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公司动态

血清分离胶怎么样进行清洗

很多人对于血清分离胶的清洗感到非常的头疼,为什么呢,因为平常的脏污都可以直接用肥皂或者洗衣粉,洗手液这些东西进行清洗,也清洗的非常干净,但是用这些净污一流的洗护用品来清洁血清分离胶,那就跟没洗一样,作用并不大。为什么面对血清分离胶清洗就变得如此的艰难呢,这跟血清分离胶抗水解和成分是有关系的,丙烯酸体系的分离胶与清污用品多是不相溶的,那就更不用谈清洗去污的作用了。很多实验室的小伙伴在做实验时不小心沾染上了血清分离胶会如何处理呢?少量的基本上直接用卫生纸擦干净就可以了,但是有的面积太大卫生纸也是搞不定的时候,他们会采用酒精来进行清洗,血清分离胶是可溶与酒精的,可把酒精进行一定量的稀释,然后再来清洗,唯一不好之处就是用酒精洗手过后,手会显得非常的干燥,因为酒精带走了手上部分的水份。 前段时间也有客户突然问,不小心加了血清分离胶到其他管子里面了,该怎么处理,告知用酒精进行清洗就可以了,后来在客户支支吾吾中才得知,数量超过了5千支,而他们又不想重新购买新的管子,询问这么多管子中的血清分离胶应该如何进行清洗,确实是一个大难题,当时是直接劝说不用清洗再购买的,但是对方也是憋着一口气就是不想买。没办法让他把所有带有血清分离胶的管子直接泡在被稀释的酒精中,看能不能挽救。其实现在市面上已经出现了专用于血清分离胶的清洗剂,这种清洗剂的主要原料也是酒精,所以通常情况下我都会劝说不用特意去购买血清分离胶清洗剂,直接用酒精就好了,当然也不能排除清洗剂有另外的成分能够更快更好的清理血清分离胶。

操作维护

2020.10.22

血清融化的几个小方法

做细胞培养实验经常会对血清冻融,怎么才能有效正确的利用血清也有对应的方法,今天分析如何融化血清让实验更好的完成。与4℃过夜法相比,三步法为什么对血清更好呢?重点有二!其一:关系到沉淀出现的几率!记得吗?血清在融化过程中,瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉,如同蜂蜜溶于水时的亮线,这就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔点高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高级冰淇淋和大棒冰的区别,你懂得!)试想,如果采用4℃过夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大约需要10小时左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此时就很容易有一些蛋白饱和析出,(大多是脂蛋白和纤连蛋白),这就是血清融化中产生沉淀的重要原因之一。采用三步法,只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且最大限度减少了血清沉淀出现的几率。血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白其二:血清在培养细胞中,最重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中最大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。哪个速度对保留活性更好?不言而喻!

应用实例

2020.10.22

种类繁多的培养基该如何去选择?

 细胞培养是大多数生物实验室都会遇到的基础实验,但不是最-简单的实验。细胞培养蕴含着大学问。细胞培养状态不好相信每个细胞培养者都遇到过。有时候细胞状态不好,转染 、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,但首要因素是选好合适的细胞培养基。很多研究者只对一两种培养基比较了解,下面让我们详细介绍一下各种培养基的不同之处。培养基基础培养基绝大多数是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最-广泛应用的基础培养基是MEM ,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。目前科研市场经典的培养基有很多种,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最-广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。◆ MEM是由基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。◆ 改良的基础培养基培养基也就是我们所说的DMEM培养基最初是为小鼠成纤维细胞培养专门设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。◆ a-MEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM 等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。很多新人经常困惑细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。如果这种细胞是购自细胞库,那您直接问供应商就行了,他们会给您一个最-适合的推荐。如您不知道细胞的来源,您也可以找到相关的文献,基本文献中使用的培养基都可作为参考。但如果你是着手建立一种全新细胞的培养体系,根本找不到任何参考,那你就得花点时间自己试验。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首-选MEM做贴壁细胞培养、RPMI 1640做悬浮细胞培养会是一个好的开始。最-好同时选购几种不同的培养基同时进行培养实验来选择其中最-适合的。有时候你会惊讶地发现你的最-佳培养条件与文献报道的不同,就算是同一种培养条件,细胞的生长状态也时好时坏,这是很正常的。因为试剂、水、不同批号的血清之间都存在着差异。要提高培养基的稳定性,可以从培养基和血清两方面入手。以前大部分实验室都是用干粉培养基,但干粉有很多弊端1. 配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,2.有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基,这种人为的误差会减少,因为毕竟是大批量工业化生产的,批间差会很小。血清说到细胞培养,血清固然是细胞培养中不可或缺的成分,但血清的批间差异大,更换血清时需要做大量的测试以取保替换的血清与原来的相似。而血清的供应也是必须要考虑的因素。由于气候或疯牛病等的影响,血清货源的问题对实验的影响可非同小可。另外,血清的价格也很昂贵,高品质的澳洲血清价格更高。因此,也有一些实验室开始换用无血清培养基。无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的,从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。细胞培养基应用选择选择培养基没有固定的标准,有几点建议可供您参考:(1) 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首-选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。(4) 用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最-佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。 

应用实例

2020.10.21

细胞培养室的灭菌与消毒了解一下!

细胞培养对无菌环境的要求较为严格。细胞培养间的杀菌主要涉及空气的杀菌,其常见的四种方法如下。1、甲醛熏蒸甲醛是一种高效能化学灭菌剂。不易燃、不爆炸、不腐蚀金属。它能与蛋白质中的氨基酸结合而使蛋白变性,使酶的活性消失。故有强大的杀菌作用。一般称作为“大消”,用来对细胞间进行彻底的消毒杀菌。但是甲醛是一种对人体有害的物质,并且细胞培养实验室一般空气流通都很差,甲醛的排出也很慢,至少要一周以上。如果要紧急使用的话,在甲醛灭菌完后,可以用等量的氨水中和空气中的甲醛。2、空气过滤(恒温恒湿装置)这是一种最安全,杀毒效果也最好的方法,只是费用较为昂贵。洁净度级别 尘粒最大允许数/立方米 微生物最大允许数/立方米 浮游菌/立方米 沉降菌/皿100级 3500 0 5 13、紫外线灯杀菌紫外线灭菌是用紫外线管照射进行的。波长在220-300nm的紫外线称为“杀生命区”,其中以260nm的杀菌力最强。紫外线作用于细胞dna,使dna链上相邻的嘧啶碱形成嘧啶二聚体(如胸腺嘧啶二聚体),抑制了dna复制。另外,空气在紫外线照射下可以产生臭氧,臭氧也有一定的杀菌作用。紫外线透过物质的能力很差,适用于空气及物体表面的灭菌,与被照物的距离以不超过1.2m为易,照射时间以紫外线灯管的功率大小、被照空间及面积大小,根据灭菌效果测定结果而定。由于上述各种情况的不确定性,导致紫外线杀菌效果不是很理想,一般需要过夜杀菌。此外紫外线对人体有伤害作用,不要在紫外线灯照射下进行操作。4、电子消毒灭菌器杀菌即臭氧灭菌。在高压电场作用下,电子管的内外电极发生强烈电子轰击,使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧在常温、常压下分子结构不稳定,很快自行分解成氧气(o2)和单个氧原子(o);后者具有很强的活性,能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应,从而靠氧原子的弥漫性扩散达到杀菌之目的,消毒时没有死角。消毒后空间的残留的多余氧原子只需30~40min则会自行重新结合成为普通氧原子(o2),不存在任何有毒残留物,故称无污染消毒剂,它不但对各种细菌(包括肝炎病毒,大肠杆菌,绿浓杆菌及杂菌等)有极强的杀灭能力,而且对杀死霉素也很有效。此外,细胞培养间的地板也应定期使用新洁尔灭进行消毒灭菌,并打扫干净;培养箱、桌面定期用75%的酒精进行擦拭消毒,防止污染。

应用实例

2020.10.21

做细胞培养你应该知道这些

现如今生命科学事业蓬勃发展,国内越来越多的实验室开始做细胞培养相关实验,如果你打算活着正在打算做下面的内容一定会对你有所帮助。1、选择正确的培养基在养细胞之前,就要了解,你所养细胞的来源以及种类和名称,查阅一定量的文献,确定所需培养液种类以及是否需要添加特殊成分,常用的细胞培养液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常见的细胞基本可以使用这几种培养基中的一种来培养,有的需要加入一定其他成分,这需要根据不同的细胞类型,查ATCC细胞库或者查文献,才能找到所需最佳培养液。选择正确的培养液是养好细胞的第一步。2、了解细胞的生长习性不同的细胞生长习性不同。如成纤维细胞是贴壁生长,有一定的密度依赖性,密度小可能会出现不增殖,状态差的情况,接种密度大时则需要隔天传代,频繁传代则影响细胞状态;再如RPMI-8226人多发性骨髓瘤细胞,是悬浮生长的,传代需离心弃去上清即可。总之,了解细胞生长习性,再加上正确的计数,才能掌握好传代的密度。3、选择优质的血清血清中含有细胞生长所必须的生长因子,作为哺乳动物细胞培养的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,选择优质的血清,是细胞养殖成功与否的关键!4、及时传代和更换培养液在细胞增殖到一定的密度后,要及时传代,根据细胞的生长速度和密度,及时更换培养液。更换过勤,浪费培养液,更换不够及时,则细胞状态转差,一般需隔天更换培养液,具体可根据所养细胞种类予以调整。5、绝对的无菌意识前面林林总总全部都注意好了,如果无菌意识差,细胞中混入了微生物,则千里之堤溃于蚁穴,细菌的生长速度和破坏力,将迅速占领培养皿,破坏细胞结构,有些初学者会在培养液中加入1%的双抗,但是,无菌意识不强,双抗亦无法拯救你的细胞!6、倾心的呵护,频繁的观察做到以上几点,就可以开始养你的细胞了,但是再次重申细胞娇弱,在养细胞的过程中,难免会出现一些意想不到的问题,要想成功养好细胞,时时惦记它 ,频繁地观察,初期一天观察2次都不足为过,出现任何预料外的情况,及时处理,才能保障收获一盘“漂亮”的细胞

企业动态

2020.10.21

RNA体外合成原来也可以这么方便

  随着生物科技的发展,细胞治疗和基因治疗业已成为重要的前沿疾病治疗技术,利用RNA体外合成技术制备的mRNA疫苗在2020年突发的COVID--19传染病上产生了巨大的影响。很多公司如美国Moderna、德国CureVac、BioNTech等均已经开展了其他疾病如肿瘤、传染病、慢性病等治疗性mRNA疫苗和药物开发。  体外合成RNA(IVT)主要是以DNA为模板通过体外转录得到,常用的是以线性化质粒DNA或PCR扩增产物为模板利用RNA聚合酶在体外转录合成。主要过程是利用含有T7启动子(TAATACGACTCACTATAGGG)或SP6启动子(ATTTAGGTGACACTATAG)序列的DNA为模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的条件下,以NTP为底物合成与模板DNA中一条链互补的mRNA,简单快速获得大量的mRNA分子,通过在5’端加上帽子结构和3’端加ployA尾加强mRNA的稳定性。  体外合成RNA你是否有以下困惑  (1)如何获得转录模板?  (2)为什么自己配置反应体系无论如何优化都无法获得足够高的产率?  (3)有没有一款包含全套反应试剂的Kit,让我不在为体系配置而烦恼?  (4)需要一款性价比高的T7 Kit,让研究经费不在是我科研路上的拦路虎?  (5)有没有一款试剂盒适用于多种类型RNA的合成?  技术介绍:传统的生物合成系统是指通过模式生物细菌、真菌、植物细胞或动物细胞等表达外源基因的一种分子生物学技术。随着科学技术的发展,无细胞表达体系,也称为体外蛋白合成系统,应运而生。体外蛋白合成系统是指以外源目的mRNA或DNA为模板,通过人工控制补加蛋白质合成所需的底物和转录、翻译相关蛋白因子等物质,能实现目的蛋白质的合成。体外蛋白合成系统表达蛋白质无需进行质粒构建、转化、细胞培养、细胞收集和破碎步骤,是一种相对快速、省时、便捷的蛋白质表达方式。商业上的体外合成系统有两种:一种以预先体外转录获得的mRNA作为模板翻译合成蛋白质,另一种是将体外转录与体外翻译同时进行,以DNA为模板合成mRNA然后合成蛋白质。这两种系统都比较复杂且实验要求较高,需要使用者预先-进行体外转录实验以获得足够多的mRNA模板,或者需要预先提供大量的DNA或者高浓度的质粒作为模板(模板的质量甚至大于合成蛋白质的质量)。这些弊端增加了使用者的操作时间、制造成本、及实验复杂性,同时也大大限制了生物合成的效率和产量。因此,开发一种更简单、方便、高效率、高产量、低成本的体外生物合成系统已成为基础生物研究领域的迫切需要。  技术实现思路:  本专-利技术提供了一种同时在体外进行DNA,RNA,蛋白质生物合成的理论模型和设计。本专-利技术提供了一种简单、方便、高效率、高产量、低成本的体外合成系统。  技术保护点:  1.一种将DNA复制、转录、翻译偶联的无细胞合成体系,其特征在于,所述无细胞的合成体系包括:(a) DNA聚合酶;(b) 解旋酶;(c) DNA结合蛋白;(d) 用于合成DNA的底物;(e) RNA聚合酶;(f) 用于合成RNA的底物;(g) 用于合成蛋白的底物;(h) 酵母细胞提取物。

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2020.10.20

无外泌体血清制备操作步骤!

