兔C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒使用说明书

兔C-反应蛋白(CRP)酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：兔C-反应蛋白(CRP)酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定兔血清、血浆、或相关组织液中C-反应蛋白(CRP)的含量。
兔C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔C-反应蛋白(CRP)水平。用纯化的兔C-反应
蛋白(CRP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入C-反应蛋白(CRP)，
再与HRP 标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗
涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终
的黄色。颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测
定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中兔C-反应蛋白(CRP)的含量。
试剂盒组成
1 20 倍浓缩洗涤液30ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（1350μg/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.0ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本处理及要求
1．血清、血浆标本可直接测定；
2．尿液、脑脊液、腹腔液：2000-3000 转/分离心10 分钟后，取上清液待测。
3．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
4．采集后尽早进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反
复冻融。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上按序设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别
加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；再各取100μl 分
别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后，在第
三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉；再各取50μl 分别加到第五、第六孔中；再在第五、
第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加
到第七、第八孔中；再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、
第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中；再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，
混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（ 稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为
900μg/L，600μg/L ，300μg/L，150μg/L，75μg/L）。
2. 兔C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样
品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水20 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．兔C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔第一孔OD 值的），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 兔C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
6．本试剂不同批号组分不得混用。
7．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．底物请避光保存。
检测范围：
50μg/L -1000μg/L
规格：
96 人份/盒
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月

兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒     rabbit Immunoglobulin E,IgE ELISA试剂盒    

兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒      rabbit Immunoglobulin A,IgA ELISA试剂盒     

兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒     Rabbit soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA试剂盒    

兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒     rabbit Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA试剂盒     

兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒     rabbit soluble E-selectin,sE-selectin ELISA试剂盒    

兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒     rabbit macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA试剂盒     

兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒      rabbit basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA试剂盒     

 兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒       rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA试剂盒     

兔子甲状腺素(T4)ELISA试剂盒     rabbit thyroxine,T4 ELISA试剂盒     

兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒     rabbit tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA试剂盒    

兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒     rabbit matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA试剂盒     

兔子基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒     rabbit matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA试剂盒    

兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒     rabbit matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA试剂盒    

兔子睾酮(T)ELISA试剂盒     rabbit Testoterone,T ELISA试剂盒     

兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒     rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA试剂盒     

兔子γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒      rabbit Interferon γ ,IFN-γ ELISA试剂盒     

兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒     rabbit telomerase,TE ELISA试剂盒     

兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒     protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP1/MCAF ELISA试剂盒    

兔子促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒     rabbit adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA试剂盒    

兔子促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒     rabbit follicle-stimulating hormone,FSH ELISA试剂盒     

兔子促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒     rabbit Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA试剂盒     

兔子雌二醇(E2)ELISA试剂盒     rabbit Estradiol,E2 ELISA试剂盒    

兔子肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒     rabbit intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA试剂盒     

兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒      Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA试剂盒     

兔子白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒     rabbit leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA试剂盒     

兔子白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒     rabbit Leukotriene B4,LT-B4 ELISA试剂盒     

兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒     rabbit Interleukin 8,IL-8 ELISA试剂盒    

兔子白介素6(IL-6)ELISA试剂盒     rabbit Interleukin 6,IL-6 ELISA试剂盒    

兔子白介素4(IL-4)ELISA试剂盒     rabbit Interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒     

兔子白介素3(IL-3)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 3,IL-3 ELISA试剂盒     

兔子白介素3(IL-3)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 3,IL-3 ELISA试剂盒     

兔子白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 1β,IL-1β ELISA试剂盒     

兔肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒     Rabbit Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA试剂盒     

兔子白介素10(IL-10)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 10,IL-10 ELISA试剂盒    

兔子白介素1(IL-1)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 1,IL-1 ELISA试剂盒    

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒     rabbit Soluble protein-100B,S-100B ELISA试剂盒    

兔子S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒     rabbit Soluble protein-100,S-100 ELISA试剂盒    

兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA试剂盒     Rabbit major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡ ELISA试剂盒     

兔子凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒     Rabbit thrombin receptor,TR ELISA试剂盒     

兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒     rabbit soluble P-selectin,sP-selectin ELISA试剂盒    

兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒     rabbit Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA试剂盒    

兔子Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒     rabbit Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA试剂盒    

兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒     rabbit Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA试剂盒    

兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒     rabbit N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA试剂盒    

兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒     rabbit procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA试剂盒     

兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒     Rabbit coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA试剂盒     

兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒     rabbit C-Reactive Protein,CRP ELISA试剂盒    

兔子内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒     Rabbit Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA试剂盒     

兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒     Rabbit cholest erolester transfer protein,CETP ELISA试剂盒     

兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒     Rabbit soluble adhesion molecules,Sam ELISA试剂盒     

兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒     Rabbit anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA试剂盒     

兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒     Rabbit Progesterone,PROG ELISA试剂盒     

兔子胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒     Rabbit Collagenase Type II ELISA试剂盒    

兔子胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒      Rabbit Collagenase I ELISA试剂盒