日本大阪府立成人病中心的研究发现，吸烟、嗜酒的癌症患者在10年内患上其他癌症的风险可达戒烟酒癌症患者的3倍。因此，癌症患者更要注意戒烟，并尽量戒酒。研究人员调查了1985年至2007年在该中心确诊的1904名癌症患者的情况，发现如果他们每天吸20支以上的香烟，那么患上肺癌、食道癌、口腔癌、胰腺癌等其他与吸烟相关癌症的风险是戒烟酒癌症患者的1.8倍。而随着每天吸烟数量减少到20支以下，其上述风险则是戒烟酒癌症患者的1.5倍。研究还显示，如果癌症患者每天饮用200毫升以上的日本清酒，其患上其他与吸烟相关癌症的风险是戒烟酒患者的2.4倍。但如果癌症患者每天饮用不到200毫升的日本清酒，则患其他癌症的风险不会提升。如果癌症患者每天既吸20支以上的香烟，又喝200毫升以上的日本清酒，那么其患上其他所有癌症的风险则高达戒烟酒癌症患者的3倍。领导研究的田渊贵大指出，与吸烟相关的癌症约占全部癌症种类的半数，且很多都难以治疗。癌症患者如不想因再次患癌而痛苦，就应该严格戒烟，同时应该戒酒或尽量少喝酒。

支气管成纤维细胞 ATCC-0104  支气管成纤维细胞                    产品编号：ATCC-0104产品名称：支气管成纤维细胞产品规格：5 × 105 细胞数/1ml产品简介：人支气管成纤维细胞主要功能：（1）         成纤维细胞是结缔组织中最常见的一种细胞。（2）         可在支气管创伤后修复组织。人支气管成纤维细胞与主要病生理变化：                  支气管外伤。ATCC人支气管成纤维细胞的基本特性：（1）        组织来源于正常人支气管组织。（2）        鉴定：Fibronectin免疫荧光染色。（3）        原代细胞培养末期液氮冻存。（4）        每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。（5）        Fibronectin免疫荧光染色验证。（6）        不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。ATCC人支气管成纤维细胞的其它：（1）        推荐培养基：ATCC。编号：MED-0004和SUP-0004 。（2）        产地：美国。（3）        品牌：ATCC。（4）        储存：液氮。（5）        运输：干冰。（6）        用途：只可用于科研。  

Nature：大型研究的数据共享陷入困境Eric Dishman在大学时（1989年）被检出患有某种罕见的肾脏癌症，当时医生曾告诉他只有两三年可活。这么多年来，他已经接受了很多不同的治疗，这些治疗都没有很好的效果。然后他开始怀疑，自己可能并不是得了肾脏癌症，而有可能是其他病症。五年前，他请研究机构测序了自己的全基因组，并将数据寄给了肿瘤学专家。后来他才知道自己不仅得了肾脏癌症，同时还得了另外一种癌症。然后他成功地接受了治疗，现在他已经让肿瘤君滚蛋了。他称自己是精准医学成功的早期案例。Eric Dishman现在领导着因特尔的健康、生命科学分部。而且他还是美国国立卫生研究院支持的研究一个小组的一员，这个研究小组的进行的研究被给予了2.15亿美元用来在未来收集医学数据。这些数据包括来自一百万人群的生理学指标、健康记录以及基因组，这个小组试图通过分析多样的数据来理解基因、环境和生活方式是如何影响疾病和治疗效果的。在未来几个月，这个课题组将公布自己的研究计划。很多观察家都很期待这个研究计划，因为他们都想知道：研究任何会不会和患者（或参与者）共享收集到的数据？包括Eric Dishman在内的一些人希望患者也能得到自己的个人数据，这样就可以让他们自己去研究自己的数据。然而，也有人不同意，因为他们认为让患者知道自己的数据是不负责任的，而且这些数据的分析和注解都非常困难，数据的意义也还不明确。同时，在人体基因组存在的大量突变其实对于疾病患病率的贡献很小，如果患者知道自己的基因组的突变数据，可能他们会采取不必要的治疗措施。而且实际上大多数并没有多少科研背景，他们很可能即使拿到这些数据也不会做任何事情。而有的国家似乎非常担忧患者得知个人数据，因此他们会决定哪些数据可以与患者共享哪些则不能。美国国立卫生院和总统奥巴马在今年一月份宣布开始Precision Medicine Initiative（PMI）项目，他们希望参与者能够更加积极地参与到科研中去。因为这个项目涉及到很大量的数据样本，在课题正式开始之前，研究人员们会尝试一些小的类似的课题。Eric Dishman认为，参与研究的人应该可以选择自己接受多少自己的个人数据。因为考虑到不同的人有不同的受教育程度，对待数据的处理、解释能力也不同，再加上文化、背景等差异，关于数据共享方面，应该需要有灵活的措施。随着数据共享政策的决定，未来对于数据，用于临床等方面的数据分析可能比直接的数据研究更加昂贵。而且研究组也没有确定要不要给参与者中的死者的家属关于死者的个人数据。以前的惯例是，不会给参与者提供原始的数据，因为这些数据可能没有完整的结构，也难得到有用的结论。2007年，那时候在英国成立的“生物银行”（BioBank）收集了50万人的健康数据和基因组信息，而且成立之初的策略就是数据不公开，不共享。然而，现在时代变了。人们倾向于更加透明的数据共享。科学家直接收集数据、分析数据并拒绝分享给患者的时代已经过去了，更加开放的数据共享模式急需深入讨论

Tim Chico，英国谢菲尔德大学，顾问心脏病专家“文章存在一定的缺陷，但是我同意，为了降低心脏病风险，我们需要关注我们吃的是什么，而不是吃多少。地中海饮食确实对心脏病的预防有好处，我也是这么推荐给我的患者的。但是我并不推荐昂贵的ω-3不饱和脂肪酸这样的药丸。虽然现在我们并不清楚最健康的饮食结构是怎样的，但是我们已经非常清楚，超量的碳水化合物的确会带来很多健康问题，肥胖就是其中之一。所以，计算卡路里摄入还是很重要的。”

大隐静脉平滑肌细胞      ATCC-0109 大隐静脉平滑肌细胞                                  产品编号： ATCC-0109产品名称：大隐静脉平滑肌细胞产品规格：5 × 105 细胞数/1ml产品简介：人大隐静脉平滑肌细胞主要功能：（1）          血管平滑肌细胞的生长潜力是原发血管病发的重要异常因素。（2）          表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应，并与血管疾病的进展和稳定有关。人大隐静脉平滑肌细胞与主要病生理变化：（1）          大隐静脉曲张。（2）          大隐静脉炎。 ATCC人大隐静脉平滑肌细胞的基本特性：（1）          组织来源于正常人大隐静脉血管组织。（2）          鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。（3）          原代细胞培养末期液氮冻存。（4）          每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。（5）          肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。（6）          不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 ATCC人大隐静脉平滑肌细胞的其它：（1）         推荐培养基： ATCC。编号：MED-0003和SUP-0003 。（2）         产地：美国。（3）         品牌： ATCC。（4）         储存：液氮。（5）         运输：干冰。（6）         用途：只可用于科研。

