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动物源性食品中利巴韦林残留量的 UPLC-MS/MS 分析（Copure® PBA)
2021/12/03 10:35
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方案摘要：
产品配置单：
智能水浴氮吹
型号： BN24
产地： 深圳
品牌： Biocomma
¥5.98万
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多管涡旋混匀仪
型号： SDC-3000
产地： 深圳
品牌： Biocomma
¥2.88万
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Copure® PBA(苯硼酸) SPE 100mg/3mL固相萃取小柱
型号：
产地：
品牌： Copure
¥2000
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12位固相萃取装置
型号：
产地：
品牌： Biocomma
¥6850
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方案详情：
一、样品提取
称取 5.0 g 样品于 50 mL 离心管中，加入浓度为 1 μg/mL 同 位素内标利巴韦林 -13C5 溶液 10 µL，加入 12 mL 20 g/L 三氯 乙酸水溶液和 2.5 mL 乙腈，涡旋混匀 30 s，超声 10 min，于 8000 r/min 离心 5 min，上清液全部转移至 50 mL 离心管中， 再向样品中加入10 mL 20 g/L三氯乙酸水溶液重复提取一次， 合并两次提取液，用三氯乙酸水溶液定容至 25 mL，再准确移 取 5 mL，用氨水调节 pH 至 8.5（±0.1）待净化（本实验是采 用阴性样本做基质加标实验，故省略酶解步骤）。
二、SPE 净化（Copure® PBA, 100 mg/3 mL）
活化：向 PBA 柱中依次加入 3 mL 乙腈，3 mL 0.25 mol/L 乙 酸铵缓冲液（pH=8.5）进行活化。
上样和洗脱：取上述待净化液过柱，控制流速不超过 1 滴 / 秒， 然后用 3 mL 0.25 mol/L 乙酸铵缓冲液（pH=8.5）淋洗小柱， 弃去全部流出液，抽干小柱，用 2 mL 0.1 mol/L 甲酸水溶液 洗脱，抽干小柱，收集全部洗脱液。
上机：取上述洗脱液过 0.22 µm PES 水系滤膜，供上机分析。
三、标曲配制
采用内标法定量，分别精密量取适量的利巴韦林标准溶液和同 位素内标利巴韦林 -13C5 工作液，用 0.1 mol/L 甲酸水溶液配 制成适当浓度的标准工作溶液。
四、仪器条件 色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura） 色谱柱：CS211003H（HILIC，2.1 mm×100 mm，3 µm） 流动相：A：5 mmol/L 乙酸铵溶液（含 0.1% 甲酸） B：乙腈 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱程序
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公司名称： 深圳逗点生物技术有限公司
公司地址： 深圳市龙岗区布吉街道甘李六路12号中海信创新产业城12栋14楼 联系人： 汪引 邮编： 518114
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