仪器的“PROTEIN 15/30”程序。 4、从包装袋内取出缓冲条,将其固定在电极支架背侧的钉上,再取出凝胶,用薄滤纸快速轻轻地吸去凝胶表面多余的液体,在温控板表面下1/3处加120 ?l[HYDRAGEL 7 PROTEIN(E)]或200ul[HYDRAGEL 15 PROTEIN(E)]蒸馏水或去离子水,将凝胶片底边紧靠框架底边,边缘对齐边线,略弯曲凝胶片慢慢放平,注意凝胶片下面勿出现气泡。5、自然放下支架,从湿盒中取出加样梳并去除齿梳下的保护支架,7和15个样品分析的加样梳置于支架6号位,30个样品分析的加样梳则分别置于3号和9号位,注意点样梳上的数字必须面对操作者,关上电泳舱盖,按下键盘左侧的绿色箭头“START”键,电泳开始,确保仪器右侧的空气通道不被堵塞。6、电泳仪自动发出蜂鸣声,提示电泳结束,打开电泳盖,将加样梳和缓冲条丢弃,取出已烘干的胶片,用湿纸巾擦拭电极和温控板,将胶片固定于凝胶支架上放入染色空间中,在检查染色液瓶内是否有300ml染色液,脱色液瓶内是否有1000ml脱色液以及是否排空了废液瓶后,选择“PROT./B1-B2/Hb”染色程序并按“start”键开始染色。7、在染色、脱色以及干燥步骤完成后,电泳仪自动发出蜂鸣声,取出凝胶支架,将烘干的胶片用光密度仪进行扫描,若希望胶片背景更加清晰,在进行扫描前可以额外增加一个冲洗步骤,程序为“WASH ISOENZ/GEL”。 ㈧ 关机,在电脑系统上对扫描结果进行分析。血清蛋白电泳操作注意事项1、为达到最jia检测效果,同一试剂盒内的所有组分必须一并使用。2、氨基黑染液的配制必须按照试剂盒内使用说明配置,否则会降低蛋白片段的检测效果。3、用薄滤纸吸去凝胶表面多余液体时,接触时间不能太长,应快速移去,以免凝胶脱水。4、注意先挂缓冲条再放凝胶片,缓冲条取出时应均匀挤捏使缓冲液能分布均匀。血清蛋白电泳原理在碱性环境里,血清蛋白皆带阴电荷,在电场中向阳极泳动,因各蛋白质等电点和分子量有差异,分子量小、阴电荷多泳动最快;分子量大、阴电荷较少者泳动较慢。电泳后,从阳极开始,依次为白蛋白、a1球蛋白、a2球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白五个区带。?

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2019.10.11

胎牛血清使用中的常见问题

1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。3、实验室如何选择适合的血清?国内一致认为HYCLONE的血清是最hao的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,知名度不高,但是其实在国外已经做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE不相上下,但价格相对优惠很多。4、 如何避免血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。(5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。5、 培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。6、 为什么要热灭活血清?加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学 研究,培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。7、 有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物 的分裂扩增。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!8、细胞培养 中出现黑点是污染吗?如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;(2)血清质量不好,反复冻融的结果;(3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;(4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;(5)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。9、 细胞培养中如何防止黑点生成?(1) 尽可能地减少血清冻融次数。(2) 培养基无需37℃水浴。(3) 培养基保持最jiaPH值7.0- 7.2。(4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。(5) 掌握细胞传代的最jia时机,细胞切勿生长过老。10、小牛血清和胎牛血清有何区别与注意事项?来源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。组份与比例不同:两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时 ,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,绝dui不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。

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2019.10.08

蛋白质产品抗癌T细胞

       西雅图UW医学蛋白质设计研究所(IPD)的科学家创造了一种新蛋白质,该蛋白质模仿关键的免疫调节蛋白质白介素2(IL-2)的作用。IL-2是一种有效的抗癌药,是一种针对自身免疫性疾病的有效治疗方法,但其毒性副作用限制了其临床实用性。       在1月10日的《自然》杂志上的一篇论文中,研究人员报告称,他们使用计算机程序设计了一种蛋白质,这种蛋白质在动物模型中显示出与天然存在的IL-α具有相同的刺激抗癌T细胞的能力。 2,但不引发有害副作用。      研究人员说,这项成就为设计用于治疗癌症,自身免疫性疾病和其他疾病的蛋白质疗法提供了新的方法。      该新蛋白质被称为Neo-2 / 15,因为除了模仿IL-2的作用外,该蛋白质还可以模仿另一种白介素IL-15的作用,该物质正在研究中,作为另一种可能的抗癌免疫疗法。       该论文的主要作者说:“人们已经尝试了30年的改变IL-2使其更安全和更有效的方法,但是由于天然存在的蛋白质往往不是很稳定,因此这被证明是很难做到的。” IPD生物化学家Daniel-Adriano Silva。“ Neo-2 / 15非常小而且非常稳定。因为我们从头开始设计它,所以我们了解它的所有组成部分,并且我们可以继续对其进行改进,使其更加稳定和活跃。”      另一位主要作者,内科医师兼医学博士Umut Ulge表示:“ Neo-2 / 15的治疗特性至少与自然产生的IL-2一样好或更好,但在计算上被设计为毒性低得多。 IPD生物化学家。     没有其他治疗选择,IL-2已被用作癌症患者的最hou治疗方法。对于某些患有晚期黑色素瘤或肾细胞癌的患者,IL-2可以达到高达7%的治愈率。但是,它的使用受到限制,因为它只能安全地提供给最健康的患者,并且只能在专门医疗中心的重症监护室使用。      IL-2通过与细胞表面的受体结合而作用于两种免疫细胞。IL-2对细胞行为的影响在很大程度上取决于这些受体相互作用的数量和性质。天然IL-2可以激活负责抗肿瘤活性的β和γ受体细胞,这正是患者想要的。然而,天然IL-2优先结合另一种免疫细胞,该免疫细胞除β和γ受体外还具有α受体。这些细胞会导致严重的毒性和免疫抑制等灾难性副作用。迄今为止,不幸的是,所有批准的IL-2治疗都会引起这些脱靶细胞的优先激活。      但是,新蛋白质不会优先结合有害细胞。这种新分子能够激活靶标抗肿瘤细胞,而不会优先激活负责毒性和免疫抑制的脱靶细胞。      这一发现表明,从头开始设计蛋白质可以使生物上乘的分子具有增强的治疗特性,并且几乎对任何已知或可以预测其结构的生物分子都具有更高的治疗性能,并且副作用较小,研究人员和研究所所长戴维·贝克说。他是威斯康星大学医学院生物化学教授和霍华德·休斯医学研究所的研究员。      为了设计不会引起这些副作用的抗癌蛋白,研究人员使用了由贝克实验室开发的名为Rosetta的计算机程序。研究人员使用罗塞塔设计的蛋白质具有能够结合并激活IL-2受体β和γ的表面,而不是与IL-2受体α结合并激活的表面,IL-2受体α是有害细胞的一部分。      首先,研究人员设计了紧密的蛋白质作为支架,将两个结合位点保持在适当的位置。然后,他们优化了最jia支架的氨基酸序列。这种努力导致了最终的致密蛋白,它与天然IL-2完全不同。在实验室和动物模型中,它与IL-2受体β和γ紧密结合,激活了抗癌免疫细胞,并减缓了肿瘤的生长。因为设计的蛋白质没有与α受体的结合位点,所以有效剂量的Neo-2 / 15不会引起毒性副作用。 