成人真皮成纤维细胞 ATCC-0069  成人真皮成纤维细胞                                       产品编号：ATCC-0069产品名称：成人真皮成纤维细胞，Adult Dermal Fibroblasts产品规格：5 × 105 细胞数/1ml产品简介：人成人真皮成纤维细胞主要功能：（1）       体外易于培养。（2）       成纤维细胞能分泌一种非刚性细胞外基质，其中含有I型和III型胶原质。（3）       真皮纤维细胞在炎症刺激下还能分泌大量透明质酸。在创伤愈合过程中，真皮成纤维细胞从迁移、再生表型转变为可收缩、基质聚集表型。   人成人真皮成纤维细胞与主要病生理变化：（1）       皮肤2度烧伤。（2）       皮肤冻伤。（3）       皮炎。 ATCC人成人真皮成纤维细胞的基本特性：（1）       组织来源于正常人成人真皮组织。（2）       鉴定：纺锤丝形态和Fibronectin免疫荧光染色。（3）       原代细胞培养末期液氮冻存。（4）       每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。（5）       纺锤丝形态和Fibronectin免疫荧光染色验证。（6）       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 ATCC人成人真皮成纤维细胞的其它：（1）       推荐培养基：ATCC。编号：MED-0004和SUP-0004 。（2）       产地：美国。（3）       品牌：ATCC。（4）       储存：液氮。（5）       运输：干冰。（6）       用途：只可用于科研。

Nat Med：感染多种HIV-1突变体菌株的个体或临床预后较差发表在国际杂志Nature Medicine上的一篇研究论文中，来自美国华特瑞陆军研究院的研究人员通过研究表示，相比感染单一HIV-1菌株的患者而言，感染多种HIV-1突变体的患者或预后表现较差。文章中，研究者对来自泰国的两项重要的HIV疫苗试验—HVTN 502和RV144中大量的样本进行分析，以此来评估是否原始的HIV-1病毒群体的遗传特性会影响患者临床预后的标志物。随后研究者检测了样本中的病毒载量以及CD4 T细胞的计数情况；研究者指出，所有的研究都收集了个体诊断为HIV-1一年后的研究数据，分析结果显示，含有多种原始病毒毒株的的受试者机体中或许病毒载量水平较高。Morgane Rolland博士指出，我们的研究结果揭示了，病毒和宿主早期相互作用的方式或许对整个疾病进展过程都非常关键；我们利用了两组病毒序列数据检测了HIV多样性和患者疾病进展标志物之间的关联，研究分析包括对63名感染HIV-1 B亚型的患者，以及100名RV144参与者（感染HIV-1 CRF01_AE亚型）进行分析，这些参与者均未进行抗逆转录病毒疗法。当机体感染后对宿主的免疫反应进行研究，研究者或许会观察到两种类型的感染，均一的病毒群体将会以一种分段的方式进行进化，然而两种或更多病毒突变体则会立刻加速进行复杂的病毒进化过程。本文研究为后期研究者们分析HIV的预防干预性措施或许会提供新的思路，其中就包括开发新型分析方法来讲病毒多样性的检测考虑进去。最后研究者说道，本文研究强调了疫苗效能的价值，即使临床试验并没能成功表现出效力，但研究数据或可被用来调查更为重要的问题，比如HIV的发病机制等，这或许会后期研究人员开发更为有效的HIV疫苗提供帮助。

Nat Med：感染多种HIV-1突变体菌株的个体或临床预后较差发表在国际杂志Nature Medicine上的一篇研究论文中，来自美国华特瑞陆军研究院的研究人员通过研究表示，相比感染单一HIV-1菌株的患者而言，感染多种HIV-1突变体的患者或预后表现较差。文章中，研究者对来自泰国的两项重要的HIV疫苗试验—HVTN 502和RV144中大量的样本进行分析，以此来评估是否原始的HIV-1病毒群体的遗传特性会影响患者临床预后的标志物。随后研究者检测了样本中的病毒载量以及CD4 T细胞的计数情况；研究者指出，所有的研究都收集了个体诊断为HIV-1一年后的研究数据，分析结果显示，含有多种原始病毒毒株的的受试者机体中或许病毒载量水平较高。Morgane Rolland博士指出，我们的研究结果揭示了，病毒和宿主早期相互作用的方式或许对整个疾病进展过程都非常关键；我们利用了两组病毒序列数据检测了HIV多样性和患者疾病进展标志物之间的关联，研究分析包括对63名感染HIV-1 B亚型的患者，以及100名RV144参与者（感染HIV-1 CRF01_AE亚型）进行分析，这些参与者均未进行抗逆转录病毒疗法。当机体感染后对宿主的免疫反应进行研究，研究者或许会观察到两种类型的感染，均一的病毒群体将会以一种分段的方式进行进化，然而两种或更多病毒突变体则会立刻加速进行复杂的病毒进化过程。本文研究为后期研究者们分析HIV的预防干预性措施或许会提供新的思路，其中就包括开发新型分析方法来讲病毒多样性的检测考虑进去。最后研究者说道，本文研究强调了疫苗效能的价值，即使临床试验并没能成功表现出效力，但研究数据或可被用来调查更为重要的问题，比如HIV的发病机制等，这或许会后期研究人员开发更为有效的HIV疫苗提供帮助。