  以外泌体为代表的细胞外囊泡是近几年研究的热点,目前的外泌体研究主要通过研究体外培养细胞来源的外泌体,分析其在体内外的功能作用。一般的血清FBS中含有供体细胞自然分泌的大量Exosomes,而用于Exosome研究的细胞必须提前更换无外泌体的血清进行培养,以减少对后续实验结果的污染。  目前市面上存在着商业化的无外泌体血清,然而由于其价格较高等因素,很多研究者选择自己制备无外泌体血清,而常用的主要是基于超速离心的无外泌体血清分离方法  无外泌体血清制备步骤:  1. 根据需要处理的血清体积选择合适的转子与超离管。  2. 在超净工作台,将普通血清置于超离管中,配平后,进行热封口。  3. 将封口后的超离管放于离心机转子中,并加入相应适配器然后拧紧转头盖。  4. 设置离心程序:4℃,120,000 ×g,离心18小时(也有研究者选择100,000 ×g离心18小时【2】)。  5. 离心结束后,回收上清液,为避免污染,在超净工作台操作。  6. 收集得到无外泌体血清,并储存于-20℃中备用。  无外泌体血清产品特点:  1、专为外泌体研究而设计;  2、无菌采集的健康胎牛血清过滤法去除外泌体;  3、胎牛血清内源外泌体去除率达97%;  4、过滤法可有效保护FBS中重要的细胞营养因子;  5、培养的细胞生长速率与形态与普通FBS无差异。  无外泌体血清是一种可由多种细胞分泌的直径为30-150nm的膜性小囊泡。经研究后发现,无外泌体血清其内含有独特的蛋白质与核酸分子,无外泌体血清所含成份与其细胞来源密切相关,这也决定了无外泌体血清的功能特异性,如抗原提呈、信号传导或诱导抗肿瘤免疫反应、细胞迁移、细胞分化、细胞间通信、肿瘤转移等。目前,无外泌体血清研究已经成为临床诊断与基础医生的新热点。  无外泌体血清关注市场的动向,才可以更好的服务市场,在不断的挑战中,追寻梦想,实现自己的价值。无外泌体血清发挥了自己的实力,挑战自己,追求的道路上,无外泌体血清更多的是坚持不懈的努力,奋发向上的积极。无外泌体血清简便可靠。专业化知识强,让无外泌体血清的努力更好的得到了展现,也是在新的时代里,无外泌体血清的付出是值得称赞的。

操作维护

2020.10.20

如何精确测定AAV病毒载体空壳率?

  重组腺相关病毒(AAV)作为病毒载体,具有安全性好、特异性强、递送效率高等特点,为新的、挽救生命的基因治疗方法带来巨大的希望。但是,虽然电镜等技术可以表征AAV的均一性和聚集状态,但它们没有足够的分辨率来准确定量病毒颗粒的均一性和有效载量。而解决这一问题的方案是:使用分析型超速离心技术(AUC)表征AAV病毒颗粒特性。  正如基因治疗研究人员所知道的那样,在早期产品开发中有非常多的风险,快速检测产品质量是至关重要的。但到目前为止,使用之前的技术来检测临床级的重组AAV载体仍然是不现实的。  · qPCR/ELISA、光密度法均为间接检测方法,结果只能用于样品间的对比,而无法准确定量  · 电子显微镜可以在视野中看到空壳颗粒与实心颗粒,但无法确定包含所DNA是否完整,同时也无法定量  · 离子交换色谱法面临分辨率不够、不同血清型病毒颗粒不适用于同一种分析方法等问题  因此,主要的障碍是缺乏高分辨率、可用于定量的技术来监测病毒颗粒产物特性,比如:  · 均一性  · 纯度  · 批次一致性  · 病毒有效载量  使用分析型超速离心技术(AUC)表征AAV病毒颗粒的特性,可以帮助精准测定AAV病毒载体空壳率!  分析型超速离心技术(Analytical Ultracentrifugation,AUC)是表征生物大分子特性、研究生物分子理化性质的主要技术手段之一,用于分析样品异质性、聚集体的形成以及分子间相互作用等。  依据溶液中空壳、实心、中间产物等不同状态病毒载体的沉降系数的不同,AUC分析得到的c(s)分布可以表征AAV病毒载体特性。并且在检测过程中使样品不接触任何基质、不使用任何标准品与标记物,直接检测溶液中AAV病毒颗粒特性。AUC可以帮助研究人员:  ü 定量检测,精确测定病毒载体有效载量或空壳率。  ü 可以表征生产过程中的产物,帮助确定去除空颗粒的方法。  ü 可以监测AAV载体结构的异质性、聚集状态。  ü 可以区分、量化样品中的多个组分,包括空病毒颗粒、包含全基因组病毒颗粒、包含部分基因组病毒载体、载体碎片、基因组碎片等。  ü 根据不同血清型的AAV载体,对转入基因的大小和单/双链状态进行定量。

应用实例

2020.10.20

试剂耗材怎么分类?耗材管理太难怎么办?

  实验室耗材非常多,但总体上是分为三类,1是耐用型耗材,比如:锥形瓶、量筒类,一般使用年限较长,保管良好的话能使用较长时间;2是损耗型耗材,比如:移液枪枪头、脱脂棉、实验用橡胶手套等,在实验室的使用率非常高,消耗速度也很快;3是试剂药品,如酶、试剂、药品之类。那么对于耗材的管理具体该怎么操作呢?小编就给大家简单说下。  耐用型耗材管理  其实耐用型耗材和耗型耗材都比较便于管理。对于耐用型耗材一般应在清洗干净并烘干后置于实验架上。为方便实验使用,可分类放置,例如,量筒统一放在同一架子上,烧杯也统一放在另一架子上,并且,每一类器材按照容量大小不同依次排序。对于那些不容易立着的耗材,如,试管、离心管之类可另找一干净并干燥的抽屉放置。这类器材中大部分是玻璃材质,放置时不要太靠边,以防意外摔碎。  损耗型耗材管理  在我们实验室类似脱脂棉、橡胶手套、口-罩这一类的是每个实验台上都会放一套,以便随时取用,剩下的会装箱放在储物柜中,实验台上的用完后可自行去取。移液枪的枪头和培养皿一类的会分成两种,灭过菌的器材会按不同规格放置在细胞操作间等的安全柜旁,未灭菌的则同样放置在另外的一个储物柜中。当灭过菌的枪头等快用完时,可及时去取新的枪头灭菌备用。一般来说私用的耗材相对好管理,比较难管理的是共用耗材。  相对简单的方法是将共用耗材编号,由专人管理,定时检查,以便出现问题时可及时得到处理。最后就是不管哪种类型的耗材,最-好都能列一份清单,这样就能更清楚的知道本实验室到底有些什么东西,哪些东西快用完需要补充,或者哪些东西有损坏需要置办新的,不至于到要用的时候才发现没有从而影响实验进度,做到心中有数就可以了。  试剂药品管理  一些公用试剂药品,在实验室里怎么方便就怎么放。另外实验室管理员也会收起来一部分库存,没有了可以找实验室管理员要,根据情况进行登记(比如管制药、极贵重药、抗体和血清等)就好。一般快用完前就先跟实验室管理员进行沟通,让管理员预订,试剂管理更多是看大家的自觉性,养成用完放回原处的好习惯。另外要做好药品使用登记,比如详细资料、现有库存,摆放位置,谁何时取多少,签名等。  耗材管理小编就先绍到这里,相信上面的介绍大家都看到了,光靠人工记录不但繁琐而且也难免会有疏漏,这时候借助试剂耗材管理软件就能很好的弥补这点。

应用实例

2020.10.19

化学试剂这么危险要怎么注意使用呢?

  大家都知道化学试剂的特殊性和危险性,对于它们的管理肯定要慎之又慎。虽然它们比较特殊和危险,但只要掌握好方法的技巧,对它们进行好管理也不是件很困难的事。那具体该怎么管理,以及怎么使用才更安全呢?下面我给大家来简单介绍下各类化学试剂,让大家对它们有个简单的了解。  1、易-燃易-爆化学试剂  一般闪火点在25℃以下的化学试剂被列为易燃化学试剂,它们大都是极易挥发的液体,遇明火就会燃烧。闪火点越低,越容易燃烧。使用易燃化学试剂的时候一定不能使用明火,加热也不能直接用加热器,一般不用水浴加热。而使用易燃化学试剂的试验人员,要穿好必要的防护用具,并且最好戴上防护眼镜。  2、有-毒化学试剂  一般的化学试剂对人体都有毒害,在使用是一定要避免大量吸入。在使用完公演试剂后,一定要及时洗手,洗脸洗澡,更换工作服。对于一些吸入或食入少量即能中毒致死的化学试剂,例如氰化钾、氰化钠及其氰化物;三氧化二砷及某些砷化物、二氯化汞及某些汞盐、硫酸、二甲酯等等。在使用前一定要了解这些试剂中毒时的急救处理方法,这些剧毒化学试剂一定要有专人保管,并严格控制使用量。  3、腐蚀性化学试剂  不管是任何化学试剂碰到皮肤、眼、呼吸器官都要及时清理,特别是对皮肤、眼睛、呼吸器官有极强腐蚀性的化学试剂,如各种酸和碱、三氯化磷、溴、苯酚等。同理,在使用前一定要了解这些腐蚀性化学试剂的急救处理方法,如酸溅到皮肤上要用碱液清洗等。  4、强氧化性化学试剂  强氧化性化学试剂都是过氧化后是含有强氧化能力的含氧酸及其盐。如过氧化氢、硝酸钾、高氯酸及其盐、高锰酸钾及其盐过氧化苯甲酸、五氧化二磷等等。在适当的条件下可放出氧发生爆-炸,并且与有机物、铝、锌粉硫等易燃物形成爆炸性混合物,在使用时环境温度不高于30℃,通风要良好,并不要与有机物或还原性物质共同使用。  5、遇水易燃试剂  遇水易燃试剂有钾、钠、锂、钙、电石等等,遇水即可发生激烈反应,并放出大量热,也可燃烧,在使用时要避免与水直接接触,也不要与人体接触,以免灼伤皮肤。  6、放射性化学试剂  使用放射性化学试剂时,一定要按放射性物质使用方法,采取保护措施。其它类的危险化学试剂,无论常用不常用,在使用前一定要了解它的相关注意事项,熟悉后方可使用。  在化学实验过程中,如果操作不当或疏忽大意很容易导致事故的发生。所以,在遇到事故发生时要有正确的态度、冷静的头脑,做到1不惊慌失措,2要及时正确处理,3按要求规范操作,这样才能尽量避免事故发生。例如浓硫酸稀释时,浓硫酸应沿着容器的内壁慢慢注入水中,边加边搅拌使热量均匀扩散。在做有毒气体的实验中,应尽量在通风橱中进行。不慎将苯酚沾到手上时,应立即用酒精擦洗,再用水冲洗等。  所以,对于化学试剂的管理相关管理人员必须具备专业的化学试剂管理知识,而且还需要一套专业的试剂耗材管理系统。因为单纯依靠传统人工管理不但费时费力,还会吃力不讨好。