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2019.10.08

远慕生物:2019年国庆节放假通知!!

正值国庆佳节之际,首先感谢您对远慕生物一直以来的支持。在您的支持和信赖下,我们才得以在激烈的市场环境下不断进步!??根据国家法定假期的规定,并结合公司实际情况,现对国庆节放假做如下安排:国庆节放假时间:10月1日(星期二)至10月7日(星期一)放假共7天。其中9月29日(星期天)9月30日(星期一)上班调休,10月8号(星期二)正常上班。如有需要请客户及早下单备货以免耽误您的宝贵时间。??温馨提示:根据以往出行经验,很容易导致汽车扎堆,节前出门不妨做好功课,随时留意路况信息,以免赶上拥堵路段,另外游客出行会比较集中。车流量也会较大,请路上注意安全!??在此,远慕生物全体员工恭祝您国庆节快乐、身体健康、工作顺利、财源广进! 

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2019.09.29

琼脂粉的使用及用途有哪些

      琼脂粉是由琼脂糖和琼脂果胶组成的,是一类从石花菜及其他红藻类植物提取出来的藻胶。琼脂粉具有凝固性,稳定性,能与一些物质形成络合物等物理化学轻质,可用纸增稠剂、凝固剂、悬浮剂、乳化剂、保鲜剂和稳定剂等。那么琼脂粉的用途具体有哪些呢??琼脂粉的用途:       琼脂是无营养的,也就是说一般生物,即使是微生物也不分解它(虽然琼脂属于糖)。因此,常用作为生物培养基,或者一些药物载体。琼脂因为有特殊的胶凝性质,尤其有显著的稳固性、滞度和滞后性,并且易吸收水分,有特殊的稳定效应;已经广泛使用于食用、医药、化工、纺织、国防等领域。      另外,食品工业上应用更广,作增稠剂、凝固剂,琼脂在90度左右融化,40度左右凝结为固体,常吃的果冻、凉粉里都有添加,可以说无害。还可用悬浮剂、乳化剂、稳定剂、保鲜剂。广泛用于制造粒粒橙及各种饮料、果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、肉制品、八宝粥、银耳燕窝、羹类食品、凉拌食品。在微生物培养中琼脂粉的使用:    溶解性是琼脂粉不溶于冷水,易溶于沸水,缓溶于热水。检测凝胶强度为1.5%琼脂粉溶液在20摄氏度凝固后,能够表面不破承受的最大压强是800-1200g/cm2 在生物学实验中,微生物培养基、植物组培培养基常规添加琼脂粉的用量1.5-2% (工作浓度6-25g/L)。当实验中遇到琼脂粉不凝固时,常规的检测方法时pH值,浓度,温度,充分混匀等情况。

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2019.09.26

细胞是如何保持其身份的

        我们体内200多种不同的细胞类型都包含相同的DNA。表达的那些基因中的哪些决定了每种细胞的类型。因此,必须高精度地控制基因的活性。      因此,取决于所表达的基因组部分,干细胞可能会发育成从皮肤到骨细胞的任何东西。     克里斯蒂安·赫林教授的研究小组的研究人员多年来致力于了解控制基因活跃或失活的机制。这项研究对于了解细胞如何变得专门化并保持其身份,正常的胚胎发育以及各种疾病可能如何发生至关重要。     在一项新研究中,在哥本哈根大学的生物技术研究与创新中心(BRIC)和诺和诺德克干细胞生物学中心(DanStem)以及纽约纪念斯隆·凯特琳癌症中心工作的研究人员取得了至关重要的成就新结果。     该结果最近发表在科学期刊《分子细胞》上,提供了对表观遗传机制控制基因活性的方式的见解。    “此外,该结果可能会对某些与所研究的蛋白质复合物相关的癌症的未来治疗产生影响,包括淋巴瘤,白血病和儿童中常见的特殊类型的脑癌,” BRIC教授Kristian Helin说斯隆·凯特琳纪念堂癌症中心研究主任。开启和关闭      调节基因开启或关闭的关键蛋白质复合物之一称为PRC2。为了确保复合物结合到基因组中的正确位置,许多其他蛋白质都与PRC2相关。     在最近发表的文章中,研究小组研究了与PRC2相关的六种不同蛋白质的重要性,研究小组表明,这六种蛋白质均有助于将PRC2导向基因组中的正确位置。    研究人员以15种不同的组合方式,从胚胎干细胞中逐一去除了相关蛋白。通过这种方式,研究人员能够研究每种蛋白质对PRC2复合物在特定区域的活性和结合的贡献。人们发现,直到从干细胞中去除所有六个相关蛋白之前,寻找基因组中正确位置的方法的能力一直保持不变。    研究的主要作者Postdoc JonasH?jfeldt说,这一发现令研究人员感到惊讶。   ``我们假设每种相关蛋白都负责将PRC2复合物引导至其自身区域。取而代之的是,我们看到它们都为建筑群绑定的地方做出了贡献。他说,只要只剩下一种相关蛋白,这种能力就保持完整。 