Cell：病毒警报阻断癌症近日，国外的研究人员利用人类肿瘤细胞和小鼠实验已经找到一种方法来触发免疫系统的一种“病毒警报”，这可激发癌症患者对免疫治疗药物的反应。一种越来越有前途的癌症研究的焦点，药物是为了解除癌症细胞避免检测和破坏免疫系统的能力。该内容发表在8月27日的Cell《细胞》杂志上，Johns Hopkins领导的研究小组说，他们发现了一个核心基因组与病毒防御预警系统相关，并且对脱甲基药物5-氮胞苷易感，用相关的化学方法通过这一过程改变它们操控的能力被称为脱甲基作用。众所周知肿瘤吸纳细胞基因沉默系统，该系统添加微小的甲基团到基因区，从而关闭受影响的基因功能。这种“表观遗传学”控制通常发生在许多基因中，包括那些包含先前暴露到病毒的残余DNA。当移除这些表观遗传控制的基因时，那么病毒装载的基因序列被激活并触发警报免疫系统，警告病毒已经入侵。“免疫疗法成功的主要障碍是肿瘤阻止免疫系统对癌症的作用，”医学博士Stephen Baylin说，“免疫细胞像一个手无寸铁的军队，它们闲荡，无所事事。然而，某些表观遗传过程，这种病毒防御基因在肿瘤细胞用脱甲基药物可以扭转，使免疫疗法更有效地杀死癌细胞。”这项研究中，研究者对实验室生长的人类卵巢、结肠及皮肤癌细胞系进行研究，结果显示，在所有癌细胞系中，当将细胞暴露于5-氮胞苷中时病毒的防御通路就会开启，一旦通路开启肿瘤细胞就会释放名为干扰素的信号蛋白，进而唤醒免疫系统中的其它抗癌细胞。随后研究人员描绘了病毒防御机制的基因特性，在多个可以获得的肿瘤样本中，研究者就可以利用基因特性来区分高表达和低表达的肿瘤样本，而高表达的肿瘤样本或许会对在不添加5-氮胞苷的情况下会对特定的免疫化疗药物产生反应，而低表达的肿瘤样本则需要表观遗传药物来增强免疫疗法的反应。通过寻找通路表达及免疫化疗药物反应之间的关联，科学家们重点对来自21名黑色素瘤患者机体肿瘤细胞中的病毒防御通路的表达水平进行研究，这些患者均采用免疫疗法进行治疗，结果发现，在对易普利姆玛反应较好的8名患者中有7名患者机体的细胞中均出现了高表达水平的通路，而另外12名病人由于对易普利姆玛反应有效，因此其机体的细胞病毒防御通路的表达水平较低。最后研究者Katherine Chiappinelli指出，利用5-氮胞苷的疗法可以激活肿瘤细胞中的干扰素信号，在进行检查点封锁免疫疗法后，患者机体的免疫细胞就会增加对癌症的抵御能力。研究者提醒在进行临床试验时，需要分析病毒防御通路的警醒策略是否有效，如果这种策略存在治疗潜力，后期研究者或将利用其为基础来开发新型的抗癌疗法。

大鼠视网膜神经节细胞 ATCC-0073  大鼠视网膜神经节细胞                                    产品编号：ATCC-0073产品名称：大鼠视网膜神经节细胞产品规格：5 × 105 细胞数/1ml产品简介：大鼠视网膜神经节细胞主要功能：（1） 视网膜神经节细胞是青光眼性视神经损害的主要细胞。（2） 视神经节细胞是视网膜中唯一将其轴突伸入中枢神经系统的细胞。（3） 许多眼科疾病（青光眼等）可导致视神经节细胞损伤、变性和凋亡，最终引起视功能丧失。大鼠视网膜神经节细胞与主要病生理变化：（1） 青光眼。（2） 视网膜损伤。（3） 视神经病变。ATCC大鼠视网膜神经节细胞的基本特性：（1） 组织来源于正常大鼠眼组织。（2） 鉴定： OX-42 （CD 11b/c）免疫荧光染色。（3） 原代细胞培养末期液氮冻存。（4） 每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。（5） OX-42 （CD 11b/c）免疫荧光染色验证。（6） 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。ATCC大鼠视网膜神经节细胞的其它：（1）  推荐培养基：ATCC。编号：MED-0013和SUP-0013 。（2）  产地：美国。（3）  品牌：ATCC。（4）  储存：液氮。（5）  运输：干冰。（6）  用途：只可用于科研。

大鼠视网膜色素上皮细胞 ATCC-0063  大鼠视网膜色素上皮细胞                                     产品编号：ATCC-0063产品名称：大鼠视网膜色素上皮细胞产品规格：5 × 105 细胞数/1ml产品简介：大鼠视网膜色素上皮细胞主要功能：（1） 视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间。（2） 视网膜色素上皮是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。（3） 视网膜色素上皮参与视黄醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。 大鼠视网膜色素上皮细胞与主要病生理变化：（1） 视网膜色素变性。（2） 视网膜脱落。（3） 视网膜病变。ATCC大鼠视网膜色素上皮细胞的基本特性：（1） 组织来源于正常大鼠眼球组织。（2） 鉴定： Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色验证。（3） 原代细胞培养末期液氮冻存。（4） 每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。（5） Cytokeratin-18, -19和Vimentin免疫荧光染色验证。（6） 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。ATCC大鼠视网膜色素上皮细胞的其它：（1）  推荐培养基：ATCC。编号：MED-0001和SUP-0001 。（2）  产地：美国。（3）  品牌：ATCC。（4）  储存：液氮。（5）  运输：干冰。（6）  用途：只可用于科研。

大鼠淋巴管内皮细胞 ATCC-0064  大鼠淋巴管内皮细胞                                    产品编号：ATCC-0064产品名称：大鼠淋巴管内皮细胞产品规格：5 × 105 细胞数/1ml产品简介：大鼠淋巴管内皮细胞主要功能：（1） 调节体液、蛋白和组织压力平衡。（2） 为免疫系统的重要组成部分。大鼠淋巴管内皮细胞与主要病生理变化：（1） 囊肿型淋巴管瘤。（2） 淋巴管炎。（3） 淋巴结核。ATCC大鼠淋巴管内皮细胞的基本特性：（1） 组织来源于正常大鼠淋巴组织。（2） 鉴定： vWF, Factor VIII, CD31 (P-CAM)（3） 原代细胞培养末期液氮冻存。（4） 每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。（5） vWF/Factor VIII 和CD31 (P-CAM)验证。（6） 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。ATCC大鼠淋巴管内皮细胞的其它：（1）  推荐培养基：ATCC。编号：MED-0002和SUP-0002 。（2）  产地：美国。（3）  品牌：ATCC。（4）  储存：液氮。（5）  运输：干冰。（6）  用途：只可用于科研。