企业动态

2020.10.19

PCR实验室污染方式及处理

  有实验室的地方,就不可避免的会出现实验室污染。实验室的污染,不仅会影响实验与科研的质量和效果,还对实验室工作人员的身体健康有损害,今天小编就和您一起了解下PCR实验室的污染原因及解决方法。  PCR实验室污染  标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。  PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。  PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大,远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。  还有一种容易忽视,最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染;在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染。  实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见,因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力,其污染可能性也很大。  ☆ 污染监测  一个好的实验室,要时刻注意污染的监测,考虑有无污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。  对照试验  1、阳性对照:在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照,它是PCR 反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。  2、阴性对照:每次PCR实验务必做阴性对照。它包括①标本对照:被检的标本是血清就用鉴定后的正常血清作对照;被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照。②试剂对照:在PCR试剂中不加模板DNA或RNA,进行PCR扩增,以监测试剂是否污染。  3、重复性试验  4、选择不同区域的引物进行PCR扩增  ☆ 防止污染的方法  进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。  划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:  1. 试剂准备区。  2.标本制备区。  3. PCR扩增区及分析区。  切记:任何一间的产物及器材不要拿到其他两个工作区。  分装试剂:PCR扩增所需要的试剂均应在生物安全柜、装有紫外灯的超净工作台或负压工作台配制和分装。所有的加样器和吸头需固定放于其中,不能用来吸取扩增后的DNA和其他来源的DNA:  1.PCR用水应为高压的双蒸水;  2.引物和dNTP用高压的双蒸水在无PCR扩增产物区配制;  3.引物和dNTP应分装储存,分装时应标明时间,以备发生污染时查找原因。  PCR实验操作注意事项  尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因,样品间的交叉污染也是原因之一。因此,不仅要在进行扩增反应是谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:  1. 戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套;  2. 使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;  3. 避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;  4. 操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度;  5. 最后加入反应模板,加入后盖紧反应管;  6. 操作时设立阴阳性对照和空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;  7. 尽可能用可替换或可高压处理的加样器,由于加样器最容易受产物气溶胶或标本DNA的污染,最好使用可替换或高压处理的加样器。如没有这种特殊的加样器,至少PCR操作过程中加样器应该专用,不能交叉使用,尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区;  8. 重复实验,验证结果,慎下结论。

操作维护

2020.10.19

量筒、容量瓶拿起就用?你有麻烦了!

实验过程中经常会移取液体样品和试剂,这就免不了需要使用到液体体积度量仪器,例如量筒、量杯、容量瓶、移液管和滴定管等具有刻度的液体量取设器皿,然而这些器皿可不是随便使用的,都有的相应的使用方法和注意事项!1. 量杯和量筒量杯和量筒是一种精度要求不太高的量取液体体积的度量仪器。一般容量有5ml、10ml、25ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml等,可根据需要选用,切勿用大容量的量杯和量筒量取小体积,这样会使精度下降。量取液体时,应让量筒放平稳,且停留15秒以上待液面平静后,使视线与量筒(杯)内液体的弯月面最低处保持水平,偏高或偏低都会因读数不准而造成较大的误差(见图1)。一般来讲,量筒比量杯精度高一些。2. 移液管和吸量管移液管和吸量管都是一种准确量取一定体积液体精密度量仪器。移液管是定容量的大肚管,只有一条刻度线,无分度刻度线,所以到了刻度线即为定温下的规定体积;一般容量有1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、25ml、50ml、100ml等规格。吸量管是一种直线型的带分度刻度的移液管,管上标量为最大容量。一般有0.1ml、0.2ml、0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml等规格。例如5ml吸量管,最大容量为5.00ml,其分刻度为5.00、4.50、4.00……0;因此,它可移取0~5ml内任意体积的液体,精度比量筒高。移液管和吸量管的使用方法:(1) 润洗移液管首先用洗耳球吸取1/4移液管容量的硫酸—重铬酸钾洗液,然后用手按住,将移液管处于水平,两手托住转动让洗液润湿全部管壁,从上口倒出洗液。再用自来水洗去残存洗液,用蒸馏水洗数次后,最后用被移取的液体洗三次,每次用量约为移液管的1/4容积。(2) 移液操作:将移液管尖端插入被移取的溶液内,右(或左)手的拇指及中指拿住管颈标线以上的地方,左(或右)手拿洗耳球,洗耳球的尖端插入管颈口,并使其密封,慢慢地让洗耳球自然恢复原状,直至液体上升到管颈标线以上,迅速移去洗耳球,立即以右手(或左手)食指按住管颈口,左(或右)手拿盛放被移取溶液的器皿(烧杯、容量瓶之类),使移液管垂直提高到管颈标线与视线成水平,左手拿的器皿口接在移液管尖嘴下,右(或左)手食指放松或用拇指及中指轻轻转动移液管,使液面缓慢又平稳地下降,直至掖面的弯月面与标线相切,立即按紧食指,不让液体流下;若尖端口有半滴稳住,应在原器皿内壁靠掉。(3) 如果实验要求更高的精度,还需要对移液管进行校正。3. 容量瓶容量瓶是一种为配制准确浓度溶液的液体度量仪器,它在一定温度时刻度线内容积为规定体积:一般容量为10ml、25ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml、1000ml、2000ml等规格。容量瓶分磨口塞和塑料塞两种,使用方法如下:(1) 检查瓶塞是否漏水:在瓶中加部分水,塞紧塞子,左手拿瓶,右手顶住塞子,将瓶倒立,观察瓶塞是否有漏水或渗水现象?若不漏也不渗,则将瓶塞旋转180°再塞紧,重复上述操作,如不漏也不渗,则此瓶可用。(2)洗涤:用硫酸——重铬酸钾洗液、自来水、蒸馏水将容量瓶及塞子洗净。(3) 配溶液操作:① 用固体物质配制溶液:将称好的固体放在烧杯中,倒入部分水溶解,溶完后,转移到容量瓶中,再用少量蒸馏水洗涤烧杯3~5次,洗涤液合并到容量瓶中,加蒸馏水至3/4左右,先摇匀一下,再加水至刻度,塞紧塞子,用一手的食指顶住瓶塞,另一手握住瓶底(小容量瓶只要一只手即可),将瓶横放摇动,倒转摇动数次,使瓶内溶液混合均匀。② 液体溶液稀释成另一准确浓度:用移液管移取一定体积溶液至容量瓶中,再加水,以下同①操作。4 滴定管滴定管分酸式和碱式两种,除了碱溶液放在碱式滴定管中进行外,其它溶液都在酸式滴定管中进行。酸式滴定管下端为一玻璃活塞,它的使用方法如下:(1) 涂凡士林操作:将活塞取下,用滤纸揩干,然后揩干活塞槽;在活塞的大头涂上一层很薄的凡士林,在活塞槽的小头涂上一层很薄的凡士林,将活塞紧塞在活塞槽中,转动活塞,使活塞与塞槽接触处呈透明状态且活塞转动灵活为止。若接触处有不透明的拉丝,需要重新进行涂油。套上橡皮圈,保护活塞不滑出塞槽。(2)检查是否漏水:往滴定管中加水至零刻度附近,垂直架在滴定台上,观察滴定管口是否滴水活塞与塞槽间隙处是否漏水?若不漏,则将活塞旋转180°后再行检查,若不漏水即可进行下步操作,若漏水需重新涂凡士林后再检查。(3)洗涤方法:倒入硫酸—重铬酸钾洗液约1/4容积,慢慢倾斜旋转滴定管,使管壁全部沾上洗液,然后打开活塞让洗液充满下端,再关闭活塞,将洗液从管口倒回贮存瓶,打开活塞,让洗液全部倒回贮存瓶中。用自来水洗去残存洗液,用蒸馏水洗3~4次,洗去ca2+,mg2+,cl- 等离子,最后用滴定液洗3次,即可装滴定液。(4)装溶液及赶气泡:将溶液加到零刻度以上,将活塞开到最大,放出一些溶液,依靠重力使溶液充满活塞下端,赶去气泡,关上活塞。检查下端是否还是有气泡?若还有气泡,可重新打开活塞,将滴定管由上向下加一下加速度,即可赶去气泡,关上活塞。(5)读数操作:滴定管是一种精密的液体度量仪器,因此,读数是一个非常重要的操作。滴定管应垂直架于滴定台上,读数时,视线应与液体弯月面下部实线的最低点保持在同一水平面上,偏高或偏低都会带来误差。若滴定台太高,可将滴定管取下,用左(或右)手的拇指和食指轻轻握住滴定管上部,让滴定管依靠重力自然成垂直状态,移至弯月面下部实线最低点与视线在同一水平面上读数。50ml、25ml滴定管可读至小数点后二位。为了便于读数,可制作“读数卡”。在一张白卡中贴一张3×1.5cm的黑纸(或用黑墨水涂)即成读数卡。读数时,手持读数卡放在滴定管背后,使黑色部分在弯月面下1mm左右,则弯月面反射成黑色,读此弯月面的最低点。像高锰酸钾这样的深色溶液,则读取液面的最高点。目前还有一种蓝线滴定管,既滴定管内有一整条白色不透明玻璃,中间有一条蓝线,则液体有二个弯月面相交于滴定管蓝线的某一点。读数时,视线应与此点处于同一水平面上。如为有色溶液,应使视线与液面两侧的最高点相切。(6) 滴定操作:滴定时,最好每次都从0.00ml开始,或接近于0.00ml的某一刻度开始,这样可减少滴定管刻度不均匀带来的误差。滴定管最好在锥形瓶中进行,必要时可在烧杯内进行。滴定管垂直地夹在滴定管夹上,下端伸入到锥形瓶口约1cm左右,左手控制滴定管活塞,大拇指在前,食指和中指在后,手指略微弯曲,手心空握,轻轻向内扣住启开活塞,以免活塞松动,甚至于顶出活塞。右手握持锥形瓶,边滴边摇动,且向一方向作圆周旋转,不能前后或上下振动,这样易溅出溶液。开始滴定速度可快些,一般控制在每分钟10ml左右,每秒约3~4滴,即一滴接着一滴,或成滴不成线。临近滴定终点时,应一滴或半滴地加入,即加入一滴或半滴后用洗瓶吹入少量水洗锥形瓶壁,摇匀,再加入一滴或半滴,摇匀,直至指示剂变色而不再变化为止,即可认为终点到达。碱式滴定管下端接一橡皮管,内装一玻璃圆球,连一尖嘴小玻璃管,代替玻璃活塞。使用方法除以下几点不同外,其它均同酸式滴定管。(1) 洗涤方法:由于橡皮会被氧化剂腐蚀,所以用洗液洗时,将滴定管上口倒置于盛有洗液的烧杯中,将尖嘴口接在抽水泵上。打开抽水泵,轻捏玻璃球,待洗液徐徐上升到接近橡皮管处放开玻璃球,待洗液浸泡一段时间后,脱离抽水泵,拔去橡皮管,让洗液流尽,然后用自来水冲洗,再用蒸馏水洗数次,装上橡皮管和洗净的玻璃球及尖嘴玻璃管,再用滴定液洗3次。(2) 装液和赶气泡:装入滴定液至零刻度以上,将橡皮管向上弯曲,轻轻捏玻璃球,使液体慢慢上升到连通器而赶走气泡,充满橡皮管和尖嘴玻璃管。(3) 捏滴定管的姿势:左手拇指在前,食指在后,捏橡皮管中部玻璃球所在部位稍上一些的地方,向右捏挤橡皮管,使橡皮管与玻璃球之间形成一条缝隙,溶液即可流出。但注意不能捏挤玻璃球下放的玻璃管,否则空气进入,易形成气泡。

应用实例

2020.10.16

实验结果异常、不准确?问题可能是......

