甲醛变性电泳检测RNA完整性

一、材料、试剂和仪器

1、材料：植物总RNA 5-10μg

2、试剂：

1）加样运载缓冲液（Loading buffer）

50% 甘油
1mmol/L EDTA （pH 8.0）
0.25%溴酚蓝
25%二甲苯氰FF

2）10×TAE Buffer

3）5×甲醛凝胶电泳缓冲液：

0.1mol/L MOPs （pH7.0）
40mmol/L乙酸钠
5mmol/L DETA（pH8.0）

4）甲醛，甲酰胺

3、仪器：电泳装置，紫外透射观测仪

二、实验程序

1、甲醛变性的琼脂糖（Agarose） 凝胶的配制

在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose （Sigama），再加20mL 10×TAE Buffer，144mLDEPC处理过的双蒸水，微波炉中化胶，待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛，放置一段时间以减少甲醛蒸汽。

2、RNA的甲醛变性电泳

1） 样品制备
加入无菌离心管中混合，95℃水浴变性2min（或55℃，15min），取出后放入冰中冷却。

RNA总量10μg
5×甲醛凝胶电泳缓冲液4μl
甲醛 3.5μl
甲酰胺10μl

2） 加入2μl无菌的DEPC处理的加样运载液。（使用加样运载液的目的有三： 增大样品密度，以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，便于加样操作；能明确显现样品在电泳胶上的泳动位置。以 0.5 X TBE作电泳液时，溴苯酚在琼脂糖中的泳动速率与长 300 bp 的双链线状DNA相同，而二甲苯氰FF 的泳动速率与长4kb 的双链线状DNA相同。）