科学家被孟山都收买了？我们来掰扯掰扯学术界与产业界的关系，这个古老的话题似乎在过去的十年里持续升温。这一关系是合法的，但是却往往被过分夸大，并且常常被滥用来为一个不公平的政治迫害进行辩护。昨天在《Nature》上发布的一篇文章探讨了最近对那些支持转基因技术的科学家们的指控。在讨论这篇文章之前，请让我些来介绍一些背景。学术界与产业界之间良性的、富有成效的协作极具潜力。学者们是专家，他们所拥有的知识和资源可以使产业界从中受益。与此同时，简单来说，产业界有资金。他们可以资助研究、实验室以及一些教学项目。学者们总是在微薄薪酬和一个又一个补助金中艰难地生活。比如，科学家们能够给产业界提供一些关于技术潜在作用的建议，而产业又能给科学家们提供资金，在这方面他们是不存在利益冲突的，甚至可以说是包括公众在内的“三赢”。有时候，产业界与科学的利益是一致的。举个例子，在我所熟知的医学领域中，当一个能够治疗顽疾的新药出现时，所有人都希望该疾病的患者能够接触到这个新的治疗方法。这时没有利益冲突，因为所有人的利益都是一致的。当然，面对这些情况时需要慎之又慎，这也正是为什么这样的关系在学术界内得到的极大的关注。这个关系的底线就是产业界更加在乎他们自己利益，这仿佛深深地烙印在了他们的企业文化之中。当对公众的资助不能如愿之后，他们就只能给学术界提供一些有用的意见了，或是通过提供一些专业的幻灯片来支持学者。我认为，在这个灰色地带中并不会发生什么不法的事情，不过是一些可能与完全的学术独立相妥协的相对草率的程序。只要培训下学者们如何处理他们与产业界的关系，这类问题就很好解决。首先，我们需要完全的公开和透明。这是一个基本的准则——任何时间做任何事（任何言论、出版物或是协作）都必须公开潜在的利益冲突。这是现在通行的标准程序。另外，我认为学者们需要知道怎么去培训那些产业界联系人的学术诚信意识，他们还需要知道如何与这些产业界的联系人打交道。我们有可能会时常与那些不知道学术诚信的人打交道，比如销售或公关人员。我们需要让他们认识到重点所在。“不，你并不能为我报告的内容提供有用的建议。”“谢谢，不用了，我将会用我自己的幻灯片。”当然，与产业界的关系也会有发生真正的利益冲突的可能。如果某人从一个公司领了数十万美元的薪酬并且还是这个公司的产品或者其他内容的代言人，那么事实上他既是那个公司的员工也是那个公司的代表，而不应该将自己看作是一个独立的学者。一些公司被发现用尽一切可能的方法染指科学规模——雇人代写白皮书、隐藏一些产业期刊、隐瞒那些有对他们不利结果的研究，甚至花钱雇科学家来做他们的发言人。这些行为需要被曝光和完全公开来制止。这一复杂的现状使得那些对科学发现持反对观点的人开始打所谓的“托儿牌”。一旦有人发表了你不喜欢的观点，那么这个人就一定是该观点相关利益集团派来的“托儿”。这一现象不仅仅发生在产业界，也可能发生在政府部门，甚至是学术界本身。想想那些对全球变暖持否定态度的人的言辞——在这个例子中科学家们的观点反对了产业界，所以他们的攻击者一口咬定他们只是为了得到更多的拨款金。在支持替代疗法的人士看来，大型制药公司总是被认为会请“托儿”。但是治疗慢性莱姆病的医药公司却不玩这一套，因为他们通过提出虚假的疾病来鼓吹长期使用抗生素，所以他们的恶魔就是保险产业。反对注射疫苗的人士对他们所认为的这些大型制药公司和政府的阴谋自然而然非常愤怒。这些指控不断地扩大到了科学传播者身上。作为一个持怀疑态度的人，我的工作就是尽自己最大的努力去理解和解释科学。我站定任何我认为有科学作为支撑的立场。从这个观点来看，我不是一个支持疫苗人士，或是支持全球变暖的人，或是支持转基因人士——我是一个相信科学的人。我既不反对野人的存在也不反对外星人的存在，但是科学并未有证据支持这些拥护者们。但是，怀疑论者总是被排除在产业或是政府的“托儿”之外（因为全部毫无证据）。这使得（在阴谋论狂潮下）整个怀疑行为就像是产业界导演的一场巨大的炒作行为，而没有谁是真正的怀疑论者。让我们来看看近期《Nature》上发表的文章并将它放在更多的背景下来理解。这篇文章论述了对于一些公开表示支持转基因技术的农业科学家关于一则信息自由法案（FOIA）请求的初步结果。这很显然是滥用FOIA从事政治迫害，并寻找一切可以编织成利益冲突的事物。这和反对全球变暖的那些人用钓鱼手法获取气候学研究者们的邮件以寻找他们撒谎的证据的策略很像。最终，他们什么也没有发现，但是他们却浪费了大量的科学家们的时间、精力和资源。反转基因人士从骨子里认为所有为转基因辩护的人都一定是孟山都公司派来的。那就是他们刻在脑子里的言论。可是到目前为止，他们什么也没有发现——没有任何确凿的证据。我的一个朋友Kevin Folta是FOIA请求的一个目标。他直接处于学术界与产业界间单纯的联系中。他的大部分研究和学术活动都是被独立赞助的。他也收到过孟山都和其他公司提供的一些钱，用来报销他做关于转基因技术报告时来回的路费。他从来没有私下拿过任何报酬——他收到的所有钱都用于科学的教育和推广。为了完全的透明度，他彻底公开了这些事情。他没有什么好隐藏的。于他而言，他的研究包含了农业，所以他必须与农民和种子培育者一起工作，这正是他研究的焦点所在。因此他不能躲在实验室来逃避与产业界的联系。他的情况就是我所说的，能够代表学术界与产业界之前单纯的、完全透明的，并且互相受益的关系的完美例子。他们不会告诉他去说什么，也不会控制他的研究，而他也不会私自通过他们来赚取任何利润。尽管事实如此，我们还是做好了准备：那些反对转基因的人群将会利用这些公开的事情来攻击Kevin，说他是孟山都派来的“托儿”。如果他们中的任何人能够理智而公平地对待事实，我将会大为震惊。结论我们要正确地平衡学术自由及诚信与学术研究基金需求。任何提供资金的一方——政府、企业甚至是慈善机构，他们都会尽力染指科学活动以获得回报。学者们也明显意识到了这些问题，并且近几年来他们已经采取了有效的方案来根除真正的冲突，同时利用透明度来缓和显而易见的（却非真实的）冲突。现实往往是复杂的。这也正为那些阴谋论者和那些有反科学动机的人提供了机会，让他们趁乱推销其言论并且迷惑大众。制造恐慌和混乱是容易的，而解释一个复杂而具有细致差别的事实是困难的。因此，他们占据先机。