  随着经济快速发展,为了满足各类需求,目前像疾控中心、食品检测、科研单位、制药企业等等行业或领域都逐渐拥有了属于自己的实验室。与此同时,每个实验室几乎都遇到过同一个问题,就是在某个时候实验结果警-服总是出现异常、不准确,这究竟是什么原因呢?  原因归结起来主要有以下几点:  (1)实验室规章制度亟待健全完善  一个成熟的实验室必然有一套严谨并可执行规范的规章制度。这一点至为重要。倘若出现实验人员在实验过程违规操作、仪器设备保管不善、实验记录不严格、实验环境受破坏等等状况,当然也就会直接或间接影响到实验结果精-确性。  (2)实验所需的仪器样品和试剂品质不合格  很多实验室虽然有长期合作供应商对接,但接收这些用品时并没有及时做好验收工作。有一些实验器具,特别是试管、量杯、三角瓶、容量瓶等计量器具多次试验之后都没有发现其不合格之处。另外像是一些药品、试剂、洗剂次品现象比较隐蔽,不容易察觉发现。这些问题积累的后果都会反馈在最-终实验数据上。  (3)实验室仪器器皿清洗出现问题  无残留的清洗是精-准实验分析的前提条件。然而,有相当多实验室目前还在以人工为主进行清洗工作。这样不但效率低而且还导致了实验结果标准、统计都成为了棘手的难点。据一项权-威调查数据显示,超过50%的实验结果精度问题与实验中所用到的器皿洁净度是直接挂钩。  因此,有关方面可根据以上这些方面的因素进行彻底改进,将有效提升包含实验结果精度在内的整个实验室的综合水平。  首先,要完善好实验室各方面的制度,做好实验团队人员相关意识的树立和培养,落实责任监督。填写实验记录、出具检验结果,出现争议时以此为根据进行奖惩和检讨。  其次,对常用药品、玻璃器皿等存放好、标签好、检查好。若发现其质量存在可疑之处要及时上报有关部门和领导进行处理,从而保证实验不受影响。  第三、启用全自动玻璃器皿清洗机替代人工清洗作业。机器化、批量化、智能化清洗实验室器皿已是大势所趋。目前,我国有越来越多的实验室已经启用了实验室清洗消毒系统对其进行有关清洗烘干工作。

企业动态

2020.10.16

细菌、组织和细胞培养失败后,是什么原因呢?

  在食品加工工业中,实验室有着举足轻重的作用。其重要性在于控制和确保消费者的食品安全达到可能的最高级别。  分析和微生物检验是当前实验室的主要工作。每天,专业的技术人员检查生产过程的安全,以保证加工食品的质量。  实验室玻璃器皿的正确清洗有多么重要?  食品的残余物会产生顽固的沉淀,有时非常难去除。  实验室玻璃器皿的清洗必须要达到去除残余物的目的并可重复使用。  清洗实验室器皿既可以手工清洗又可以在清洗机中自动清洗。  这两种情况,正确的清洗程序和最适合的清洗剂是当今满足高质量要求的两个决定因素。  当清洗失败时  清洗实验室器皿最重要的方面是最终玻璃器皿完全没有任何残余物。  这意味着:  第一,没有食品残余物、细菌和细胞培养液,  第二,没有清洗剂和中和剂的残余物。  不充分的清洗能够对质量、安全和您实验室的竞争性造成灾难性的影响。  其它问题是  ■ 清洗剂的残余物导致不正确的分析结果  ■ 高度敏感的分析方法要求彻底清洁实验室玻璃器皿  ■ 来自清洗过程的表面活化剂的残余物影响细菌和细胞培养的生长  ■ 交叉污染  ■ 残余物产生不好的气味  细菌、组织和细胞培养的成功和可重复性  实验室玻璃器皿残余物的清洗是在细菌学和细胞生物学上成功和可重复的一个先决条件。  实验室玻璃器皿上的有毒残余物会导致细菌、组织和细胞培养出现杂质。因此,残余物的清洗和最适的冲洗对于可靠的结果是至关重要的。  使用专业的清洗设备可以保证细菌,组织和细胞培养物彻底清洗和重复使用,确保了合适的冲洗、中和步骤,两次或更多次用去离子水冲洗保证残余物的清除。其清洗剂的用量是根据污染的类型和程度,所使用的设备和清洗的过程,还有水的硬度来确定的。

参数原理

2020.10.16

神经酰胺——皮肤脂质研究

人体皮肤的厚度根据身体位置而异,由三个不同的基本层组成:皮下组织,真皮和表皮。富含脂肪的皮下组织附着在下面的肌肉组织上,为身体提供填充和绝缘作用,而真皮则是由在胶原蛋白和弹性蛋白纤维网状结构的葡萄糖胺聚糖和蛋白聚糖的原纤维外基质为主的致密结缔组织组成,从而赋予有强度和弹性皮肤。真皮还含有感觉器官,神经末梢,血管,汗腺,皮脂腺和毛囊根。与真皮相反,表皮缺乏血管血液供应,并由角质形成细胞控制,角质形成细胞在多个分化阶段从表皮下层(基底层)连续迁移到表皮zui上层,即角质层(SC),并在那里zui终转化变成扁平的,富含角蛋白的无活力(死)细胞,称为角质形成细胞。角质层中的角质细胞通过称为角质小体的蛋白质相互连接,并排列在单个细胞层(人皮肤中的10–25层)中,其中的外层在脱皮的过程中不断从皮肤表面去除,以完成连续性正在进行的皮肤再生过程。皮肤的屏障特性是由独特的角质层分子结构维持的,其中角质细胞层嵌入在结构良好的细胞间脂质基质中,有时被称为“砖瓦-砂浆”结构。所述脂质基质的组成是独特的角质层,并包含约50%的神经酰胺,25%胆固醇和10%-20%的游离脂肪酸。脂质在堆叠双层结构组织起来。皮肤脂质具有多种作用:在脂肪酸氧化的情况下作为能量的来源,作为水的屏障(例如神经酰胺),作为生长调节剂(例如花生四烯酸和前列腺素)以及作为其中的结构分子(例如细胞膜中)。年轻状态的我们的皮肤通常是生物健康的,并且运作良好。随着年龄的增长,皮肤变得更加脆弱,随着脂质产量的下降,皮肤的天然保护屏障也受到损害。这不仅影响皮肤屏障,而且影响皮肤的自然修复能力,从而导致皮肤更加干燥和敏感。皮肤脂质减少会导致皮肤粗糙,不舒适的紧绷感,暗沉的肤色和面部丰满度的丧失。健康的脂质层有助于皮肤自我修复,包括改善皮肤纹理和肤色,增加水合作用并减少细纹和皱纹的形成。没有这个重要的脂质层,我们的皮肤就有加速衰老的风险。当脂质层受损时,皮肤变得敏感,干燥,发红和发炎等,在某些情况下还会感到疼痛。皮肤对活性成分,刺激性和过敏原的耐受性大大降低,这就是为什么有些爱美的宝宝们说自己的皮肤变得敏感了。相对于其它组织,表皮的zui外层细胞角质层(SC)含有许多非常复杂的神经酰胺,它们在调节皮肤屏障的保水功能中起着重要的生理化学作用。这些富含脂质的膜包含约50%的神经酰胺,包括12个可萃取的神经酰胺亚基,如鞘氨醇,6-羟基鞘氨醇,二氢鞘氨醇和动物鞘氨醇碱。酯化ω-羟基神经酰胺,皮肤特异性神经酰胺,是由葡萄糖基神经酰胺和鞘磷脂在表皮细胞的特殊层状体中形成的,并被分泌到SC中。亚油酸酰基酯化神经酰胺的缺乏与皮肤病如鱼鳞病,牛皮癣和特应性皮炎密切相关。由于人类SC的复杂性,分析可能具有很高的挑战性。弹枪脂质组学(Shotgun lipidomics)是一种新型的液相色谱-质谱技术,可在一次实验中提供大量分析物的数据。这种方法可以对困难样品进行快速,高通量的分析。通过利用特定的酯化ω-羟基神经酰胺内标,可以识别和定量皮肤脂质的种类。鞘氨醇(Sphingosines):N-(R)-α-羟基四癸酰基-D-赤型-鞘氨醇,N-(30-Linoleoyloxy-triacontanoyl)-鞘氨醇N-四十四烷酰基-D-赤型鞘氨醇动物鞘氨醇(Phytosphingosines):N-(30-亚油酰氧基-三烟酰胺基)-植物鞘氨醇二氢鞘氨醇(Dihydrosphingosines):N-ω-CD3-十八碳酰基-D-赤型-二氢鞘氨醇,以上高纯度皮肤神经酰胺可助力皮肤脂质研究。仅用于科研,不可用于临床与诊断。

新品

2020.10.15

蛋白纯化与抗体纯化的应用

对于分析蛋白质个体和蛋白质复合物,鉴定蛋白质与蛋白质、核酸之间的相互作用,蛋白质的纯化是这些研究的基石。由于纯化天然蛋白是一件J具挑战性的工作,科学家开发出来利用标签融合蛋白来捕获纯化和检测目的蛋白的实验体系。纯化蛋白最有效的就是亲和层析,它是通过目的蛋白与相匹配的固定化配体的进行特异性结合,实现纯化目的。zui显著的特点就是,良好表征的标签与其对应的固相偶联的配体的结合,能够对标记蛋白单步操作实现亲和纯化。融合标签的抗体也被广泛用于下游检测和实验,从而无需针对每种特定重组蛋白去开发相应的探针。抗体纯化主要涉及从血清(多克隆抗体)、腹水和杂交瘤细胞系培养上清液(单克隆抗体)中选择性富集或特异性分离抗体。Protein A,Protein G和Protein L是三种细菌蛋白,因其与抗体的高效结合而被大家所熟知。这些蛋白经过基因工程编辑重组表达,通常用于从各种不同物种中进行关键抗体类型的亲和纯化。蛋白纯化分以下三类:抗体纯化填料/预装柱/试剂盒抗体纯化产品包括Protein A, Protein G, Protein A/G, Protein L。如PurKine™ 蛋白A树脂,#BMR20500PurKine™ 蛋白L树脂(4%交联),#BMR20804PurKine™ 抗体纯化试剂盒(蛋白A),#KTP20500蛋白纯化填料/预装柱/试剂盒蛋白质纯化产品包含His, GST, MBP, Flag, Biotin, Strep II-Tag标签纯化。其它纯化填料/预装柱/试剂盒包含肝素( Heparin)填料、苯甲脒( Benzamidine)填料及内毒素清除填料。

应用实例

2020.10.15

标准物质采购要注意哪些?

  目前很多行业都需要购买各类符合国家标准的国产或者进口标准物质,一般来说,我们是通过正规的标准物质采购平台以及标准物质中心进行购买,采购需要按照相应的流程来进行,那么我们在采购标准物质的时候,需要注意哪些方面的问题呢?今天我们就为大家介绍一下。  1、标准物质作为一种经由国家认可进行生产的对照产品,对于自身的质量和品质要求很高,在生产过程中具有严格的精确度要求,因此我们在购买的时候,应当选择经过国家认可的,具备有关专业生产资格的,正规、大型标准物质中心,充分确保我们所购买到的标准物质可靠放心。  2、由于涉及到的标准物质种类和数量众多,具有很强的专业性,为了能够保证我们在购买的时候准确无误,您可以通过标准物质中心网站进行产品的咨询,也可以通过平台搜索功能,查找到所需的具体标准物质种类,经过反复核对确认无误之后,再进行购买。  3、目前大型的标准物质中心提供的样品十分全面,各种标准品和对照品等种类可多达数万种之多,因此您在采购的时候应当注意了解全面的产品基础信息,并且进行筛选和购买,如果您在购买的时候有任何疑问,都可以通过平台的专业客服中心电话与我们进行咨询联系。  今天我们为大家介绍了标准物质采购方面需要注意的一些问题,您可以参考以上流程步骤以及注意事项进行购买。国家目前对于标准物质的管控和认证十分严格,为了保证您所购买到的样品品质,注意所选择的应当是经过国家认可和批准的标准物质中心,方可放心购买。

经销代理

2020.10.15

三类化学试剂存放,每一个实验室人都应该知道!