3）将胶板浸没在1×甲醛凝胶电泳缓冲液中，点样前5V/cm预跑5min。点样后3-4V/cm电泳。

4）电泳结束后（溴苯酚蓝迁移到约8cm处），紫外灯下观察， 照相。

人磷脂酰丝氨酸(PS)ELISA试剂盒 Human phosphatidylserine,PS ELISA试剂盒
人胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA试剂盒 Human choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA试剂盒
人总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒  Human Total bile acide,TBA ELISA试剂盒
人载脂蛋白C3(Apo C3)ELISA试剂盒 Human Apolipoprotein C3,Apo C3 ELISA试剂盒
人胆固醇(CH)ELISA试剂盒 Human cholesterol,CH ELISA试剂盒
人金属硫蛋白2(MT2)ELISA试剂盒 Human Metallothionein 2,MT2 ELISA试剂盒
人可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)ELISA试剂盒 Human Soluble Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,sLOX-1 ELISA试剂盒
人3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒 Human 3-Nitrotyrosine,3-NT ELISA试剂盒
人糖胺聚糖(GAG)ELISA试剂盒 Human glycosaminoglycan,GAG ELISA试剂盒
人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA试剂盒 Human cysteinyl leukotrienes,CysLTs ELISA试剂盒
人钙腔蛋白(CALU)ELISA试剂盒 Human calumenin,CALU ELISA试剂盒
人载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA试剂盒  Human apoprotein A5,apo-A5 ELISA试剂盒
人维生素D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒 Human Vitamin D-binding protein,DBP ELISA试剂盒
人硒蛋白1(SEP1)ELISA试剂盒 Human selenoprotein 1,SEP1 ELISA试剂盒
人血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试剂盒 human serum amyloid A3,SAA3 ELISA试剂盒
人鸟苷酸结合蛋白4(Gbp4)ELISA试剂盒 human guanylate nucleotide binding protein 4,Gbp4 ELISA试剂盒
人细胞色素b561(cytb561)ELISA试剂盒 Human lipocalin 2,LCN2 ELISA试剂盒
人脂质运载蛋白2(LCN2)ELISA试剂盒 Human lipocalin 2,LCN2 ELISA试剂盒
人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(aFABP)ELISA试剂盒 Human adipocyte fatty acid-binding protein,a-FABP ELISA试剂盒
人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA试剂盒 Human Glypican-3,GPC-3 ELISA试剂盒
人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA试剂盒 Human Glucose transporter 3,GLUT3 ELISA试剂盒
人视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒 Human Retinol binding protein,RBP ELISA试剂盒
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒 Human hydroxylysine,Hyl ELISA试剂盒
人羟赖氨酸(Hyl)ELISA试剂盒 Human hydroxylysine,Hyl ELISA试剂盒
人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA试剂盒  Human GTPase activating protein,GAP ELISA试剂盒
人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒  Human Apolipoprotein H,apo-H ELISA试剂盒
人糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA试剂盒  Human glycophosphatidylinositol,GPI ELISA试剂盒
人美洲商陆素(PWM)ELISA试剂盒  Human pokeweed mitogen,PWM ELISA试剂盒
人脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒 Human Lipopolysaccharides,LPS ELISA试剂盒
人preptin ELISA试剂盒 Human preptin ELISA试剂盒
人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒 Human peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA试剂盒
人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 Human Apolipoprotein E,Apo-E ELISA试剂盒
人成骨生长肽(OGP)ELISA试剂盒  Human Osteogenic Growth Peptide,OGP ELISA试剂盒
人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒  Human osteoclast differentiation factor,ODF ELISA试剂盒
人羟基胶原吡啶交联(OH-PYD)ELISA试剂盒  Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks,OH-PYD ELISA试剂盒
人脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒 Human Deoxypyridinoline crosslinks,DPD ELISA试剂盒
人胶原吡啶交联(PYD)ELISA试剂盒  Human Pyridinoline crosslinks,PYD ELISA试剂盒
人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA试剂盒  Human Staphylococal protein A,SPA ELISA试剂盒
人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒  Human concanavalin A,ConA ELISA试剂盒
人游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒  Human Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISA试剂盒
人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒  Human lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA试剂盒
人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒  Human Glutathione peroxidase,GSH-Px ELISA试剂盒
人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒  Human glutathione,GSH ELISA试剂盒
人17-酮类固醇(17-KS)ELISA试剂盒  Human 17-ketosteroids,17-KS ELISA试剂盒
人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 Human 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA试剂盒
人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒  Human Cathepsin K,cath-K ELISA试剂盒
人骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒 Human bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA试剂盒
人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒 Human Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA试剂盒
人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)ELISA试剂盒 Human proteolipid protein,PLP ELISA试剂盒
人垂草扁桃酸(VMA) ELISA试剂盒 Human vanillylmandelic acid,VMA ELISA试剂盒
人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA试剂盒 Human glucokinase regulatory protein,GKRP ELISA试剂盒
人血凝素(HA)ELISA试剂盒 Human hemagglutinin,HA ELISA试剂盒
人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒 Human adipose differentiation-related protein,ADRP ELISA试剂盒
人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒 Human Caldesmon,CALD ELISA试剂盒
人钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒 Human calcineurin,CaN ELISA试剂盒
人骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒 Human CTX-2 ELISA试剂盒
人钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒 Human Calretinin,CR ELISA试剂盒
人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒 Human Bone Morphogenetic Protein 6,BMP-6 ELISA试剂盒
人脂肪酸结合蛋白(FABP)ELISA试剂盒  Human fatty acid-binding protein,FABP ELISA试剂盒
人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒  Human ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1 ELISA试剂盒
人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒 Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA试剂盒
人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒 Human Glucose transporter 1,GLUT1 ELISA试剂盒
人低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISA试剂盒
人花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒 Human Arachidonic Acid,AA ELISA试剂盒
人骨涎蛋白(BSP)ELISA试剂盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA试剂盒
人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒 Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA试剂盒
人环磷酰胺(CTX)ELISA试剂盒 Human Cyclophosphamide,CTX ELISA试剂盒
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA试剂盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA试剂盒
人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨(1,5-AG)ELISA试剂盒 Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISA试剂盒
人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒 Human Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA试剂盒
人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)ELISA试剂盒 Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA试剂盒
人N端中段骨钙素(N-MID-OT)ELISA试剂盒 Human N-MID Osteocalcin,N-MID-OT ELISA试剂盒
人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒 Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,LRP-6 ELISA试剂盒
人极低密度脂蛋白受体(VLDLR)ELISA试剂盒 Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA试剂盒
人低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒 Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA试剂盒
人高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒 Human High density lipoprotein,HDL ELISA试剂盒
人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒 Human α-glutathione S-transferases,α-GST ELISA试剂盒
人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒 Human Homocysteic acid,Hcy ELISA试剂盒