美国华盛顿动物园再添俩“萌主”养活一个小孩或许需要一大家子，养活两个大熊猫幼崽则需要一个大熊猫妈妈加上一整个动物园管理员。上周六（8月22日），美国华盛顿特区保护生物学研究所的史密森国家动物园的大熊猫妈妈美香（Mei Xiang），在美国东部时间下午5:35和下午10:07，成功分娩了两个大熊猫宝宝。为了让这对大熊猫幼崽健康成长，可是让整个动物园的管理人员们围着他们团团转了。旅美大熊猫美香一次只能照顾一个大熊猫幼崽，就是说大熊猫妈妈一次只能拿起一只幼崽，剩下一只只能留在地上受冻。由于大熊猫幼崽无法调节自身体温，如果不采取措施，幼崽将很难存活。因此，管理人员只好不停交换这两个幼崽。管理人员们将一只幼崽放置在温育箱中，另外一只则跟着大熊猫妈妈。每隔三四个小时，管理人员将大熊猫妈妈照顾的那只幼崽放入温箱，将温箱的幼崽移入大熊猫妈妈的怀抱。在温箱中的那只幼崽处于温暖稳定的环境，同时还给他喂食特殊的食物。有时候，管理人员将一个幼崽放在巢穴的地上，然后美香听到地上幼崽的哭声就会赶过来，放下怀中的宝宝，抱起地下的宝宝，这样管理人员就可以轻松地换下幼崽。有时候是直接从美香怀中换下一个幼崽。虽然管理人员想设法让两只幼崽在妈妈怀抱的时间一致，但是这个任务还是非常困难。因为美香不想被打扰，总是在房子里的一边移动到另一边，让管理员很难换下她怀中的幼崽。在这样的情况下，管理人员也只好不停的尝试和等待。尤其是晚上，美香不肯放下她怀中的宝宝，管理人员没法将温箱中的幼崽换到她的怀中，只好等到天亮再替换。Dajun Wang是美香上一个幼崽的管理人员，他认为，大熊猫不同于其他动物，因为它们的幼崽出生时很小，往往需要母亲更多的精力来照顾。幼崽刚出生的时候，无法自己调节体温，消化系统没有发育好，所以需要母亲特殊的照顾，来存活下去。Wang 认为这是一种动物繁衍的平衡，即出世的宝宝不需要太多的母亲怀孕期间的能量投入，那么出世后就需要更好的照顾。美香一共生出过6个幼崽，遗憾的是其中有两个没有存活下来。到现在，管理人员还不确定这两个幼崽的性别。等到这两个幼崽大些而且更强壮的时候，管理人员可以通过口腔唾液拭子，来检测这两个幼崽的性别和判定他们的父亲。而且，这两个幼崽的父亲可能不是同一只雄性大熊猫。今年的四月份，美香接受了人工授精。这次人工授精的精液来自辉辉（Hui Hui）和天天（Tian Tian）。辉辉来自中国四川卧龙自然保护区，而天天则和美香一个动物园。这两个大熊猫幼崽直到一百天后才会有自己的名字。按照往常的做法，这两个大熊猫幼崽将按照中文起名，用拼音作为英文名。大熊猫所有权归中国所有，但是是租借给美国动物园的。这对幼崽的出生引起了媒体的大量关注，他们无疑是真正的明星。为什么大熊猫会这么招人喜欢呢？——因为萌！萌得无法抵挡！根据一篇题为《得熊猫者得天下》（原文作者和出处已不可考）的网络文章，“‘萌滚滚’靠出卖自己的身体治愈了万千不同肤色人们的心灵。台北幸福指数从全台第八变成今年第二就有熊猫圆圆、圆仔一份功。”国内外更是有不少人高呼“来生愿做胖达君，今生甘为熊猫奴。”大熊猫们受欢迎之程度由此可见一斑。

bone:糖尿病与骨骼健康目前糖尿病了影响近3000万美国人，糖尿病可能会导致严重的并发症，包括心脏病、失明、肾衰竭和下肢截肢。一个鲜为人知但同样严重的并发症是糖尿病对骨骼健康的影响。“临床试验揭示了一个惊人的发现糖尿病患者存在骨折风险，”Liyun Wang说，“骨折可以危及生命，近六分之一的髋部骨折受伤患者会在一年内死亡。”因为非糖尿病人体育锻炼被证明是改善骨属性和减少骨折风险的最佳方法，研究人员决定测试体育锻炼对1型糖尿病的功效。他们的研究结果“1型糖尿病产生的骨骼受损反应”7月13日在线发表《Bone》杂志上。Wang解释说，骨细胞对维护组织质量和机械骨骼的完整性是至关重要的。作为主要的“机械传感”细胞，骨细胞的适应过程在机械在运动中可形成。研究表明，运动性骨形成在轻度糖尿病小鼠中得以维护，与非糖尿病对照组处于相似水平，而运动的积极作用几乎在严重的大鼠糖尿病中是无用的。在细胞水平上，研究人员发现高血糖诱导骨细胞对机械刺激的敏感性并抑制骨细胞分泌的蛋白和信号分子，这使骨骼变得更强壮。“我们的工作表明，当高血糖不严重时糖尿病患者的骨骼可对运动有积极反应，这表明机械干预对轻微症状的糖尿病患者可能有助于改善骨骼健康并减少骨折风险，”王说。“从另一方面说，我们的研究结果强调控制好糖尿病患者血糖，可以使运动维持骨骼健康。”“骨强度下降和脆性骨折的增加是公认的糖尿病并发症之一，“Lenhard说。特拉华大学和克里斯蒂护理中心的合作计划评估这些人类研究成果并扩大研究包括糖尿病、心血管疾病等疾病其它并发症。“美国人口死亡主因是心血管疾病，大多数的糖尿病患者将死于这个疾病。”Lenhard补充道。