  因为化学试剂的特殊性,所以对于它们的存放管理有很多需要注意的地方。今天我简单给大家讲解下,化学试剂的存放。化学试剂存放主要分3块,1是有机物化学试剂;还有2是无机物化学试剂;3是危险化学试剂的存放;下面来分开讲下。  一、有机物化学试剂存放  有机物化学试剂,按官能团分类: 如烃类、烃的衍生物、碳水化合物、含氮化合物、有机离分子化合物等。有机物化学试剂应按纯度级别依次排列,配制的溶液应与固体试剂分开存放。  二、无机物化学试剂存放  无机物化学试剂,应按盐类、单质、氧化物、碱类、酸类等类别分开存放。盐类一般按金属离子所在周期表中的位置,也就是从左向右,先下盐后酸式盐的方法分类。 如钠盐—硫化钠、碳酸钠、硅酸钠、亚硝酸钠、硫酸钠、硫代硫酸钠、钙盐等。单质再分成金属和非金属类,或以单质元素在元素周期表中的列分类。酸类中的不含氧酸可按酸根元素在周期表中位置由左向右,从上到下来分类。如氢卤酸、氢氟酸、盐酸、氢溴酸、氢碘酸等。含氧酸可按成酸元素的列分类: 硼酸、硝酸、硫酸、磷酸等。碱类主要按碱可中金属元素在周期表中的列分类: 如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化镁、氢氧化钙等。  三、危险化学试剂存放  对于化学试剂管理本来就应该需要特别注意,而化学试剂的重中之重就是危险性化学试剂了。因为危险化学试剂具有较高化学活性的物质,如易燃易爆性、腐蚀性、毒害性、氧化性、放射性等有害于人和环境的一系列的“烈性”化学物质。其活性之高,甚至可以自行分解并威胁生命财产安全,必须加以认真对待。根据相关关规定,危险性化学试剂的包装上必须带有危险性标志、危规编号,在相关试剂手册上也要有文字说明。  1、易燃易爆性化学试剂必须存放在专用的危险性试剂仓库里,并存放在不燃烧材料制作的柜、架上,温度不宜超过28℃,按规定实行“五双”制度。实验室少量瓶装可设危险品专柜,按性质分格贮存,同一格内不得混放氧化剂等性质的试剂,并根据存储种类配备相应的灭火设备和自动报警装置。低沸点极易燃烧试剂宜低温下存储在5℃以下,禁用有电火花产生的普通家用电冰箱贮存。  2、氧化性试剂不得与其它性质抵触的试剂共同储存,而且包装要完好并且密封,严禁与酸类混放,应置于阴凉通风处,防止日光曝晒。  3、腐蚀性试剂储存容器必须按不同的腐蚀性来选择存放,酸类应与氰化物,发泡剂、遇水燃烧品、氧化剂等远离,不宜与碱类混放。  4、剧毒性试剂应远离明火、热源、氧化剂及食物用品,且通风良好处贮存,一般不与其它种类共同储存,且应按规定贯彻“五双”制度。  5、化学试剂中遇水易燃试剂一定要存放在干燥、严防漏水及暴雨或潮汛期间保证不进水的仓位。不得与有盐酸、硝酸等散发酸雾的物品存放在一起,亦不得与其它危险品混存混放。  以上这三大类是比较常见的化学试剂,其它还有如指示试剂就不另外说了。关于化学试剂的管理和存放,相信大家都知道大概流程了。但如果还仅依靠传统人工管理,那肯定容易出问题,这时借助专业试剂耗材管理系统,就能到到事半功倍之效。

企业动态

2020.10.14

Pcr实验室污染来源在哪里?怎样避免污染?

  PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染,pcr实验室在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。  PCR实验室的污染来源  1、样本间交叉污染:  收集样本的容器被污染或样本密封不严外溢;不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖;移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌;不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散,相互交叉污染。  2、实验试剂污染:  主要是在 PCR 组分试剂加样过程中,由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。 加样过程中,因为 PCR 试剂对温度十分敏感,需要通过冰浴使得 PCR 试剂和 PCR 板/管处于 0℃,但这个过程也是充满了污染的风险的。  3、扩增产物污染:  大量拷贝的产物泄漏或扩增后的PCR反应管意外开盖,这是 PCR 反应中最主要最常见的污染问题。因为 PCR 产物拷贝量大,远远高于 PCR 检测数个拷贝的极限,所以极微量的 PCR 产物污染,就可形成假阳性。  4、克隆质粒污染:  作为阳性质控品的克隆质粒外溢。  要避免污染,首先应是预防,工作区域的严格划分,各个实验区域要有明显的标记(如醒目的门牌或不同的地面颜色等),以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆。实验室分为内廊、缓冲区、污染区,检验人员在缓冲区穿上防护服等装备,全副武装后分别进入到试剂准备区,标本制备区,扩增产物分析区。检验人员不可以将任何物品带进实验区。  检验人员在试剂准备区准备试剂,这里是实验的开始。试剂准备完成后,通过传递窗传送到标本制备区,在这里检验人员将标本和试剂混合好后,再通过传递窗传送到扩增产物分析区。在这个区域,检验人员将得到最终的核酸检测结果。  合理的系统设置,合理的空调通风系统设置,尽量采用全送全排的空调系统;严格的气流压力控制,保证不同的实验区内不同的压力要求。  规范的操作,临床基因扩增检验实验室的技术人员必须进行上岗培训,在实验操作过程中,操作者必须戴手套,并经常更换。清洁工作及时、正确。实验工作结束后,必须立即对本区进行清洁。  严格的管理:严格控制进出实验室的人员。在各个实验区域使用带有明显区别标志的工作服(如不同颜色),当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域;尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源,废液不能在实验室中倾倒,必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理,如焚烧等.  Pcr实验室消毒用什么?  过氧化氢超强的氧化能力可以破坏微生物体内的原生质,杀灭微生物,杀菌谱很广,不仅可以杀灭细菌繁殖体和真菌,对细菌芽孢也有很好的杀灭作用,同时过氧化氢是一种清洁的化工产品,几乎没有任何污染。使用过氧化氢雾化不仅可以同时完成微生物实验室内空气和实验室内不同物体表面、以及不易看到的污染死角的消毒,而且消毒彻底、消毒效果好,因此干雾化过氧化氢可以作为pcr微生物实验室彻底消毒的一种方法进行使用。

操作维护

2020.10.14

实验室化学试剂的质量分级,你有了解吗?

化学试剂是进行化学科学研究的最基础单元,广泛应用于物质的合成、分离以及定性和定量分析,在各个应用领域各个行业均有应用,也可以说是化学化工界得以不断发展的基础条件。但是,化学试剂成千上万,又是怎么分类的,大家有所了解吗?实验室中存在有各种各样的试剂,又有多种多样的标签,该怎么去辨认呢?简单地说,按照其应用领域和范围,化学试剂可主要分为无机试剂(用于化学分析的无机化学品,如金属、非金属单质,氧化物、碱、酸、盐等试剂)、有机试剂(用于有机化学反应的实际如醇、酮、酸等)、生化试剂(用于生命科学研究的实际如氨基酸、多肽试剂等)以及电子试剂(用于光学与电子学专用高纯化学品)等。按照其纯度进行分类,也就是现在国内试剂常用的分级标准。所谓纯度,也就是其中主要原料所占的质量分数,按照其纯度高低可将化学试剂分为以下几个等级:首先是纯度较低的工业纯(technicalgrade),主要适用于实验室漂洗、消溶等对实验要求不高的实验室操作中,含杂质较多,纯度非常低;其次是实验纯试剂(laboratoryreagent),杂质含量相对低,不可用于科研实验,仅可用于一般的实验与制备反应,标签为黄色标签。再次是化学纯试剂(chemicalpure),相对于实验纯试剂,其纯度又有所提升,主成分浓度约为99.5%,但仍无法满足科研需求,因此,可用于化学实验和制备反应,其标签为蓝色标签。然后是分析纯试剂(laboratoryreagent),即常用的ar试剂,该类试剂的纯度较高,主成分含量一般大于99.7%,属于二级纯化学试剂,多用于重要分析和一般性科学研究工作,可满足一般科研雪球,标签为红色。最-后是优级纯(guaranteedreagent),又称保证试剂,其主成分浓度大于99.9%,是一级纯化学试剂,可满足精密测试与分析需求,标签颜色为绿色。当然,除了这几种最常见的纯度试剂外,还有纯度更高、更为专用的试剂如高纯、光谱纯、色谱纯以及基准物质等。正是由这些多种多样的化学试剂,才构成了我们这个多姿多彩的化学世界,作为一名化学人,一定要睁大双眼,认好各种试剂的纯度以及它们的衣服,不要搭错了衣服,到时候可就贻笑大方了!

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2020.10.14

pH计的维护保养及常见问题的解决方案

一、pH计的原理通过测定电极与参比电极组成的工作电池在溶液中测得的电位差,并利用待测溶液的pH值与工作电池的电势大小之间的线性关系,再通过电流计转换成pH单位数值来实现测定。二、pH计的保养1.pH计 玻璃电极的贮存pH计短期内不用时,可充分浸泡在饱和氯-化钾溶液中。但若长期不用,应将其干放,切忌用洗涤液或其他吸水性试剂浸洗。2.pH 玻璃电极的清洗玻璃电极球泡受污染可能使电极响应时间加长。可用 CCl4 或皂液揩去污物,然后浸入蒸馏水一昼夜后继续使用。污染严重时,可用 5%HF 溶液浸 10~20 分钟,立即用水冲洗干净,然后浸入 0.1N HCl 溶液一昼夜后继续使用。3.玻璃电极老化的处理玻璃电极的老化与胶层结构渐进变化有关。旧电极响应迟缓,膜电阻高,斜率低。用氢-氟酸浸蚀掉外层胶层,经常能改善电极性能。若能用此法定期清除内外层胶层,则电极的寿命几乎是无限的。4.参比电极的贮存银-氯化银电极最-好的贮存液是饱和氯化-钾溶液,高浓度氯化-钾溶液可以防止氯化银在液接界处沉淀,并维持液接界处于工作状态。此方法也适用于复合电极的贮存。三、常见问题及解决方案1 同一样品,两次测量的 pH值不一样?温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。2 同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?由于两台pH计的校正条件不一样(如不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同一时间里对pH计进行校正,然后再同时测定。3 为什么缓冲液在有效期内已经变质不能使用了?缓冲液的有效期是指未开封使用状态下的保存期。一旦开封使用后,由于空气中各种霉菌的作用,缓冲液较易变质。注意:已使用过的缓冲液,千万不能倒回原装瓶中!4 电极需多久校准一次?电极的校准频率取决于电极的使用、保养、样品性质以及测量精度等具体情况。建议每天校准一次,最长不要超过每周一次校准。更换电极以及长时间不使用,在使用前必须先校准。5 如何保养 pH电极 ?电极使用一段时间后,若发现斜率变低、响应速度变慢等情况,可尝试下列方法:① 若测量样品中含有蛋白质,可用胃蛋白酶 /盐酸洗液清洗电极膜。②若测量样品为油性/有机液体,可用丙酮或乙醇冲洗。③若发现电极液络部变脏变黑,可用硫醇清洗液清洗液络部。④活化电极膜。活化方法:电极再生液浸泡30秒,再用3mol/L KCl溶液浸泡5小时。6 样品温度为 10℃,此时仪表显示的是 10℃还是 25℃下的 pH值?酸度计显示的是溶液在当前温度下的pH值,若在10℃测量,仪表显示的是溶液10℃的值,如果需要得到25℃的pH,必须把溶液温度升/降温至25℃,再进行测量。酸度计的温度补偿指的是补偿温度对pH电极的影响,但不能将任何温度下的pH值补偿到25℃。7 为什么电极放在 pH7.00的缓冲液中校正后,显示为 7.02?此时缓冲液温度在20℃左右。由于缓冲液的pH值会随温度变化有小量变化,7.00只是缓冲液在25℃下的值,而缓冲液在20℃时的值应为7.02。pH计能自动补偿温度对缓冲液的影响以保证测量精度。8 pH电极寿命有多长?pH电极的寿命与测量样品的性质、样品温度及使用的频率、保养情况有关。在正常使用、正确保养的情况下,pH电极寿命为1至2年。9 检测pH计准不准?测pH计准不准?唯-一可靠和最简-单的方法就是以pH标准缓冲溶液来进行检定。取三个pH标准缓冲溶液:pH6.86、pH4.00、pH9.18(最-好是新鲜配制并且温度相同),以pH6.86进行定位校准,以pH4.00进行斜率校准,然后测试pH9.18看pH计是否准确,是否合格立见分晓。如果精度不合格,还可以进一步判断是pH计有问题还是pH电极有问题。10 pH计数字不稳定现象原因总结:①检查电极是否已损坏。②应该是电极使用的时间太长了,先校准看一下是否有效。③可试下用2.5mmoL/L的KCL溶液浸泡探头。④清洗一下玻璃球,是不是时间长了,上面附着了一些有机物,导致反应不灵敏。⑤在水中存在着一个化学平CO2 + H2O→H+ + HCO3-,由于一般的纯水或地表水都显弱碱性导致该平衡向正反应方向移动故pH会一直上升。⑥在被测水样中加入中性盐(如KCL)作为离子强度调节剂,改变溶液中的离子总强度,增加导电性,使测量快速稳定。此方法国家标准GB/T6P04.3—93中规定: “测量水样时为了减少液接电位的影响和快速达到稳定,每50ml水样中加入一滴中性0.1moL/LKCL溶液。”虽然此方法改变了水样中的离子强度,在一定程度上引起了其pH值得变化,但经实验证明此变化在数值上只改变了0.01pH左右,是完全可以接受的。但采用这种方法时,一定要注意所加的KCL溶液不应含任何碱性或酸性的杂质。因此,KCL试剂要采用高纯度的,所配溶液的水质也要高纯度的中性水质。