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2019.09.26

ELISA实验“边缘效应”您知道吗

      我司技术专员在做ELISA实验时,技术人员发现在ELISA实验中“边缘效应”问题值得关注,什么叫“边缘效应”呢?来,一起看看!ELISA实验,有人说简单,有人说复杂。其实这里面有许多的问题是需要我们去着重的深思探讨的,那么ELISA实验边缘效应的问题您考虑到了吗?       我们在使用96孔板的实验测定的时候,常发现有“边缘效应”,也就是外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应”,并且可提高测定的重复性。  远慕ELISA试剂盒优势:1.极高品质:高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础;2.精确特异:特异检测目标分子,结果精确可重复;3.高度灵敏:可检测到pg/mL级别的目标;4.种类齐全:可覆盖人、大鼠、小鼠、兔、鸡、猪、犬等多个种属;5.技术服务:包括售前的标本收集,使用过程中不明白的地方,实验结束后的数据分析!还有培训、委托加工、定制等;6.免费代测:您只需把标本寄过来,我们为您节省时间,帮您出结果,原始数据,分析数据均可提供,一般时间是5天左右;7.质量保证:合同上注明了有质量问题免费包换,质量问题包括运输不当,客户在使用过程中测不出结果等等。 上海远慕一路走来依靠丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格的优势等成为试剂行业的遥遥lin先者。当然这些都离不开大家的支持。我们在日后不论是销售部门、技术部门还是行政部门都要不断壮大,虚心学习,集思广益,事无具细的为客户所想,急客户所急。让客户满意,才是我们永恒的追求!

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2019.09.23

远慕生物:抗体的生产制备进程剖析抗体特异性差

      抗体是生物学科研工作中有力的东西,没有之一。这些“制导武器”,会在研究中自动寻觅并结合研究者感兴趣的目标,并可经过各种示踪技能将目标展现出来。正是因为抗体的专一特性,研究者或许会依赖于示踪试验所显示的成果对所研靶标给出定性或定量的判断。也正因此,毫无疑问的,专一性或特异性是抗体zui受科研工作者重视的特性。那么,抗体特异性首要由什么决定?为什么常听到多抗特异性不如单抗的说法?在试验中,是该挑选单抗仍是多抗?   下面咱们将就抗体的生产制备进程剖析抗体特异性差异的原因。      咱们不“生产”抗体,咱们只是大自然的“挑选”工抗体的制备,无论是单抗仍是多抗,其前期的动物免疫进程是完全相同的,差异仅仅在挑选。或者说,单抗是在多抗制备的基础上,进一步挑选并安稳表达特异单克隆细胞株的成果。当抗原免疫动物后,在淋巴结和脾等淋巴器官内经过一系列抗原处理和递呈,促进B淋巴浆母细胞(Plasmablasts, PBs)分解老练,在转录水平成为排泄特异抗体的B淋巴浆细胞(Plasma cells, PCs),很多不同的浆细胞会排泄不同的针对抗原的抗体。由此,可以说每一个B浆细胞都成为一株单克隆抗体的候选者。        传统的单克隆抗体制备便是经过将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系交融,挑选可以排泄特异抗体并安稳传代的交融细胞株而实现的。而多克隆抗体(多抗)的制备便是从血清中分离纯化一切的未经挑选的单克隆抗体。从以上进程可以看出,无论是单抗仍是多抗制备办法,其针对靶点(抗原)的特异性抗体的发作首要源于被免疫动物本身的浆细胞分解老练,抗体生产者(人)其实并没有做什么。       不同在于,多克隆抗体犹如许多单克隆抗体的调集,它们有的特异性高,有的特异性低,总体特异性符合正态分布曲线的方式(如Fig1),而其特异性的总体表现也应处于统计学正态曲线中位线(MID)的水平。而单抗制备后续的挑选进程,可去除大部分的非特异抗体,保存几株特异性较好的单克隆抗体。        然而,单抗制备进程中的细胞交融是一个随机发作的进程,动物脾脏内的各种细胞如内皮、平滑肌、巨噬、NK、T、还有红细胞、血小板等都或许与骨髓瘤细胞系发作交融。尽管B细胞是脾脏内首要的淋巴细胞,但可以排泄特异性抗体的老练浆细胞占脾细胞的比例很低,加之促细胞交融试剂如PEG等的细胞毒性,使得终成功交融形成安稳表达特异性抗体的杂交瘤细胞系的功率极低,大约为10-6。因此,在单抗制备进程中,大部分排泄特异性抗体的B细胞或许都被丢失了。终获得的单克隆抗体其亲和力和特异性或许都不是本次免疫中zui好的。

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2019.09.23

远慕生物:影响细胞转染的因素

      外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72h内分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。稳定转染:外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,通常需要一些选择性标记反复筛选得到稳定转染的同源细胞系。方法及特点:化学法:磷酸钙法、DEAE-右旋糖苷法、阳离子脂质体法物理法:电穿孔法、显微注射法、biolistic颗粒传递法病毒介导法:逆转录病毒、腺病毒阳离子脂质体法:带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。影响转染的因素:1、血清  血清影响复合物的形成,降低转染效率阳离子脂质体和DNA的zui佳量在使用血清时会有所不同,因此想在转染培养基中加入血清时要进行条件优化。大部分细胞可以在无血清培养基中几个小时内保持健康,对于对血清缺乏比较敏感的细胞,可以使用OPTI-MEM I培养基。对于对血清缺乏比较敏感的贴壁细胞,建议使用LIPOFECTAMINE 2000。2、抗生素 比如青霉素和链霉素,是影响转染的培养基添加物。这些抗生素一般对于真核细胞无毒,但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性,使抗生素可以进入细胞。这降低了细胞的活性,导致转染效率低。3、细胞代数  转染前细胞zui好经过1-2次传代保证细胞生长旺盛容易转染,注意贴壁细胞一旦长满就不好转染。4、细胞铺板密度  一般转染时,贴壁细胞密度为70%-90%,悬浮细胞密度为2*10^6--4*10^6细胞/ml时效果较好。确保转染时细胞没有长满或处于静止期。铺板细胞数目的增加可以增加转染活性和细胞产量。5、DNA质量  DNA质量对转染效率影响非常大。一般的转染技术基于电荷吸引原理,如果DNA不纯,如带少量的盐离子,蛋白,代谢物污染都会显著影响转染复合物的有效形成和转染的进行。

