茶叶中多种农药残留的 UPLC-MS/MS 测定（Copure® 专用柱）

一、样品提取 

准确称取 10.0g经粉碎的茶叶于 50 mL 离心管中，加入 30mL 乙腈，2500 rpm 涡旋 10 min，5000 r/min 离心 5 min，上 清液转移至 100 mL 鸡心瓶中，残渣加 30 mL 乙腈，2500 rpm 涡旋 10 min，5000 r/min 离心 5 min，上清液转移并入鸡心瓶 中，残渣再加 20 mL 乙腈重复提取一次，合并上清液于鸡心瓶 中，45℃水浴旋蒸浓缩至近干，转移至 15 mL 离心管中，用乙 腈定容至 5 mL 待净化。 

二、样品净化（Copure® 茶叶专用柱 , 12 mL） 

活化：茶叶柱加入约 2 cm 高无水硫酸钠，用 5 mL 乙腈 - 甲苯 溶液（3:1）预洗柱；弃去流出液

上样和洗脱：茶叶柱下接鸡心瓶，取待净化液 1 mL 过柱，收 集流出液；然后加入 25 mL 乙腈 - 甲苯溶液（3:1）进行洗脱， 收集流出液。 

重新溶解：洗脱液于 45℃氮吹至干，用 1 mL 60% 乙腈水溶液复溶，过 0.22 µm 尼龙滤膜供上机测试。 

三、标曲配制 

称取空白茶叶样品 10.0g 按照上述一、二步骤进行至氮吹近 干，作为空白基质提取液。分别精密量取一定量的混合标准液加入到空白基质提取液中， 用 60% 乙腈水溶液定容至 1 mL，配制成适当浓度的基质混合 标准工作溶液。

四、仪器条件 

色谱条件 仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura） 色谱柱：CommaSil® ODS (2.1 mm×100 mm，3.0 µm) 流动相：A：水（0.1% 甲酸）   B：甲醇（0.1% 甲酸） 

洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 梯度洗脱程序

流速：0.4 mL/min 柱温：35℃ 进样量：5 µL

质谱条件 

离子源：HESI  电喷雾电压：3500 V

鞘气压力：30 arb  辅气压力：2 arb 离子传输管：380℃  辅气温度：350℃ 

表 2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（* 为定量离子）

五、实验结果 

表 3 茶叶中多种农药残留加标回收结果（0.5 mg/kg）

六、结果与讨论 

（1）该实验采用 UPLC-MS/MS 进行茶叶中多种农药残留的测定， 外标法定量，建议配制基质标曲进行定量，否则会存在基质效应， 影响仪器准确定量；茶叶柱能将茶叶中大部分色素除去，除杂效 果佳，极大程度上降低了杂质对目标分析物的干扰。 （2）从表 3 茶叶中多农残添加回收结果可知：大部分农药回收率 都在 70%-120% 以内，RSD 小于 10%，可以满足绝大多数客户测试 需求。但茶叶柱对乙酰甲胺磷、甲磺隆、氯磺隆、胺苯磺隆、多 菌灵这几种农药存在吸附，造成回收率低或者无回收的现象，如 需对这几种农药进行测定，建议采用 QuEChERS 方法，回收率会得以改善。