操作维护

2020.10.13

实验室中玻璃器皿的清洗要求

  ①目的  为了保证微生物实验顺利进行,保证实验结果的准确性,不影响实验进度,必须把器皿彻底清洗干净。  ②注意事项  任何洗涤方法,都不应对玻璃器皿有所损伤,不能用有腐蚀作用的化学药剂,也不能使用比玻璃器皿硬度大的物品来擦拭玻璃器皿。  一般新的玻璃器皿用2%的盐酸液浸泡数小时,后用水冲洗干净。  用过的器皿应立即洗涤,放置太久会增加洗涤困难。  强酸、强碱及其它氧化物和有挥发性的有毒物品,都不能倒在洗涤槽内,以免污染环境水质,必须倒在废水缸中。  含有对人体有传染性病菌的器具,应先煮沸灭菌后再进行洗涤。  难洗涤的器皿不要与易洗涤的器皿放在一起,以免增加洗涤的麻烦。有油的器皿不要与无油的器皿混在一起,否则使本来无油的器皿沾上了油垢,浪费药剂和时间。  洗涤剂的种类:水、洗衣粉、柠檬洗涤剂、肥皂。  ③洗涤方法  含有琼脂培养基的玻璃器皿的洗涤方法:事先应将器皿中的琼脂刮去,然后用清水洗涤,并用试管刷刷其瓶壁,以除去粘污在壁上的灰尘和油垢。用洗衣粉水洗去油污,然后用自来水(蒸馏水)冲洗。洗好后的器皿应倒置晾干或置于干燥箱中干燥至无水滴。  载玻片及盖玻片的洗涤法:新载玻片及盖玻片先在20%的盐酸溶液中浸一小时,然后用自来水冲洗2~3次,最后用蒸馏水换洗2~3次。用过的载玻片及盖玻片,应用纸擦去油垢,再放在5%的洗衣粉水中煮30分钟后立即用自来水冲洗,然后放在稀的洗液中浸泡2小时,再用蒸馏水冲洗至中性。  移液管、倒管的洗涤方法:新的移液管及倒管先在的5%盐酸溶液中浸一小时,然后用自来水冲洗几次,最后用蒸馏水换洗几次。用过的移液管、倒管先用自来水洗去表面的残液,再放在洗衣粉水中浸泡一小时以上,再用自来水冲洗至管内壁无残渣,最后用蒸馏水换洗次,晾干后入恒温干燥箱中烘干。  (8)培养基、灭菌水的制备  ①基本原理  培养基的种类很多,不同微生物所需要的培养基不同。培养基制成后的物理状态可分为液体、固体、半固体三种类型,我们实验室常用的是固体培养基。  ②器材  三角瓶、试管、烧杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、铝箔纸、药勺、杜氏小管、硅胶塞(棉塞)、电炉。  培养基的种类  营养琼脂培养基、乳糖胆盐发酵培养基、乳糖发酵培养基、伊红美兰琼脂培养基等。  方法步骤  培养基的制备:  称量:根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中。  溶解:用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却。  分装:根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5(需根据试管的大小而定)。液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右。  塞橡胶(棉)塞:装好培养基的试管应塞上橡胶(棉)塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发。  包装:三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓。  灭菌水的制备:  用10mL移液管量取9.0mL蒸馏水(稀释水)装入试管中。  用250mL量筒量取225mL蒸馏水(稀释水)装入250mL的三角瓶中,可置少许玻璃珠于三角瓶内,塞上橡胶(棉)塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。  (9)设备使用原则  ①实验设备的使用由实验员严格按照操作说明书进行,其他人员不得随意操作。  ②实验设备的日常维护保养由实验员根据设备操作说明书进行,出现不可排除的故障时,经部门总经理批准,商请专业人员维修。  ③实验设备应定期进行计量检测,确保仪器的准确性。  ④实验员应爱护仪器设备,使用前应检查,使用后应及时清理清洁,并定期维护保养,下班前应检查设备电源是否关闭。

应用实例

2020.10.13

滴定分析中遇到的各种问题汇总

  滴定分析法,作为一种简便、快速和应用广泛的定量分析方法,在常量分析中有较高的准确度,滴定分析可算是实验室中最最-常用的定量方法啦,很多人都有一个疑问,如果滴定分析结果总是超出了误差范围怎么办?  总的来说,对于任何滴定分析,都要首先了解什么样的精度要求才是有意义的并且是必须的,之后如果发现一些结果还是超出了误差范围,你就要从以下几点去找原因:  1.待测样品是否在整个样品中具有代表性?  换句话说,你应该从取样时就开始寻找可能的错误。“分析结果仅代表实际被分析的样品的结果。”也许在实际测量前,样品可能来自于一个没有混合均匀的容器。亦或在取样后,样品暴露在不同的环境条件下。例如样品在滴定前放置不同的时间段,就会吸收不同量的空气中的二氧化碳。在样品转换器上用敞开式的滴定容器时,就应考虑到这一点。因此我们建议先将滴定容器密闭起来,再在滴定开始之前,用一种特殊装置将其打开(Cover-UpTM),就象Rondo样品转换器上的那种。  2.用多少样品来做分析?对于极少量的样品的分析,天平的性能就至关重要。  那么进行一次最小称样量的测试就可以了解天平是否符合要求。  3.如果是滴定仪自身的问题,可从以下几个方面来做检查:  a)馈液管的末端是否有虹吸滴定头,并且工作是否正常?该滴定头是为了防止滴定剂扩散到样品中去。如果失去滴定头,滴定剂就会流入到滴定池中,并和样品反应。但这部分的消耗量是不被计算在内的,因此就能导致比较大的标准偏差。  b)滴定管应检查是否漏气。如果接头没有拧紧或阀的工作不正常,就可能出现漏液。在这种情况下,并不是所有滴定仪馈送的滴定剂都加入到样品中去。由于这种影响不具有重复性,就会导致较大的标准偏差。  c)滴定管中存在有气泡。这通常是由滴定剂中所溶解的气体如CO2、SO2或O2造成的。因此滴定剂在使用前应有个脱气过程,如放置在超声波水浴中。滴定瓶托架作为滴定仪的一个附件可以将滴定瓶提升至与滴定管一样的高度,这就确保在充满滴定管时不会出现负压而造成脱气。卡尔菲休滴定所用试剂由于溶解有SO2,对此极为敏感,因此,在DL31/DL38卡尔菲休滴定仪中,可以适当降低其充液速度。  适合滴定分析的化学反应应该具备以下几个条件:  (1)反应必须按方程式定量地完成,通常要求在99.9%以上,这是定量计算的基础。  (2)反应能够迅速地完成(有时可加热或用催化剂以加速反应)。  (3)共存物质不干扰主要反应,或用适当的方法消除其干扰。  (4)有比较简便的方法确定计量点(指示滴定终点)。  滴定分析法分类  1.直接滴定法  所谓直接滴定法,是用标准溶液直接滴定被测物质的一种方法。凡是能同时满足上述3个条件的化学反应,都可以采用直接滴定法。直接滴定法是滴定分析法中最-常用、最基本的滴定方法。例如用HCl滴定NaOH,用K2Cr2O7滴定Fe2+等。  往往有些化学反应不能同时满足滴定分析的三点要求,这时可选用下列几种方法之一进行滴定。  2.返滴定法  当遇到下列几种情况下,不能用直接滴定法:  第1,当试液中被测物质与滴定剂的反应慢,如Al3+与EDTA的反应,被测物质有水解作用时。  第二、用滴定剂直接滴定固体试样时,反应不能立即完成。如HCl滴定固体CaCO3。  第三,某些反应没有合适的指示剂或被测物质对指示剂有封闭作用时,如在酸性溶液中用AgNO3滴定Cl-缺乏合适的指示剂。  对上述这些问题,通常都采用返滴定法。  返滴定法就是先准确地加入一定量过量的标准溶液,使其与试液中的被测物质或固体试样进行反应,待反应完成后,再用另一种标准溶液滴定剩余的标准溶液。  例如,对于上述Al3+的滴定,先加入已知过量的EDTA标准溶液,待Al3+与EDTA反应完成后,剩余的EDTA则利用标准Zn2+、Pb2+或Cu2+溶液返滴定;对于固体CaCO3的滴定,先加入已知过量的HCl标准溶液,待反应完成后,可用标准NaOH溶液返滴定剩余的HCl;对于酸性溶液中Cl-的滴定,可先加入已知过量的AgNO3标准溶液使Cl-沉淀完全后,再以三价铁盐作指示剂,用NH4SCN标准溶液返滴定过量的Ag+,出现[Fe(SCN)]2+淡红色即为终点。  3.置换滴定法  对于某些不能直接滴定的物质,也可以使它先与另一种物质起反应,置换出一定量能被滴定的物质来,然后再用适当的滴定剂进行滴定。这种滴定方法称为置换滴定法。例如硫代硫酸钠不能用来直接滴定重铬酸钾和其他强氧化剂,这是因为在酸性溶液中氧化剂可将S2O32-氧化为S4O62-或SO42-等混合物,没有一定的计量关系。但是,硫代硫酸钠却是一种很好的滴定dian的滴定剂。这样一来,如果在酸性重铬酸钾溶液中加入过量的dian化钾,用重铬酸钾置换出一定量的dian,然后用硫代硫酸钠标准溶液直接滴定dian,计量关系便非常好。实际工作中,就是用这种方法以重铬酸钾标定硫代硫酸钠标准溶液浓度的。  4.间接滴定法  有些物质虽然不能与滴定剂直接进行化学反应,但可以通过别的化学反应间接测定。  例如高锰酸钾法测定钙就属于间接滴定法。由于Ca2+在溶液中没有可变价态,所以不能直接用氧化还原法滴定。但若先将Ca2+沉淀为CaC2O4,过滤洗涤后用H2SO4溶解,再用KMnO4标准溶液滴定与Ca2+结合的C2O42-,便可间接测定钙的含量。  显然,由于返滴定法、置换滴定法、间接滴定法的应用,大大扩展了滴定分析的应用范围。  滴定结果有误,总是预期值的一半或两倍,不知道为什么?  这可能有多种原因。  结果恰好是预期值的一半或两倍说明这是由于系统误差造成的。  首先要做的就是在安装数据中检查为滴定剂所设定的滴定管体积是否与实际相符。滴定剂清单包含所有与滴定剂相关的信息:名义浓度,滴定管体积,所在驱动器以及在滴定度测定后自动储存的当前滴定度值。  如果指定的是5mL的滴定管,但实际使用了10mL的滴定管,那么计算结果就只有预期值的一半,反之亦然。另一种原因可能在于滴定剂的浓度。在结果的计算过程中,名义浓度乘以滴定度才能得到实际浓度,因此错误的名义浓度就可能导致错误的结果。例如:在滴定剂清单中给出的NaOH浓度是0.5mol/L,而实际上你用的是1.0mol/L的溶液,那么你的结果也就只有预期值的一半了。  此外,滴定反应的平衡数z也必须准确,也就是要知道反应的化学计量关系是什么,是不是1:1的反应。错误的平衡数也必将导致结果变成预期值的一半或两倍。  终点滴定和等当点滴定有何区别?  终点滴定(EP)指传统的滴定步骤:滴定剂持续加入直至反应终止,如用指示剂指定时观察到颜色的变化。对于全自动电位滴定仪来说,持续滴定样品直至达到原先设定的某值,如pH=8.2。  等当点是被分析物和试剂的浓度正好相同的那个点。多数情况下,该点完全等同于滴定曲线的回归点,如酸/碱滴定的滴定曲线。曲线的回归点由相应的pH或电位值及滴定剂消耗量(mL)来定义。等当点由浓度已知的滴定剂的消耗量计算得出。通过浓度和滴定剂消耗量能算出已与样品反应的物质的量。全自动电位滴定仪根据滴定曲线应用专用数学评估步骤评估测量点,然后再依据这条评估后的滴定曲线计算出等当点。