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2019.09.19

肠道菌为何能影响我们的健康

   科学家们发现了一种机制,可以解释干细胞是如何选择变为特定的细胞类型的:这些细胞在沿着DNA的位点上组合了数组特定的蛋白质。当这几组特定的蛋白质组合到一起时,大门被打开,几组特定的基因由此获得利用,赋予了细胞新身份。    科学家们现在确定了其中的一种组合,其沿路驱动细胞使得它们变为了肝脏和胰腺之类的器官。这一研究有可能引导科学家们更好地了解,如何在实验室中生成可用于1型糖尿病治疗的胰岛素分泌细胞。    科学家们揭示了新细胞身份的获取机制;一些细胞响应来自周围环境的信息,转而在DNA的某些特定位置上激活了特异的蛋白质组合,开启了遗传程序。    助理教授说:“我们将一种特殊的化合物添加到培养基中,促进了生成一些新细胞类型。只有少数的蛋白质可以译解这一化合物传递的信息。我们随后沿着细胞的DNA寻找了被化合物激活的蛋白质所在的位置。利用另一种化合物我们重复了这一实验,由此了解了这些反应的特异性,并将细胞朝着不同的细胞命运定向时决定利用的一些基因进行了分类。”    人类多能干细胞研究领域的焦点一直都放在寻找正确的药物或化合物组合,利用它们来驱动培养皿中细胞转变为特定细胞类型这一方向上。    “然而却没有去了解这些化合物激活一些基因,赋予细胞特殊身份的机制,导致了不同实验室采用的方法重复性差。这就好比,如果你采用预混合粉来烤蛋糕,你用完了一种重要的成分,又不知道如何替代它的作用,你将会面临一些问题。我们相信,我们的研究提供的一些有用的信息将会帮助更好地认识配方,因此我们可以一种更可控的方式来生成功能性细胞。”    由于干细胞团体将太多注意力都放在实验室生成治疗用细胞上,因此科学家们强调继续开展这类重要基础研究工作非常的重要。“我们的终目标是了解干细胞做出选择的机制,这还可以帮助提高那些将干细胞投入临床应用的研究工作的质量。”

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2019.09.19

甜菜苷再生与降解的条件

    甜菜苷是从甜菜根中提取的,是甜菜中的主要色素,可溶于水,可用于作各种食品的着色剂。由于它在水溶液中对温度的稳定性差,在实际应用上受到了限制。     有氧气存在的条件下,甜菜苷极易发生降解。在缺氧的条件下,降解就减慢。然而,甜菜苷在水溶液中的降解是可逆的,其再生的程度与溶液的pH值等因素有关。为了增强甜菜苷的热稳性能,必须尽量减少溶液中的氧气,同时,还要尽量创造使甜菜苷再生的条件。?甜菜苷降解的条件:   在有氧气存在条件下,甜菜苷极易发生降解。在缺氧条件下,降解就减慢。然而,甜菜苷在水溶液中的降解是可逆的,其再生的程度与溶液的pH值等因素有关。为了增强甜菜苷的热稳性能,必须尽量减少溶液中的氧气,同时,还要尽量创造使甜菜苷再生的条件。水溶液中的甜菜苷加热后即水解为甜菜醛氨酸和环二羟基苯丙氨酸-5-O-苷,而甜菜苷再生是水解过程的逆反应甜菜苷再生的条件:   当甜菜醛氨酸溶液和环二羟基苯丙氨酸-5-O-苷溶液结合在一起时,就会迅速生成甜菜苷。科研人员进行了一系列实验,以摸清甜菜苷水解后发生逆反应的条件,特别是在无氧条件下,发生降解和再生的情况。实验证明,甜菜苷在水溶液中降解的确会形成甜菜醛氨酞和环二羟基苯丙氨酸-5-O-苷,此反应是部分可逆的,它取决于甜菜苷的起始浓度和温度条件。甜菜醛氨酸和环二羟基苯丙氨酸的浓度愈高,再生比例就愈大,从而减少了甜菜苷发生降解的总量。在氧气存在的条件下,甜菜苷的降解率比无氧条件下高。当溶液的温度增高时,甜菜苷的再生率也随之增加,但其降解率则升高。所以,在高温条件下,甜菜苷的损失比在低温条件下要大。

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2019.09.16

为什么说原花青素是较强的抗氧化剂

    原花青素,简称PC,是植物中广泛存在的一大类多酚类化合物总称,其低聚物:低聚原花青素(OPC)是公认、除去人体内自由基有效的天然抗氧化剂。 一般为红棕色粉末,气微、味涩,溶于水和大多有机溶剂。     结构上、原花青素是由不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成。是简单的原花青素是儿茶素、或表儿茶素、或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体,此外还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小,通常将二~五聚体称为低聚原花青素(简称OPC),将五聚体以上的称为高聚原花青素(简称PPC)。    原花青素(OPC)存在于黑枸杞、葡萄籽、银杏叶、柏树、松树皮、黑米种皮、玫瑰花等植物中,是一种天然的较强抗氧化剂。    花青素(VMA)主要存在于蓝莓果实、紫薯、葡萄皮中。较主要的作用是能缓解眼部疲劳,加速维生素A在视网膜上合成视紫质的速度。其除去自由基、抗氧化的能力远不及OPC。    两者是不同的物质。但OPC在植物体内能转变成VMA,所以叫“原花青素”。   “原花青素”并不是较强的抗氧化剂。如果用VE作为比较,番茄红素(胡萝卜素)除去自由基的能力是VE的100倍。但OPC除去自由基的能力只有VE的50倍。而已知较强的抗氧化剂——虾青素除去自由基的能力是VE的1000倍!    但是,这并不能阻碍OPC成为医学界、营养学界中使用的较强的天然除去自由基的物质。因为比OPC具有更强除去自由基的番茄红素和虾青素等都是脂溶性物质,也是说必须溶解在有机相中才能吸收,再加上这些物质在食物中含量并不高,所以真正能从食物中获得的量非常少。而如果不吸收,算在实验室里的功效再强,也发挥不了生理作用。   另外,人体内大多是水,这些物质算吸收后,无法溶解在体液中,发挥作用的部位也有限。这大大抑制了这些具有更强除去自由基能力的物质发挥作用。而OPC是水溶性,在总体吸收率上远远优先于其他物质,并且作用的范围是全身的体液。这使得OPC成为了现在在医学界和营养学界中使用的较强的除去自由基的物质。

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2019.09.16

标准品、对照品、质控品和参考品有什么区别?