小鼠总补体(CH50)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：                                                          96T20U/ml -500 U/ml 使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中总补体(CH50)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠总补体(CH50)水平。用纯化的小鼠总补体(CH50)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抑肽酶（AP），再与HRP标记的总补体(CH50)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的总补体(CH50)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠总补体(CH50)浓度。 试剂盒组成 1   30倍浓缩洗涤液   20ml×1瓶   7   终止液   6ml×1瓶   2   酶标试剂   6ml×1瓶   8   标准品（960U/ml）   0.5ml×1瓶   3   酶标包被板   12孔×8条   9   标准品稀释液   1.5ml×1瓶   4   样品稀释液   6ml×1瓶   10   说明书   1份   5   显色剂A液   6ml×1瓶   11   封板膜   2张     6   显色剂B液   6ml×1/瓶   12   密封袋   1个   标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。480U/ml   5号标准品   150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液   240U/ml   4号标准品   150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液   120U/ml   3号标准品   150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液   60U/ml   2号标准品   150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液   30U/ml   1号标准品   150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液     2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：  计算  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月                            Mouse    CH50 FOR RESEARCH USE ONLY Assay range：20U/ml -500 U/ml                 96 determinationsPurposeFor the quantitative in vitro determination of CH50 concentrations in Mouse serum, cell culture supernates and other biological fluids Principle of the assayThe kit assay Mouse CH50 level in the sample，use Purified Mouse CH50 antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add CH50 to wells, Combined CH50 antibody which With HRP labeled goat anti-Human become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of Mouse CH50 in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Materials provided with the kit1   wash  solution   20ml×1bottle   7   Stopp Solution   6ml×1 bottle   2   HRP-Conjugate reagent   6ml×1 bottle   8   Standard（960U/ml）   0.5ml×1 bottle   3   Microelisa stripplate   12well×8strips   9   Standard diluent   1.5ml×1bottle   4   Sample diluent   6ml×1 bottle   10   Instruction   1   5   Chromogen Solution A   6ml×1 bottle   11   Closure plate membrane   2   6   Chromogen Solution B   6ml×1 bottle   12   Sealed bags   1   Specimen requirements1. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.2. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.Assay procedure1. Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table:480U/ml   5 Standard   150μl Original density Standard+150μl Standard diluent   240U/ml   4 Standard   150μl 5 Standard+150μl Standard diluent   120U/ml   3 Standard   150μl 4 Standard+150μl Standard diluent   60U/ml   2 Standard   150μl 3 Standard +150μl Standard diluent   30U/ml   1 Standard   150μl 2 Standard +150μl Standard diluent   2.add sample：Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold) wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 7.incubate：Operation with 3.8.washing：Operation with 5.9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.Steps descriptionStandard, Sample diluent     Add Standard, Sample diluent, incubate for 30 min at 37℃.     Wash 5 time,Add HRP-Conjugate reagent, incubate for 30 min at 37℃.     Wash 5 times,Add Chromogen Solution A and B, incubate for 30 min at 37℃.     Add Stopp Solution     Read absorbance at 450nm within 15 min     calculate   CalculateTake the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.Important notes1. The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.2. washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.3. add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 min, if the number of sample is much , recommend to use Volley .4. if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.5. Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.6. The substrate evade the light preservation.7. Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.8. All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.9. Do not mix reagents with those from other lots. Storage and validity1．Storage：  2-8℃.2．validity： six months

小鼠肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：                                                          96T1ng/L- 70 ng/L 使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)水平。用纯化的小鼠肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)，再与HRP标记的肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)浓度。 试剂盒组成 1   30倍浓缩洗涤液   20ml×1瓶   7   终止液   6ml×1瓶   2   酶标试剂   6ml×1瓶   8   标准品（120 ng/L）   0.5ml×1瓶   3   酶标包被板   12孔×8条   9   标准品稀释液   1.5ml×1瓶   4   样品稀释液   6ml×1瓶   10   说明书   1份   5   显色剂A液   6ml×1瓶   11   封板膜   2张     6   显色剂B液   6ml×1/瓶   12   密封袋   1个   标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。60ng/L   5号标准品   150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液   30ng/L   4号标准品   150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液   15ng/L   3号标准品   150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液   7.5ng/L   2号标准品   150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液   3.75ng/L   1号标准品   150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液     2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：  计算  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月 

小鼠颗粒酶A(Gzms-A)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：                                                          96T0.7ng/L - 16ng/L 使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中颗粒酶A(Gzms-A)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠颗粒酶A(Gzms-A)水平。用纯化的小鼠颗粒酶A(Gzms-A)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入颗粒酶A(Gzms-A)，再与HRP标记的颗粒酶A(Gzms-A)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的颗粒酶A(Gzms-A)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠颗粒酶A(Gzms-A)浓度。 试剂盒组成 1   30倍浓缩洗涤液   20ml×1瓶   7   终止液   6ml×1瓶   2   酶标试剂   6ml×1瓶   8   标准品（32ng/L）   0.5ml×1瓶   3   酶标包被板   12孔×8条   9   标准品稀释液   1.5ml×1瓶   4   样品稀释液   6ml×1瓶   10   说明书   1份   5   显色剂A液   6ml×1瓶   11   封板膜   2张     6   显色剂B液   6ml×1/瓶   12   密封袋   1个   标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。16ng/L   5号标准品   150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液   8ng/L   4号标准品   150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液   4ng/L   3号标准品   150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液   2ng/L   2号标准品   150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液   1ng/L   1号标准品   150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液     2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：  计算  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月                            Mouse granzymes A(Gzms-A) FOR RESEARCH USE ONLY Assay range：0.7ng/L - 16ng/L                96 determinationsPurposeThis kit allows for the determination of Gzms-A concentrations in Mouse serum, cell culture supernates and other biological fluids Principle of the assayThe kit assay Mouse Gzms-A level in the sample，use Purified Mouse Gzms-A antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add Gzms-A to wells, Combined Gzms-A antibody which With HRP labeled,become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of Mouse Gzms-A in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Materials provided with the kit1   wash  solution   20ml×1bottle   7   Stopp Solution   6ml×1 bottle   2   HRP-Conjugate reagent   6ml×1 bottle   8   Standard（32ng/L）   0.5ml×1 bottle   3   Microelisa stripplate   12well×8strips   9   Standard diluent   1.5ml×1bottle   4   Sample diluent   6ml×1 bottle   10   Instruction   1   5   Chromogen Solution A   6ml×1 bottle   11   Closure plate membrane   2   6   Chromogen Solution B   6ml×1 bottle   12   Sealed bags   1   Specimen requirements1. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.2. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.Assay procedure1. Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table:16ng/L   5 Standard   150μl Original density Standard+150μl Standard diluent   8ng/L   4 Standard   150μl 5 Standard+150μl Standard diluent   4ng/L   3 Standard   150μl 4 Standard+150μl Standard diluent   2ng/L   2 Standard   150μl 3 Standard +150μl Standard diluent   1ng/L   1 Standard   150μl 2 Standard +150μl Standard diluent   2.add sample：Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.4.Configurate liquid: 30-fold(or 20-fold) wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 7.incubate：Operation with 3.8.washing：Operation with 5.9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.Steps descriptionStandard, Sample diluent     Add Standard, Sample diluent, incubate for 30 min at 37℃.     Wash 5 time,Add HRP-Conjugate reagent, incubate for 30 min at 37℃.     Wash 5 times,Add Chromogen Solution A and B, incubate for 30 min at 37℃.     Add Stopp Solution     Read absorbance at 450nm within 15 min     calculate   CalculateTake the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.Important notes1. The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.2. washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.3. add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 min, if the number of sample is much , recommend to use Volley .4. if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.5. Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.6. The substrate evade the light preservation.7. Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.8. All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.9. Do not mix reagents with those from other lots. Storage and validity1．Storage：  2-8℃.2．validity： six months   