参数原理

2020.10.13

CAS号的意义和用途你知道吗

  CAS号(CAS Registry Number或称CAS Number, CAS Rn, CAS #),又称CAS登录号,是某种物质(化合物、高分子材料、生物序列(Biological sequences)、混合物或合金)的唯一的数字识别号码。  美国化学会的下设组织化学文摘服务社(Chemical Abstracts Service, CAS)负责为每一种出现在文献中的物质分配一个CAS号,其目的是为了避免化学物质有多种名称的麻烦,使数据库的检索更为方便。如今几乎所有的化学数据库都允许用CAS号检索。  到2012年1月20日,CAS已经登记了64,944,800余种物质最新数据,并且还以每天4,000余种的速度增加。  美国化学文摘服务社--为化学物质制订的登记号  格式 :一个CAS号以连字符“-”分为三部分,第一部分有2到现在的7位数字,第二部分有2位数字,第三部分有1位数字作为校验码。CAS号以升序排列且没有任何内在含义。校验码的计算方法如下:CAS顺序号(第一、二部分数字)的最后一位乘以1,最后第二位乘以2,依此类推,然后再把所有的乘积相加,再把和除以10,其余数就是第三部分的校验码。举例来说,水(H2O)的CAS号前两部分是7732-18,则其校验码=(8×1+1×2+2×3+3×4+7×5+7×6)mod 10=105 mod 10=5。(mod是求余运算符)  异构体、酶和混合物: 不同的同分异构体分子有不同的CAS号,比如右旋葡萄糖(D-glucos)的CAS号是50-99-7,左旋葡萄糖(L-glucose)是921-60-7,α右旋葡萄糖(α-D-glucose)是26655-34-5。 偶然也有一类分子用一个CAS号,比如一组乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase)的CAS号都是9031-72-5。混合物如芥末油(mustard oil)的CAS号是8007-40-7

企业动态

2020.10.12

危险物质的使用处理及注意事项

危险物质,是指具有着火、爆炸或中毒危险的物质。使用这类物质的时候应该特别小心注意以下事项:1.使用危险物质前,要充分了解所使用物质的性状,特别是着火、爆炸及中毒的危险性。2. 贮藏。通常,危险物质要避免阳光照射,把它贮藏于阴凉的地方。注意不要混入异物。并且必须与火源或热源隔开。实验室冰箱和超低温冰箱使用注意事项:定期除霜、清理,清理后要对内表面进行消毒;储存的所有容器,应当标明物品名称、储存日期和储存者姓名;除非有防爆措施,否则冰箱内不能放置易燃易爆化学品溶液,冰箱门上应注明这一点。3. 在使用危险物质之前,必须预先考虑到发生灾害事故时的防护手段,并做好周密的准备。使用有火灾或爆炸危险的物质时,要准备好防护面具、耐热防护衣及灭火器材等;对于毒性物质,则要准备橡皮手套、防毒面具及防毒衣之类用具。4.在情况允许下,尽可能少用或不用危险物质。并且,对不了解性能的物质,需进行预备试验。5. 对于有毒-药品及含有毒物的废弃物时,使用完毕后进行适宜的处理,避免污染水质和大气。注意事项:检测/鉴别精-确,稳定性强,为了防止产品含量降低,不宜暴露在空气中,应防潮、避光和抗氧化包装,保存应以提高物质稳定性为原则,尽可能在干燥、低温条件下储藏。该产品实验时必须在专业人士的指导监督下进行操作,严格按照相关法律法规正当处理使用后的废弃物,不要或旧的试剂。使用时要一次性用完,若不足或剩余要更加注意其保管和管理。操作前请参照相关法规、文献、MSDS等信息理解并掌握好试剂的特性,戴好防护用具再进行安全操作;该产品主要用于教学、科学研究、分析测试中。我们提供的试剂产品品质优良,都是通过严格的检测体系认证。处理提示:1、购买后,请务必确认标签上的注意事项。2、做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制。3、在使用前再次确认标签上的注意事项。做好必要的安全对策。4、对没有标明其危险特性,有害特性的,也要慎重地进行操作。5、必须戴好防护用具,小心翼翼进行操作。6、请参照相关法规,文献,MSDS等信息,理解并掌握好试剂的特性,再进行安全操作。7、通常购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话,要更加注意其保管和管理。8、万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。9、对于使用后的废弃物,不要或旧的试剂,应按照相关法律法规正当处理。 

新品

2020.10.12

校准品、标准品和质控品的区别

一、定义上的区别1、校准品: 用于定量检测时对检测项目的校准,是具有在校准函数中用作独-立变量值的参考物质。一般包含2个到多个浓度水平。2、质控品:用于检查分析仪器或方法的性能,是一种稳定的物质,用于验证分析仪器或方法的性能。3、标准品:具有确定特性量值,用于评价测定方法的物质。包括国家参考品和企业内部参考品,可用于主要原材料的质量控制、生产工艺及反应体系的确定研究、产品放行、注册检验、监督抽验等。二、是否都需要注册1、校准品:一般可与配合试剂合并申请注册,也可单独申请注册;2、质控品:一般可与配合诊断试剂合并申请注册,也可以单独申请注册。3、标准品:国家参考品由中国食品药品检定研究院负责组织制备、标定,并向国家药品标准品委员会申报获批。企业内部标准品是由企业根据产品的特性研制用于满足产品生产过程中的质量控制、性能评估等,一般不需要注册。三、是否都需要溯源性文件1、校准品:要求提供完整的溯源性文件。2、质控品:一般无溯源性要求,但对于定值质控品,有赋值准确度的要求。3、标准品:如已有相应的国家或国-际标准品的项目,则企业内部标准品应溯源至国家或国-际标准品;如无国家或国-际标准品,企业参考品的制备应有规范的质量控制程序,比如用金标准的方法或已上市同类产品对其进行验证确认等。四、性能评估指标1、对于校准品和质控品,除了溯源性上的差别外,一般都包括装量、瓶间差、生物安全性、稳定性等指标的要求。2、而对于标准品:根据项目的不同,选用相应的试剂盒或金标准方法等,对参考品进行验证分析。校准品、标准品、质控品三者同为参考物质。参考物质是一种材料或者物质,某一种或多种特性值只够均匀并被良好确定,用于校准测量系统,评价测量程序或为材料赋值。但三者并非用一个概念,他们有各自不同的应用场合。临床上常常有很多错误的应用,例如将不同厂商的校准品应用于检测系统;使用给定值的质控品评价检测系统;使用质控品来校准检测系统等等。校准品、标准品、质控品的来源及定值方式,得出正确使用三种参考物质的方法。1、传统的方法的缺点传统的检验项目,要使得检验结果可靠或者有依据,往往会使用一个已知浓度的标准品同样品一同测定。传统的标准液用纯水配制,同血清相比,成份非常简单,除了待测物质外只有水了。此时在将样品同标准品相比较时,引入了基质效应。基质效应:检体中的非测定物质对测定量的影响。换句通俗的话说也就是,检体中测定物外的其他物质对||检测的干扰,使检测结果偏离真值。此时通过同无基质效应的标准品比较得出的有基质效应的样品检测值,将偏离于真值。是否能使用标准液取决于检测方法学,干扰极小的决定性方法或者某些已知干扰的参考方法可直接使用标准品。2、标准品的定值一般而言,检验工作中使用的标准品属应用标准。将符合质量标准的纯品使用称量法和容量法配制成溶液。用决定性方法反复测定,结果在规定的范围内属合格。测定制的可靠性取决于鉴定方法,分析方法的可靠性不如公认的称量法和容量法。标准品值由称量和容量法计算确定。决不可将实测值替代修正。3、引入校准品为了克服纯标准品和病人样品间的基质差异,20年前开始应用具有与病人样品基质效应相似的校准品替代标准品,用于日常工作。4、校准品的定值1. 校准品来源:校准品大多来源为人样品的混合物,如混合血清。本身内含被检分析物,植被时刻添加某些分析物,增加含量。2. 定值方法:校准品中被检分析物的含量无法由称量法和容量法确定,只能依赖于分析方法。校准品的校准值只能取决于分析方法和检测系统。但所有用于检验中的检测方法、仪器、试剂等都是用来监测病人的新鲜样品的,不是用来监测校准品这样处理过的样品的。所有校准品都是处理过的样品,和新鲜样品有着新的基质差异。若使用公认的参考方法去标化测定校准品,测定程序是严格的,测定只是可靠的,但不是校准值。使用该测定值去校准常规的检测系统时,校准品中的分析物被检测时的表现明显不同于新鲜病人样品,不能将参考方法系列的准确度通过校准品传递给病人如先使用公认的参考方法检测病人样品,再以具有参考值的病人样品去校准某检测系统。此时该检测系统在检测其他新鲜病人样品时,这些病人样品结果的溯源性可上溯至公认的参考方法。也即用新鲜病人样品是校准系统的zui-佳校准品。但是具有参考值的新鲜病人样品无法用于常规工作所有方法、仪器、试剂或检测系统的校准;只能依靠现有的校准品,如何去确定校准品的校准值是关键。评级校准值可靠性的唯1要求是:被校准品校准后的检测系统,对病人样品检测的检验结果和某些指定参考方法对病人样品的检验结果具可比性。校准值不是测定值,是纠正的调整值。5、校准品的专用性在以往的应用中用户往往不注意校准品的应用的专用性,任何方法或仪器、试剂使用一个校准品,严重影响检验质量。从上面的校准品定值方法中,我们可以知道,只有在使用了和定值时相同的检测系统,得出的结果才能同参考方法结果具可比性。6、质控品定值1. 质控品的来源:质控品的来源同校准品大致相同,厂商可能会geng具自己的要求添加了很多物质,此时有些物质的添加量常常达到病理状态的高浓度,在应用于某一项目时,对这个项目来说基质效应将geng大。2. 定值方法:有些厂商会给自己的标准品定一个定值范围,这个定值范围是由厂商联合几家使用同样检测系统的临床用户,仅多次测定得出的均值。此时如果将该质控品应用于另一个检测系统,由于方法学的不同,可能得出同厂商给出值有较大差异的值。此时不能认为该检测系统的准确度不佳。此时需要强调的是检测系统都是用来测定新鲜血清的,不是用来测定质控品或其他物质的。检测系统只有在检测新鲜血清是得出的结果才具有溯源性。不同检测系统之间只有在检测新鲜血清时才具可比性。

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2020.10.12

我国的标准物质与标准样品的研制现状

  在ISO/REMCO成立后不久的1980年,我国正式参加国际标准样品技术交流活动。从 1994年开始,我国在参照、等效或等同采用国际导则的基础上,逐步制定了GB/T15000系列国家标准《标准样品工作导则》及技术规范。1996年原国家技术监督局批准成立了ISO/REMCO中国委员会,协调我国与国际之间的标准物质/标准样品的技术交流活动。那么我国标准物质/标准样品的研制现状是怎样的呢?下面小编来给大家介绍。  目前国内有几十个标准物质/标准样品研制单位,研制了几千种标准物质/标准样品,品种涉及钢铁、有色金属、矿石、炉渣、建材、农药、临床化学、气体、环境、食品、化工产品、工程技术、特性、核工业、物理特性与物理化学特性等各个方面,在各个领域标准物质/标准样品得到广泛的应用,尤其近年来在国家实验室认可、ISO9000认证及我国的国民经济建设中发挥了重要作用。  截至2006年7月,由国家质量监督检验检疫总局(国家技术监督局)批准的一级标准物质发布了 1334种,有效1316种,二级标准物质发布了2315种,有效2275种;国家标准样品发布了1990种,还有各个行业部门发布的行业标准样品,其数量比国家标准样品更多,如钢铁标准样品2833种,有色金属标准样品1242种。  虽然我国标准物质/标准样品基本满足了我国国民经济建设的需要,但随着科学技术的发展和材料、新领域的快速增长,现有的标准物质/标准样品品种已不能完全满足需求,在国家“十一五”规划中尤为突出表现在食品安全、医疗保健、化纤、物理特性等领域需亟待解决,即使是数量和品种在国内标准物质/标准样品最多的冶金行业,在新材料领域仍缺少满足需要的标准物质/标准样品。  以上内容就是对我国标准物质/标准样品的研制现状的介绍了,自从1906年美国成功研制出第一批冶金标准物质/标准样品的以来,经过了100年的发展。随着全球经济、科学技术、测量技术和社会生活需求的高速发展,需要品种、数量越来越多、质量越来越高的标准物质/标准样品。在现代的科学技术发展和国民经济建设中,标准物质/标准样品将会继续发挥重要作用。