    标准品:是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质,用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质,按效价单位或以g计,以国际标准品进行标定。     对照品:是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质,除另有规定外,均按干燥品(或无水物)进行计算后使用。     校准品:即校准物,具有在校准函数中用作独立变量值的参考物质;应具有定值和已知的测量不确定度,其目的应是校准某一测量系统,从而建立此系统测量结果的计量学溯源性。 质控品:用于体外诊断的质量控制物质(定值和非定值),是一种旨在用于医学用途的检测系统中使用的物质、材料、物品或设备,其目的是评价或验证测量精密度、测量准确度、由于试剂或分析仪器的变化检测系统可能产生的分析偏差等性能特征。质量控制物质(定值和非定值),可用于能力验证、实验室内质量控制。 ?   定值质控品:定值质控品有制造商使用合适的分析方法或过程分析的参考值,并指定参考范围;   ?    非定值质控品:非定值质控品可以在标贴上标示目标浓度(如:低、高、中),但是没有指定的参考范围,可以不用指定非定值质控品应用的分析测试系统,但需满足质量控制的系统规则。    参考品:即参考物质,具有一种或多种足够均匀和很好地确定了的特性,用以校准测量装置、评级测量方法或给材料赋值的一种材料或物质。

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2019.09.12

远慕生物:2019年中秋节放假通知!!

    正值中秋佳节之际,首先感谢您对远慕生物一直以来的支持。在您的支持和信赖下,我们才得以在激烈的市场环境下不断进步      2019年中秋节放假安排】中秋节:9月13日至9月15日 ,9月16日(星期一)上班。如有需要请客户及早下单备货以免耽误您的宝贵时间。 在此,远慕生物全体员工恭祝您中秋节快乐、身体健康、工作顺利、财源广进!上海远慕生物科技有限公司2019年9月12日 

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2019.09.12

血清在细胞培养中的鉴别方法及作用

      血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆zui大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。 ? 主要作用:1,提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。2,提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。3,提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。4,提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。5,对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。

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2019.09.09

抗原抗体的生物活性!

抗原抗体的主要功能从而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物,中和它们所释放的毒素或清除某些自身抗原,使机体保持正常平衡,但有时也会对机体造成病理性损害,如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生,对人体可造成危害。 (1)结合特异性抗原:抗体与其他免疫球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。 (2)激活补体:抗体与相应抗原结合后,借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。 (3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与免疫应答。 (4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。  免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 (5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。 (6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。

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2019.09.09

关于IgG的作用,及与IgM的区别

     IgG全称Immunoglobulin G,又称免疫球蛋白G。是血清主要的抗体成分,约占血清Ig的75%。其中40~50%分布于血清中。IgG主要由脾、淋巴结中的浆细胞合成和分泌,以单体形式存在。人IgG有四个亚型:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的作用      IgG的功能作用主要在机体免疫中起保护作用,大多数抗菌、抗病毒;应对麻疹、甲型肝炎等,能有效地预防相应的感染性疾病。IgG是唯1可以通过胎盘的免疫球蛋白。来自母体的IgG在出生后数月对防御白喉、麻疹、脊髓灰质炎等感染起着重要作用,母体传递给胎儿的IgG于生后6个月几乎全部消失,而婴儿自身产生IgG从3个月时才逐渐增多,故6个月后易患感染。3-5岁是渐接近成人水平。IgM和IgG的区别1、IgG抗体是抗体中分子量最小的一种,可通过胎盘输给胎儿,保护了婴儿最初六个月内免受感染。该抗体产生晚,维持时间长,消失慢,浓度高。血中检测到可作为远期感染指标。2、IgM抗体是抗体中分子量最da的一种,不能通过胎盘输给胎儿。抗体产生最早,一经感染,快速产生,在感染初期抗感染起作用。但维持时间短,消失快。3、灵长类动物主要有四种免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、和IgE。     所有用于检测抗原的免疫学方法经适当改良后,均可用于抗体的检测,如IFA、ELISA、RIA、LA......由于抗原方法的敏感性提高和PCR技术的应用,使得HSV抗体在HSV感染个体中的不均一性和不稳定性影响了这类指标在临床诊断中的意义,但作为一种感染有关指标,在一定的范围和情况下,仍有必要进行检测和深入研究.目前HSV特异性抗体的检测,主要有IgG、IgM和IgA三种。IgM抗体和IgG抗体的区别      IgG是生物体液内主要的Ig,约占血液中Ig总量的70~75%。由于IgG能通过胎盘,所以新生儿从母体获得的 IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2~4周开始合成IgG,8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内,因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原微生物和中和细菌毒素的能力方面,具有重要作用,能有效地抗感染,这是对人体有利的一面。但某些自身免疫病,如自身免疫性溶血性贫血、血小板减少性紫癜、红斑狼疮以及类风湿等中的自身抗体都是IgG。一旦它与相应的自身细胞结合,反面加强了组织损伤作用。       IgM在Ig中分子量最da,通常称为巨球蛋白,占血清Ig总量的10%。在电子显微镜下观察,IgM由五个基本结构相同的单体组成。各单位间由一条连结链(J链)连结成“星状”的五聚体。IgM是在个体发育过程中最早产生的抗体,也是经抗原刺激的动物体内最xian出现的抗体,因此检查IgM的含量,有助于传染病的早期诊断。IgM在胎儿3个月后即开始合成,但水平很低,1~2岁时血清中IgM含量达到成人水平。通过结合补体,IgM有溶解细菌和溶解血细胞的作用,并能中和病毒,其效能比IgG高100倍以上。很多抗微生物的天然抗体、同族血凝素(抗A型与抗B型血)、类风湿病中的类风湿因子以及梅毒的补体结合抗体都属于IgM。

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2019.09.05

台盼蓝染色法鉴定细胞活力原理

      正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。?     注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现  象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。用品:1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。2. 吸管、血细胞计数板、显微镜步骤:1、制备单细胞悬液。并作适当稀释(106 细胞/ml)2、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。3、计数:在三分钟内,用计数板分别计数活细胞和死细胞结果统计:镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染。根据下式求细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。台盼蓝染色方法:A:胎盼蓝母液∶5×生理盐水=4∶1B:台盼蓝A液∶细胞悬液=1∶2=20 μL∶40 μL活细胞数=稀释倍数×1.5×104×四个方框总胎盼蓝拒染活细胞数/4

