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常用的细胞培养方法、污染及污染处理
常用的细胞培养方法、污染及污染处理
细胞培养技术是生物工程中最基础最核心的技术,该文简述了常用的细胞培养方法、污染及污染处理供各单位借鉴。1.细胞培养的条件和要求1.1环境:体外细胞培养仅是对所需的细胞进行培养,但环境中有各种微生物,必须对所需细胞进行无杂菌隔离培养。1.2细胞培养中必须有足够的营养供应,而绝对不可有有害物质,细胞培养对水质要求很高,必须杜绝微生物污染及有害离子存在,一般采用蒸馏和离子交换相结合的方法,最后再通过除菌灭菌。营养物包括:N源、C源;无机盐、维生素、激素。细胞培养液的设计一直是细胞离体培养技术的关键。理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物、调节物质的全部需要。1.3保证有适量的氧气供应:在用培养瓶进行静置或旋转培养时,只要培养的液体量不超过总容量的30%,通过与液面的空气交换,可以保证细胞有足够的氧气。当用罐子深层培养时,则必须通气,一般采用含5%CO2的空气。1.4需随时清除细胞代谢中产生的有害产物。细胞在代谢过程中会产生大量代谢废物必须及时清除,如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等。在小量培养时,当培养基中酚红指示剂显示黄色。
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