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2020.10.10

科普干细胞填充技术,揭秘干细胞抗衰原理

你可能经常能够在耳边听到别说干细胞,干细胞是一个什么样的概率,是个什么东西你真的了解吗?今天小编就带你来深入了解我们常说的:干细胞!什么是干细胞?干细胞是一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞、能够产生至少一种类型的、高度分化的子代细胞,干细胞(stem cell,SC)的“干",译自英文“stem”,意为“茎干”,“干”和"起源”。干细胞群的功能即为控制和维持细胞的再生。 一般来说,在干细胞和其终末分化的子代细胞之间存在着被称为“定向祖细胞”的中间祖细胞群,它们具有有限的扩增能力和限制性分化潜能。这些细胞群的功能是增加干细胞每次分裂后产生的分化细胞的数量。干细胞是具有多向分化潜能、自我更新能力的细胞,是处于细胞系起源顶端的最原始细胞,在体内能够分化产生某种特定组织类型的细胞。干细胞与衰老的关系构成人体的200余种细胞中,大部分为终末分化细胞,高度分化使其失去了再分裂的能力,最终会衰老、死亡;但同时机体也保留了一部分未分化的原始细胞,即干细胞。这些细胞在特定条件下或者产生新的干细胞,或者按一定的程序分化形成新的功能细胞,从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡,当衰退的进程大于再生长的能力时表现为衰老;如果细胞再生能力更强,那么组织衰老的进程将被延缓甚至阻断。 干细胞的功能、特点使得其在创伤修复、神经再生和抗衰老等临床医学领域具有广阔应用前景。已有研究证明,干细胞在心血管疾病、代谢病、帕金森氏综合征、肝硬化、白血病等多种疾病的治疗中疗效显著;而干细胞抗衰老更是《Science》杂志评选出的1999年度10大科学进展之一,由此引发的“再生医学”革命不容小觑。可想而知,干细胞抗衰老效应的发挥取决于是否能够动员足够数量的理想的干细胞。 干细胞美容应用延缓衰老、永葆青春,自古以来就是人类不懈追求的目标,美容行业所说的抗衰老是以形体形象为主,祛皱、提拉等项目都属于抗衰项目,延缓肌肤衰老!尚恩控股集团联合国内外医美领域专家,对干细胞美容应用展开深入研究,干细胞美容抗衰老是目前临床上的主要应用,主要通过对自体干细胞进行体外培养、扩增、纯化,再移植到人体指定部位,激活皮肤干细胞的再生和修复,降低细胞老化速率,增强肌肤内部支撑结构,从而达到除皱、祛疤、减肥、丰胸等效果,医佳颜活性因子抗衰便是运用了干细胞再生特性,对面部凹陷进行再生填充,修饰面部脸型,起到紧致提拉祛皱的美容抗衰功能。

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2020.10.10

常说的"干细胞"和"免疫细胞",他们到底有什么不同?

我们知道,我们的身体是一个由细胞构成的王国,极其精密复杂,同时又高度有序。任何伟大的王国都既需要建设者,也需要勇猛的防卫兵。 现在,让我们来进分别了解干细胞和免疫细胞,他们在功能、提取方式、分类以及治疗方式方面的差异性:功能不同:干细胞是建设者,免疫细胞是作战部队在成体的器官中,干细胞可以通过不断分裂来修复组织,或者是像在哺乳动物脑组织中那样处于静止的状态。干细胞在其发育期间能够通过对称性地分裂以扩增它们的数量,或者通过非对称性分裂进行自我更新和产生更多不同分化类型的祖细胞。当有外敌入侵,如细菌和病毒,免疫细胞就会扮演细胞王国的军队,快速反应,将其清除。如果细胞王国中出现叛变分子,如正常细胞突变为癌细胞,免疫细胞就会扮演安保系统,将其识别并清除。两者分类不同干细胞:1.根据发生学来源分类:干细胞可以分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞是指由胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制培养而筛选出的细胞。胚胎干细胞具有发育全能性,在理论上可以诱导分化为机体中所有种类的细胞;胚胎干细胞在体外可以大量扩增、筛选、冻存和复苏而不会丧失其原有的特性。成体干细胞 :成体干细胞是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞,这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组成该类型组织的细胞。成体干细胞存在于机体的各种组织器官中。目前发现的成体干细胞主要有:造血干细胞、骨髓间充质干细胞、神经干细胞、肝干细胞、肌肉卫星细胞、皮肤表皮干细胞、肠上皮干细胞、视网膜干细胞、胰腺干细胞等。2.根据不同的分化潜能分类:干细胞可分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞。全能干细胞:具有自我更新和分化形成任何类型细胞的能力,有形成完整个体的分化潜能,如胚胎干细胞 ,具有与早期胚胎细胞相似的形态特征和很强的分化能力,可以无限增殖并分化成为全身200多种细胞类型 ,进一步形成机体的所有组织、器官。(就是种子)多能干细胞:容易理解,多能干细胞具有产生多种类型细胞的能力,但却失去了发育成完整个体的能力 ,发育潜能受到一定的限制。(枝桠、树叶和果实)单能干细胞(也称专能、偏能干细胞) :常被用来描述在成体组织、器官中的一类细胞,意思是此类细胞只能向单一方向分化,产生一种类型的细胞。在许多已分化组织中的成体干细胞是典型的单能干细胞,在正常的情况 下只能产生一种类型的细胞。如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞又叫卫星细胞。这种组织是处于一种稳定的自我更新的状态。然而,如果这种组织受到伤害并且需要多种类型的细胞来修复时,则需要激活多潜能干细胞来修复受伤的组织。(果实和树叶)免疫细胞:T淋巴细胞:T细胞是淋巴细胞的主要组分,它具有多种生物学功能,如直接杀伤靶细胞,辅助或抑制B细胞产生抗体,对特异性抗原和促有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等,是身体中抵御疾病感染、肿瘤形成的英勇斗士。T细胞产生的免疫应答是细胞免疫,细胞免疫的效应形式主要有两种:与靶细胞特异性结合,破坏靶细胞膜,直接杀伤靶细胞;另一种是释放淋巴因子,最终使免疫效应扩大和增强。B淋巴细胞:成熟的B细胞经外周血迁出,进入脾脏、淋巴结,主要分布于脾小结、脾索及淋巴小结、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小结中,受抗原刺激后,分化增殖为浆细胞,合成抗体,发挥体液免疫的功能。K淋巴细胞:K细胞的杀伤作用在肿瘤免疫、抗病毒免疫、抗寄生虫免疫、移植排斥反应及一些自身免疫性疾病中均有重要作用,产生的免疫应答有免疫防护及免疫病理两种类型。NK淋巴细胞:NK细胞杀伤的靶细胞主要是肿瘤细胞、病毒感染细胞、较大的病原体(如真菌和寄生虫)、同种异体移植的器官、组织等。肥大细胞:肥大细胞mast cell是和血液的嗜碱粒细胞同样具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。存在于血液中的这种颗粒,含有肝素、组织胺、5-羟色胺,由细胞崩解释放出颗粒以及颗粒中的物质,可在组织内引起速发型过敏反应(炎症)。由于在肥大细胞上结合的IgE抗体和抗原的接触,使细胞多陷于崩坏。治疗方面不同生命体是通过干细胞的分裂来实现细胞更新 及保证持续增长,干细胞的研究与应用将有可能使人类实现完美修复损伤组织和 器官的梦想。多年来科学家们一直致力于寻找利用干细胞的复制和分化来取代受损细胞或组织的方法。这一点随着组织工程、胚胎工程、细胞工程、基因工程等各种生物技术的发展和干细胞生物学研究领域的突破而展现出无比广阔的前景。按照一定的目的在体外人工培养、分离干细胞已成为可能,利用干细胞构建各种 细胞、组织、器官作为移植的来源将成为干细胞应用的主要方向。干细胞是对疾病进行基因治疗时理想载体。造血干细胞具有自我更新、多向分化 重建长期造血、采集和体外处理容易等特点。因此是基因治疗最理想的载体细胞之一,以此为基础的基因治疗,在重症免疫缺陷、遗传性疾病、恶性肿瘤、造血干细胞保护、AIDS等领域具有广阔的应用前景。胚胎干细胞可以分化为多种细胞类型又能不断自我更新,这在药物研究领域具有广泛的用途。目前用于药物筛选的细胞都来源于动物或癌细胞这样非正常的人体细胞,而胚胎干细胞可以经过体外诱导,为人类提供各种组织类型的细胞,这为药物筛选、鉴定及其毒理的研究提供坚实的基础,并有助于人类疾病细胞模型的建立及新药开发。免疫细胞是卫戍部队,主要起到两方面的治疗作用:(1)清除衰老、凋亡的细胞,以防止残老细胞聚合在一起对人体造成伤害,以NK细胞为主;(2)治疗癌症,输入体内可以绞杀病患身体里面失控的癌细胞,如CIK细胞和CAR-T细胞。提取方式不同干细胞可以从多种人体组织中提取以目前临床应用最广泛的间充质干细胞为例,最初是从骨髓中提取的,后来在血液、脂肪、牙髓等多种人体组织都能提取到。14年前(2004年),科学家发现,间充质干细胞最丰富最优质的天然来源是通常被丢弃的胎盘。目前免疫细胞的来源主要是血液包括成人的外周血和婴儿的脐带血。血液中含有大量功能成熟的免疫细胞,在我们的身体内不停循环,时刻保护我们的健康。不管是免疫细胞还是干细胞,都有能力影响我们的衰老和健康,使亚健康和疾病远离我们。换句话说,只要保持我们体内的细胞持续更新,足够强壮,就可以实现延缓衰老和健康长寿的目的。生命变得更加年轻有活力,我们也就变得更加精神焕发。即使是自然衰老,也能在这过程中感受到健康和快乐。当然,实现这一美好愿望还需要我们把健康、最佳状态的细胞储存起来,为未来保存希望。

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2020.10.10

诺奖得主手中的那株青霉菌被首次测序

1928年,亚历山大?弗莱明(Alexander Fleming)在伦敦圣玛丽医院的医学院工作时发现了第一种抗生素——青霉素(penicillin)。这种抗生素是由青霉属中的霉菌产生的,能够抑制葡萄球菌的生长。凭借此项发现,弗莱明在1945年被授予诺贝尔生理学或医学奖。之后,弗莱明所发现的青霉菌菌种被交给牛津大学的研究小组保存。如今,来自伦敦帝国理工学院、牛津大学和国际应用生物科学中心(CABI)的研究人员利用五十多年前冷冻保存的样本,对这个原始青霉菌菌株开展了基因组测序。这项成果于9月24日发表在《Scientific Reports》杂志上。研究小组还将弗莱明的青霉菌菌株和美国现在大规模生产抗生素所用的菌株进行比较。他们发现,英国菌株和美国菌株生产青霉素的方式略有不同,这可能对抗生素的工业生产有意义。帝国理工学院生命科学系和牛津大学动物学系的Timothy Barraclough教授说:“我们原本打算将亚历山大?弗莱明的青霉菌用于一些其他实验,但让我们惊讶的是,没有人对这个原始的青霉菌基因组进行测序,尽管它在生物界具有历史意义。”尽管弗莱明霉菌因青霉素的发现而闻名,但后来美国研究人员却选择发霉哈密瓜上的霉菌来生产抗生素。他们从发霉的哈密瓜上分离出原始的野生霉菌分离株,经过多轮X射线、化学和紫外线诱变以及人工选择,最终获得青霉素产量高的分离株。在这项研究中,研究团队获得了保存在CABI菌种保藏库中的冷冻样本,并重新培养了弗莱明的原始青霉菌(Penicillium rubens)。他们提取出DNA,利用Illumina MiSeq测序平台开展基因组测序,并将此基因组与先前发表的两种青霉属工业菌株的基因组进行比较。研究人员特别关注两类基因:一类是编码各种酶的基因(pcbAB、pcbC和penDE),青霉菌利用这些酶来产生青霉素;另一类是调控基因,这些基因能够控制酶的产量。他们发现,对于英国和美国的菌株,调控基因有着相同的遗传密码,但美国菌株拥有更多的拷贝,使得菌株产生更多的青霉素。不过,青霉素生产酶的编码基因却不相同。这表明,英国和美国的野生青霉菌经过自然进化,产生了略有不同的版本。像青霉菌这样的霉菌会产生抗生素来对付微生物,而微生物也会不断进化以躲避这些攻击,如此这般,“军备竞赛”不断升级。英国菌株和美国菌株的进化方式可能不同,以适当其当地的微生物。就目前而言,微生物进化已成为一个大问题,因为许多细菌已对我们的抗生素产生了耐药性。研究人员表示,尽管他们尚不清楚英国和美国菌株中不同酶的序列对抗生素有何影响,但这有望带来青霉素生产的新方法。文章的第1作者、帝国理工学院生命科学系的Ayush Pathak表示:“我们的研究有望激发对抗耐药性的新解决方案。青霉素的工业生产主要关注产量,而人为提高产量的步骤导致基因数量的改变。”

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2020.10.09

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