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2019.09.05

维生素测定原理及注意事项

维生素是维持机体不可缺少的一类营养,虽然需要量小,但十分重要,一旦缺乏,会引发相应的维生素缺乏疾病。婴幼儿食品和乳品中含有天然的维生素,有的也有人工添加。在食品外包装上,会要求印有该食品含有哪些营养素及其含量多少(1)。我国的国家食品安全标准中,对婴幼儿食品和乳品中的维生素含量也有规定,如每100千卡的食品中的叶酸含量至少为10.5μg,多不超过50.2μg(2)。之所以限定维生素的高量,是因为维生素摄入过多,也会引发一些问题。 那么,如何来测定这些维生素的含量呢?根据国家出台的标准,不少维生素含量是采用色谱的方法来测定。有五种维生素是采用微生物法。它们是叶酸、维生素b12、烟酸、泛酸和生物素。本文重点讲述前两种。以叶酸为例,微生物法的原理是,根据细菌对叶酸的营养需求,在一系列不含叶酸的培养基中从低到高添加已知含量的叶酸以及待测的食品样品,在37°C孵育18小时。因为有了叶酸,细菌能生长得很好,培养液发生浑浊。细菌越多,培养基就越浑浊,吸光度就越高。通过已知含量的叶酸样品的吸光度,以及待测样品的吸光度,就能确定待测样品中的叶酸含量。 测定所用的菌株均有规定。叶酸为鼠李糖乳杆菌,又称作干酪乳杆菌鼠李糖亚种(ATCC 7469)(3),维生素b12为莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830)(4),均可从ATCC等菌种库购买。维生素测定所用的培养基可以自己配,也可以购买商品化的培养基,其来源得是经过国际认证的微生物培养基生产厂家,如HiMedia Laboratories公司,这样质量较为可靠,其培养基组成也符合食品中叶酸和维生素B12测定的食品安全国家标准。 在测定中有两个非常重要的注意事项:一是由于灭菌条件,孵育温度等因素会影响标准曲线读数,并且每次该不会完全一样,因此每次测定时都应同时制备标准曲线。二、应小心避免培养基和玻璃器具遭受污染。杂菌生长会导致实验失败。同时应使用洁净的无去污剂的玻璃器具。因为任何少量的外源物质都可能导致测定结果的偏离。      测定前还需要进行菌株的培养和接种菌液的制备。接种菌液来自于储备菌种。但保存数周以上的储备菌种,不能立即用作接种液制备,实验前宜连续传种2-3代以保证细菌活力。所用培养基也都有商品化的可选。      总之,微生物法测定微生物B12和叶酸等维生素灵敏度高,但也需要注意避免测定中可能产生的一些问题,这样才能把实验做好。 注释:(1)GB 13432—2013 《食品安全国家标准 预包装特殊膳食用食品标签》(2)GB10765—2010《食品安全国家标准 婴儿配方食品》(3)GB 5009 211-2014《食品安全国家标准 食品中叶酸的测定》(4)GB 5413 14-2010《食品安全国家标准_婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》

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2019.09.02

干细胞如何领到它们的新身份

   科学家们发现了一种机制,可以解释干细胞是如何选择变为特定的细胞类型的:这些细胞在沿着DNA的位点上组合了数组特定的蛋白质。当这几组特定的蛋白质组合到一起时,大门被打开,几组特定的基因由此获得利用,赋予了细胞新身份。    科学家们现在确定了其中的一种组合,其沿路驱动细胞使得它们变为了肝脏和胰腺之类的器官。这一研究有可能引导科学家们更好地了解,如何在实验室中生成可用于1型糖尿病治疗的胰岛素分泌细胞。    科学家们揭示了新细胞身份的获取机制;一些细胞响应来自周围环境的信息,转而在DNA的某些特定位置上激活了特异的蛋白质组合,开启了遗传程序。 ?    助理教授说:“我们将一种特殊的化合物添加到培养基中,促进了生成一些新细胞类型。只有少数的蛋白质可以译解这一化合物传递的信息。我们随后沿着细胞的DNA寻找了被化合物激活的蛋白质所在的位置。利用另一种化合物我们重复了这一实验,由此了解了这些反应的特异性,并将细胞朝着不同的细胞命运定向时决定利用的一些基因进行了分类。”    人类多能干细胞研究领域的焦点一直都放在寻找正确的药物或化合物组合,利用它们来驱动培养皿中细胞转变为特定细胞类型这一方向上。    “然而却没有去了解这些化合物激活一些基因,赋予细胞特殊身份的机制,导致了不同实验室采用的方法重复性差。这就好比,如果你采用预混合粉来烤蛋糕,你用完了一种重要的成分,又不知道如何替代它的作用,你将会面临一些问题。我们相信,我们的研究提供的一些有用的信息将会帮助更好地认识配方,因此我们可以一种更可控的方式来生成功能性细胞。”    由于干细胞团体将太多注意力都放在实验室生成治疗用细胞上,因此科学家们强调继续开展这类重要基础研究工作非常的重要。“我们的终目标是了解干细胞做出选择的机制,这还可以帮助提高那些将干细胞投入临床应用的研究工作的质量。”

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2019.09.02

那么做ELISA实验时要注意那些问题呢?

上海远慕生物科技有限公司的ELISA试剂盒质量可靠 灵敏度高 效果稳定 实验效果好.那做做ELISA实验时要注意那些问题呢?下面就一起来探讨了解一下吧!  一 样品稀释  一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性.酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性.  二 试剂盒平衡  Elisa中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上.平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分.冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟.  三 样品和试剂的混匀  在稀释前 后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性.  四 加样  加样是一项很重要的步骤.加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡.加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性.加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附.  五 温育  温育是ELISA中影响成败的为关键因素.ELISA作为一种固相免疫,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间.  六 洗板  固相免疫技术是一种非均相免疫技术,需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来,以保证ELISA的特异性.洗液尽量不要溢出孔外;加洗液后要静置1分钟,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及时更换吸水纸,尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去,否则可能影响试验结果.  七 显色  显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可.一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加.  八 比色  比色要注意波长的选择.以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用,而前者比色波长为450nm,后者为492nm,滤光片需根据要求随时更换.因此,容易出现滤光片错用的问题.?

