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两种大鼠视网膜Müller细胞培养方法比较
两种大鼠视网膜Müller细胞培养方法比较
Müller细胞是脊椎动物视网膜胶质细胞中最重要的一种,它约占哺乳动物视网膜胶质细胞的90%,结构上贯穿视网膜全层,起支持骨架作用,功能上更是视网膜代谢的中心[1],对视网膜的正常发育及功能的维持起决定性作用。而且参与青光眼、糖尿病视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变等病理过程[2]。近年研究显示,Müller细胞还具有潜在神经干细胞特性[3]。体外培养视网膜Müller细胞模型,可为视网膜细胞发育学、生理学、病理学等提供研究平台。本研究旨在比较酶消化法与组织块法培养大鼠视网膜Müller细胞的效果,为以后的实验研究提供合适的细胞培养方法。1材料与方法1.1实验动物及主要试剂出生3d的SD大鼠10只,雌雄不限(山东鲁抗医药股份有限公司提供),DMEM/F12培养基、D-Hanks液、2.5g/L胰蛋白酶、胎牛血清、磷酸盐缓冲液(PBS)(Hyclone公司),青霉素、链霉素、TritonX-100,40g/L多聚甲醛,兔抗鼠谷氨酰胺合成酶(GS)抗体(稀释度1∶100,Abcam公司),生物素标记的山羊抗兔IgG。
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