Oncogene：microRNA让乳腺癌化疗效果更好来自美国的华人科学家发现基因毒性治疗方法能够显著增加三阴性乳腺癌细胞中miR-181a的表达，miR-181a进而增强三阴性乳腺癌细胞存活，并在阿霉素处理条件下增强癌细胞的转移能力。同时，miR-181a的高水平表达还与乳腺癌病人进行化疗治疗后的无病生存率和整体生存率低下有密切关系。 这表明化疗药物治疗情况下三阴性乳腺癌细胞产生治疗抗性其中一个重要原因是miR-181a的表达上调，因此miR-181a可能是一个重要的靶向位点，对于解决化疗药物抵抗，提高癌症治疗效果具有重要意义。

 PNAS：TLR4--乳腺癌中的"双面人"来自美国德克萨斯MD安德森癌症中心的研究人员发现抑制免疫受体蛋白TLR4可能并不适用于治疗所有癌，TLR4在乳腺癌中既可促进癌细胞生长也可抑制癌细胞生长，而这种看似矛盾的作用则主要取决于TP53发生的突变类型。 研究人员发现TLR4要发挥促肿瘤生长功能还需要依赖TP53的活性，在一些TP53为野生型的乳腺癌细胞中，TLR4并不能发挥癌基因功能，与之相反，它可以作为生长抑制因子发挥作用，如果在这种情况下抑制TLR4会变得非常危险，这会促进肿瘤细胞的生长。 这项研究对于进一步了解TLR4的癌基因作用发挥，合理使用靶向药物具有重要指导意义。 

小鼠伴侣蛋白10(CPN10)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T6pg/ml-160pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中伴侣蛋白10(CPN10)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠伴侣蛋白10(CPN10)水平。用纯化的小鼠伴侣蛋白10(CPN10)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入伴侣蛋白10(CPN10)，再与HRP 标记的伴侣蛋白10(CPN10)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的伴侣蛋白10(CPN10)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠伴侣蛋白10(CPN10)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（320pg/ml） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160pg/ml 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液80pg/ml 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液40pg/ml 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液20pg/ml 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液10pg/ml 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