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2019.08.29

影响培养基灭菌效果的因素

培养基灭菌是否彻底,直接影响科研检测数据,影响培养基灭菌的因素很多,除了培养基内杂菌的种类和数量,灭菌时间长短和温度高低,还取决于以下几点 营养成分的保持 湿热灭菌时,微生物被杀死的同时,培养基的营养成分也遭到了一定的破坏,特别是氨基酸和维生素。如在121℃,仅20min,就有59%的赖氨酸和精氨酸及其他碱性氨基酸被破坏,蛋氨酸和色氨酸也有相当数量被破坏。在热的作用下某些营养成分还可能因受热而相互之间发生反应,造成培养基中原有营养成分的数量变化,因而影响培养基质量。 微生物的耐热性 细菌芽孢的热阻较大,灭菌所需要的时间取决于把细菌芽孢减少到所规定数目的时间。 pH值 pH值对微生物的耐热性影响很大。pH值介于6.0~8.0时,微生物最不易死亡。pH 培养基的成分 油脂、糖类及蛋白质等组成的高浓度有机物会包于细胞的周围形式一层薄膜、影响热的传导。而高浓度的盐类、色素则削弱其耐热性,灭菌较易。例如:大肠杆菌在水中加热至60-65℃便死亡,在10%糖液中需70℃加热4-6分钟才死亡,在30%糖液中需30分钟才死亡。一般糖类含量较多的时候选用115℃,30分钟;一般的培养基可选择121℃20分钟。 泡沫 泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死其中的杂菌。 颗粒 颗粒小,容易灭菌,颗粒大,则难灭菌。对于含有少量较大颗粒及粗纤维的培养基,可用粗滤的方法(不应影响培养基质量)予以除去,培养基结块会造成培养基灭菌的不彻底。 灭菌锅内空气是否排净 这个是影响灭菌是温度和压力比例关系的要点,同样达到了相同的压力的情况下,如果空气未能排净,也就是说不是纯蒸汽灭菌,此时的温度不一定能达到目的要求,会严重影响灭菌效果?

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2019.08.29

配制标准溶液您必须知道的事

标准溶液是分析的重要依据,因此在配制及标定过程中的一些要求规范您一定要知道呦~标准溶液的取得有两种方法,一种是用基准物质直接配制,一种是用基准物质或已知准确浓度的标准溶液进行标定来取得。用于配制或标定标准溶液浓度的最gao纯度化学试剂称为基准试剂或基准物质,用基准试剂或基准物质配制成已知准确浓度的溶液称为标准溶液。标准溶液的浓度准确与否直接关系检测结果的精密度、准确度。因此配制和标定中你必须知道这些事:1、用于配制或标定的标准溶液浓度的基准物质必须符合以下条件:(1)纯度高、杂质含量一般不得超过0.001%,达到优级纯。(2)化学性质稳定,不易吸湿,不被空气氧化,干燥时不分解。(3)分子量大,使用时易溶于水、稀酸、稀碱和有机溶剂,能精确称量。(4)使用中符合化学反应的要求,组成恒定,标定时能按化学反应式定量完成,没有副反应或逆反应,便于计算。2、基准试剂必须经充分干燥后称取,当指定使用含有结晶水的试剂时,只能将其放在适宜的干燥器内进行干燥而不得加热。3、分析实验所用的溶液应用纯水配制,容器应用纯水洗三次以上。特殊要求的溶液应事先作纯水的空白值检验。(应符合GB-6682《实验室用水规格》中三级水的规定。4、所用试剂的纯度应为分析纯或分析纯以上,根据不同的工作要求合理选用相应级别的试剂。5、为保证试剂不受污染,应用清洁的牛角勺从试剂瓶中取出,绝不可用手抓取。6、试剂结块可用洁净的粗玻璃棒或瓷药铲将其捣碎后取出。7、打开易挥发的试剂瓶塞时不可把瓶口对准脸部。夏季由于室温高,试剂瓶中很易冲出气液,最hao把瓶子在冷水中浸一段时间再打开瓶塞。放出有毒,有味气体的瓶子应该密封。8、若嗅试剂气味,可将瓶口远离鼻子,用手在试剂瓶上方扇动,绝不可用舌头品尝试剂。9、所用天平的砝码,滴定管,容量瓶及移液管均需定期校正。10、配制硫酸,磷酸,盐酸等溶液时,都应把酸倒入水中。对于溶解时放热较多的试剂,不可在试剂瓶中配制,以免炸裂。11、配制硫酸溶液时,应将浓硫酸分为小份慢慢倒入水中,边加边搅拌,必要时以冷水冷却烧杯外壁。溶解氢氧化钠,氢氧化钾等时,大量放热,也必须在耐热容器中进行。12、用有机溶剂配制溶液时,有时有机物溶解较慢,应不时搅拌,可以在热水浴中温热溶液,不可直接加热。易燃溶剂使用时要远离明火。几乎所有的有机溶剂都有毒,应在通风柜内操作,为避免有机溶剂不必要的蒸发,烧杯应加盖。13、不能用手接触腐蚀性及有剧毒的溶液,剧毒废液应作解毒处理,不可直接倒入下水道。14、溶液要用带塞的试剂瓶盛装,见光易分解的溶液要装于棕色瓶中,挥发性试剂例如用有机溶剂配制的溶液,瓶塞要严密,见空气易变质及放出腐蚀性气体的溶液也要盖紧,长期存放时要密封。浓碱液应用塑料瓶装,如装在玻璃瓶中,要用橡皮塞塞紧,不能用玻璃磨口塞。15、配制或标定标准溶液所用试剂必须是基准试剂或优级纯试剂。16、用直接法配制标准溶液时,准确称取一定量的基准试剂溶解后移入容量瓶中,用溶剂稀释到标线。根据所取的基准试剂的量和容量瓶的容量直接计算溶液的准确浓度。17、用间接法配制标准溶液时,先配成稍高于所需浓度的溶液,用基准试剂或已知浓度的标准溶液准确标定其浓度。必要时用稀释法调整其浓度至所需值。18、配制好的标准溶液应注明名称、浓度、配制日期、有效期、配制人,其浓度:用 mol/L、mg/L、ng/L表示。19、每份基准试剂的用量不应过小,使用25ml滳定管时,以能消耗20ml滴定液为宜;实用50ml滴定管时,以能消耗45ml滳定液为宜。20、对浓度不稳定的标准溶液,应酌情定期重新标定。最hao在每次使用前进行标定。21、除高氯酸外,均指20℃时的浓度。在标准滴定溶液标定,直接制备和使用时若温度有差异,应要求补正。22、GB601-2002规定标定标准滴定溶液的浓度时,须两人进行实验,分别各做四平行,每人四平行测定结果极差的相对值不得大于重复性临界极差[CrR95(4)]的相对值0.15%,两人共八平行测定结果极差的相对值不得大于重复性临界极差[CrR95(8)]的相对值0.18%。23、标准滴定溶液浓度平均值的扩展不确定度一般不应大于0.2%。24、滴定分析用标液在常温(15-25C)下,保存时间一般不超过2个月.当溶液出现浑浊、沉淀、颜色变化等现象时,应重新配制。25、制备的标准溶液浓度与规定浓度相对误差不大于5%。浓度值取四位有效数字。26、配制浓度等于或低于0.02mol/L标准溶液时,应于临用前将浓度高的标准溶液用煮沸并冷却的水稀释,必要时应重新标定。27、碘量法反应时,溶液的温度不能过高,一般在15~20℃之间进行滴定。28、在标定和使用标准滴定溶液时,滴定速度一般应保持在6mL/min-8mL/min。29、称量工作基准试剂的质量的数值小于等于0.5g时,按精确至0.00001g称量;数值大于0.5g时按精确至0.0001g称量。30、标准滴定溶液的浓度小于或等于0.02moL/L时,应于临用前将浓度高的标准滴定溶液用煮沸并冷却的水稀释,必要时重新标定。31、储存标准滴定溶液的容器,其材料不应与溶液起理化作用。壁厚最薄出不小于0.5mm。32、所有的溶液以(%)表示的均为质量分数,只有乙醇(95%)中的(%)为体积分数。33、各种标准溶液必须按其化学性质进行配制和储存,对于在稀溶液中不稳定的物质,应先配制浓度较高的储备液,使用前 按分析方法的要求配制成稀释液。34、高浓度剧毒或有毒物质的储备液应按有毒试剂的使用和管理办法执行,妥善保管,不得随意放臵。

