人白细胞介素1β(IL-1β)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒 96T
1pg/ml-40pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、唾液及相关液体样本中白细胞介素1β(IL-1β)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素1β(IL-1β)水平。用纯化的人白细胞介素1β(IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素1β(IL-1β),再与HRP标记的白细胞介素1β(IL-1β)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素1β(IL-1β)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素1β(IL-1β)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品(80pg/ml)
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
40pg/ml
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
20pg/ml
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
10pg/ml
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
5pg/ml
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
2.5pg/ml
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒
人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒
人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒
人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA试剂盒
人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒
人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒
人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒
人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒
人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒
人淋巴毒素β(LTB)ELISA试剂盒
人淋巴毒素α(LTA)ELISA试剂盒
人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒
人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒
人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒
人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒
人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒
人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒
人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒
人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒
人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒
人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒
人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒
人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA试剂盒
人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒
人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒
人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒
人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒
人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒
人B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒
人B细胞分化因子(BCDF)ELISA试剂盒
人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒
人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒
人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒
人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒
人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒
人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒
人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒
人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒
人淋巴细胞因子ELISA试剂盒
人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒
人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒
人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒
人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒
人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒
人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA试剂盒
人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒
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人白细胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA试剂盒
人CD4分子(CD4)ELISA试剂盒
人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒
人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒
人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒
人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒
人CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒
人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒
人基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒
人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒
人α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒
人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒
人白介素27(IL-27)ELISA试剂盒
人白介素23(IL-23)ELISA试剂盒
人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒
人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒
人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒
人白介素1(IL-1)ELISA试剂盒
人白介素17(IL-17)ELISA试剂盒
人白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒
人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒
人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒
人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒
人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒
人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒
人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒
人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒
人结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒
人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒
人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒
人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒
人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒
人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA试剂盒
人血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒
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