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2019.08.26

T辅助细胞可能在1型糖尿病的发展中起作用

在东芬兰大学进行的一项研究表明,最近描述的T细胞亚群,即所谓的外周T辅助细胞,可能在1型糖尿病的发展中起作用。观察到循环外周T辅助细胞的频率在最近诊断为1型糖尿病的儿童和随后发展为1型糖尿病的健康儿童中均增加。该研究发表在Diabetologia杂志上。1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,通常表现在儿童时期。在1型糖尿病中,胰腺中产生胰岛素的β细胞被免疫系统破坏。除遗传易感性外,血液中自身抗体的出现预示着1型糖尿病的未来发展。临床糖尿病之前自身抗体的出现是由针对胰岛中蛋白质的B细胞活化引起的。淋巴组织中B细胞的活化又由滤泡辅助T细胞控制。学术研究院院长Tuure Kinnunen及其东芬兰大学研究小组早期的研究表明,接近1型糖尿病发病的儿童血液滤泡辅助T细胞的频率增加。最近,类似的激活B细胞的能力归因于新的T细胞亚群。这些所谓的外周辅助T细胞类似于滤泡辅助T细胞,但它们表达能使它们迁移到发炎组织的受体。目前的研究表明外周辅助T细胞在1型糖尿病发展中的作用。研究人员证明,最近诊断为1型糖尿病的儿童以及健康的自身抗体阳性儿童的血液中这些细胞的频率增加。重要的是,那些后来患有1型糖尿病的自身抗体阳性儿童的发病率明显增加。“根据我们的结果,外周辅助T细胞可能在1型糖尿病的发展中起作用。该信息可用于开发更好的方法来预测1型糖尿病风险和该疾病的新免疫疗法。然而,需要进行更多研究以验证我们的结果并进一步表征外周辅助T细胞的功能,“东芬兰大学的早期研究员Ilse Ekman指出。该研究利用芬兰DIPP研究的样本进行,该研究从患有该疾病遗传风险的儿童的出生开始跟踪1型糖尿病的发展。该研究涉及图尔库大学,赫尔辛基大学和奥卢大学以及哈佛大学的研究人员。 

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2019.08.26

远慕告诉您:如何让细胞乖乖沉睡或满血复活

养细胞时期的小编,常常希望自带一股开gua神力,保护好娇弱的细胞,拯救惨不忍睹的实验!如同《星球大战》里拥有 ”原力光环“的主角们,可以隔空移物,手接闪电,最hou拯救世界!小编至今疑惑“原力”到底是什么? “ I am one with the force ,and the force is with me.”翻译过来比较玄,很像中国武侠小说的内力~“ 我与原力同在,原力与细胞同在冻存的细胞,满血复活吧! ”回    到    现    实经常有用户反映“细胞冻存与复苏遇到了问题”“如何握住原力,让你的细胞乖乖沉睡又满血复活?” 远慕生物的老司机为此做了以下总结:? 选 好 细 胞 冻 存 液 是 基 础使用动物血清常常会遇到很多问题,例如:病毒感染、其他动物源的污染。使用无血清制品培养与冻存细胞,可以消除这方面的隐患。此外,无血清冻存液可以确保细胞在化学成分固定的条件下生长,更进一步确保细胞冻存时的条件稳定。 慢 慢 做 冷 冻若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下来;若是悬浮细胞,请直接按以下步骤进行:1. 以200-300g离心3分钟,弃去上清,收集细胞。2. 用BI无血清冻存液将细胞重悬(不需回温),将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml,添加到冻存管中(一般每管1ml)。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中,置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜(或不需要程序降温)。4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。5. 冻存24小时后,建议检测细胞存活率。 细 胞 复 苏 要 迅 速1. 将细胞冻存管由液态氮中取出,置于室温回温,不用水浴溶解。此时可准备新鲜培养   基、无菌15ml离心管、培养瓶。2. 在生物安全柜内,直接以少量培养基反复冲融,使细胞团块化冻。3. 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基,再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g,3分钟离心收集细胞。4. 倒去上清液,重悬细胞,移到培养瓶中培养。 

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2019.08.22

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