高校“贫富差距”巨大 清华年支出超百亿“这篇文章如此火爆是我们没想到的。”今年8月，按照教育部的要求，教育部部属高校陆续公布了2014年度经费的预决算情况。某国内网站针对这些数字进行了一个排行，发现高校的贫富分化“有点大”——清华大学、浙江大学、北京大学和上海交通大学的年度经费超百亿元，遥遥领先于其他高校；在年度收入上，四校均超过了80亿元，而其他高校大部分在50亿元以下，甚至有过半高校年度收入不超过20亿元；而在支出方面，四校均超过70亿元，清华甚至超过百亿元，其他大部分高校的年度支出依然在20亿元以下。当他们将这一分析文章公布后，立刻引起了公众的普遍关注。各大网站纷纷转载，公众的关注程度甚至让文章发布者自己都有些吃惊。于是，在与记者的交谈中，他说出了本文开头的那句话。事实上，在高等教育领域，高校收入、支出差距大并不是一个新话题，但似乎每次出现类似新闻，公众的关注热度都不低。公众到底在关注什么？如果我们假设发生了一些新的情况，公众还会如此关注吗？猜想一 如果去年年底公布此次公众对于部属高校“贫富差距”的关注，很容易让人联想起在去年年底，一则“教育部要取消‘985工程’和‘211工程’”的传言所引起的公众对两大工程高校和非两大工程高校科研经费差距巨大的关注。一个是“重点”和“非重点”之间的经费鸿沟，一个是部属高校内部到“贫富差距”，如果我们将新近发生的这一事件“前移”至去年年底，公众就会发现，原来“收入鸿沟”与是否“重点”关系不大。事实上，近年来，对于高校间“贫富差距”过大的呼声屡有出现，尤其是每年全国两会的时候，总会有类似的声音从媒体中传出。但有意思的是，对于这种声音，很多“圈内人”其实并不是很赞同。浙江科技学院院长叶高翔既是一所地方高校的掌门人，也曾担任过“985工程”高校的校领导，这样的经历让他对这一问题很有感触。在接受《中国科学报》记者采访时，他直言，不同高校间的“贫富”不可能一样，因为“学校的目标不同、百姓的期望不同，产出的贡献也不同。”“我们无法回避一个事实，那就是高校其实是不一样的，不同高校承担的任务和使命不同，获取资源的能力也不同。从国家的角度看，集中资金办好几所最有希望的大学，这是合理的发展战略。”叶高翔说。其实早在去年年底，媒体热炒两大工程高校和非两大工程高校科研经费差别时，就有学者曾指出，“两大工程高校”拿到更多的科研经费是一件很正常的事情，因为他们承担着国内高校大部分的科研工作，一味地强调收入不均，其实并不利于高校整体的科研工作。“其实什么叫‘富’，什么叫‘贫’，从单纯的预决算数字上是看不出来的。”采访中，北京师范大学教授、首都教育经济研究院学校财务管理研究所所长袁连生表示，从经费角度看，学校间的差距主要体现在生均经费方面。“如果两所学校专业相同、学生质量和科研产出相当，但两者的生均经费差距很大，那么我们可以说这两所学校的贫富差距是有问题的。否则，两所学校是难以比较的。”“我们难道可以把清华和一所职业院校放在一起比较吗？”袁连生说。从专家的角度看，似乎公众对于所谓高校“贫富差距”的质疑并没有理论依据，但与此同时，我们不得不面对的一个事实是——高校收入的贫富不均似乎是大家普遍认定的一个事实，难道只是公众错了？猜想二 如果计算“高校绩效”在高等教育领域，“高投入”是不是就一定代表着“高产出”？对于这一问题，至少北京某教育研究机构研究员晓陶（化名）给出了否定的答案：“一个最明显的例子就是一些中东产油国家的大学。这些大学每年投入巨大，但在各个世界大学质量排名中，都不见它们的影子。”他说。因此，评判一所高校的“穷富”，也就有了一个比单纯看投入、支出资金数更加合理的方式，那就是它的投入产出比，也就是“绩效”。“很多人都在抱怨政府给予北大、清华的投入过多，但一些投入相对不大的高校，其资金的投入产出比可能还不及北大、清华，那么究竟是谁浪费了钱呢？”晓陶说。早在2009年，中央教育科学研究所就发布了一份《中国高等学校绩效评价报告》。报告对教育部直属的72所高校中的69所进行的绩效评估显示：近半数高校3年间呈现出“高投入低产出”的特点，仅有29所高校呈现出“产出大于投入”的较高效益。不过值得注意的是，这份报告从公布之日起就一直争议不断，很多人都对其科学性表示了怀疑，而这其实也是通过所谓“绩效”来评价高校的困难之处。“如果从一个大的范畴来看，我们当然可以对一所学校，乃至整个高等教育的‘绩效’作出一个感性的评价，比如一般人都认为中国高等教育的‘绩效’不高，因为几十年来高等教育没有培养出杰出人才，没有产生重大的原创性研究成果。但是，如果以客观指标对某一学校作具体评判的话，我们就会发现，难以找到适当的指标来进行衡量，因为高校不比企业，是不能完全以货币尺度来衡量绩效的。”袁连生说。事实上，目前在教育领域中，对所谓“绩效”也的确没有一个公认的指标，其原因也十分简单——教育是长效机制，有些现在的投入甚至要十年之后才能看出效果，而且其产出很多是不能用货币来衡量的。“其实在某些领域，我们是可以通过计算投入产出来衡量高校资金的使用情况的，比如某些科研领域，但如果从整体上看，如何制定标准的确是一个需要面对的问题。”采访中，某高校教师如是说。猜想三 如果拨款制度更加透明公众对于高校间“贫富差距”的不满，在很大程度上就是对国家层面上投入不均的不满。通俗一点说，就是“为什么有的高校给的多，有的高校给的少？”在这个问题上，有关部门似乎的确应该作出解释。早在去年年底，当公众热议“985工程”和“211工程”的存废问题时，晓陶就曾在媒体上发表文章指出，目前中国高校的拨款体制依然是政府主导的计划拨款体制，它能够为中国高校发展提供一块垫脚石，却不能保证在中国产生世界一流高校。从加快政府治理体系现代化的角度看，财政经费使用需要公开透明，高校通过公开竞争的方式获得财政经费也属必要，广泛的社会参与和监督更必不可少，完全依靠行政手段、长官意志，封闭运行，难免有寻租空间，加剧分化和不公。对此，叶高翔也表示，除了一些特殊领域和需求之外，国家应该制定更透明的财政拨款制度；政府一般性投入应该有规则，比实效，促竞争。“不仅要让大家知道‘985工程’‘211工程’投入是多少，更要让大家理解如此投入的原因，把原因说清楚，大家就不会有非议了。”持相同观点的还有袁连生。“政府对学校的拨款应该是透明的，尤其是与学生人数有关的项目，应该有一个生均拨款的公式，且这个公式应是公开的，但在这方面我们还没有做到。”他说，科研项目和其他项目就更不透明，“不管是一般的运行经费的投入，还是项目经费的投入都不透明，这方面业界的诟病很大。”在2012年的全国两会上，全国人大代表、湘潭大学原校长罗和安曾提出建议，希望能够建立高等教育财政拨款的公共查询系统，允许高等学校和社会各界自由查询财政拨款的分配结果、使用进度、使用结果等。国家也应综合考虑学校规模、层次、地域、专业、学科、绩效等因素，研究制定具体的拨款公式。基本支出预算的计算实行统一公式，项目支出预算的分配体现竞争性，均在同一层面上公开进行。可以想见，如果罗和安的意见可以实施，公众对于“为什么有的高校给的多，有的高校给的少”的疑问也许就能得到回答。但问题是，这样的意见何时会实施呢？猜想四 如果是在国外在收入支出方面，国内高校与国外高校有何区别？以武汉大学公布的《2014年度部门决算公开信息》为例。在此份信息中，武汉大学2014年获得财政拨款收入25.8亿元，占该校当年总收入的49.8%；而获得的捐赠收入4069万元，占总收入的不到1%。对比国外，美国教育援助委员会在2014年统计了前一年度美国获得社会捐赠最多的前10所高校。其中，斯坦福大学获得社会捐赠达9.32亿美元。而根据美国国家教育统计中心2011年的数据，美国私立高校的教育总经费达1687亿美元，其中近30%的经费都要依靠社会捐款。假设一下：如果清华等四校获得的超百亿元的年度经费中，有相当部分是校友和社会组织捐赠所得，公众的质疑还会如此之大吗？一个不容忽视的问题是，国内高校在资金获得渠道方面，依然十分单一，主要的手段无外乎财政性教育投入和学费收入，而包括捐赠在内的其他手段所发挥的作用微乎其微。“不可否认，一些发达国家的社会捐赠制度要比我国成熟得多，而且国内大部分高校目前的校友及社会资源积累也不及国外丰富，社会共识及国情也不同。这就必然导致国内高校想要达到国外高校如此高比例的捐赠收入，还有很长的路要走，但这肯定是一条值得我们尝试的路子。”叶高翔说。最近一段时期，晓陶正在从事一项关于抗战时期教育状况的研究项目。在研究中，他发现了一个很有意思的现象——抗战期间，得到政府经费投入最多的大学是国立中央大学，其经费相当于组建西南联大的三所学校的总和。在教授总数和学生数量等各方面，中央大学也要强于国内各高校。但如今，中央大学在历史上的影响力要远低于获得投入不及它的西南联大，这是为何？“我觉得一个重要因素就是大学与行政权力的远近，大学离行政权力越近，对其发展就越不利。因此，离行政权力更远的西南联大反而有了发展空间。”他说。过多地依靠政府投入，高校自然和行政权力难以保持足够的距离。如果高校可以通过多渠道筹资，取得更加独立的地位，是否也会出现第二所“西南联大”呢？不患寡而患不“均”就在全国人大代表、湘潭大学原校长罗和安在全国两会上提出建立高等教育财政拨款公共查询系统的2012年，中国的教育投入终于达到了GDP的4%。而3年后的今天，新实行的《预算法》已经正式删除了以前预算审查和执行中涉及法定支出的规定，其中包括不再提教育财政性投入要占GDP的4%“惯例”。对此，有人担忧取消“法定支出”红线后，教育支出占比会降低。中国教育会“差钱”吗？就在今年的全国两会上，教育部门证实，去年全国有1000亿元教育预算其实是没有花完的。因此，在某种意义上说，中国教育并不像很多人认为的那么“差钱”，而之所以在大部分人的印象中，教育投入始终不足，其实有更深层次的因素，那就是国内教育财政投入的不合理。虽然在采访中，教育学者并不认同公众眼中的“贫富差距”，但一个不容否定的事实是，我们的大量教育投入并没有用在刀刃上。至于证据，大家可以搜索一下历年爆出的高校形象工程，以及资金被挪用挤占的事例。事实上，这也是公众对于高校所谓“贫富差距”问题如此敏感的深层次原因——我不信任你！那么，相关方该如何赢回这种信任呢？《论语·季氏》中有句名言——不患寡而患不均，不患贫而患不安。这句话讲的是治国之道，但用在目前的教育投入上其实也是合适的。随着我国经济实力的提升，每年的教育经费其实是处在一个上涨趋势中。因此，过分强调所谓4%的固定比例其实意义不大，反倒是当我们已经拥有了一定数量的教育投入后，如何将其合理地分配要更加重要一些。在此背景下，“均”的概念就显出其价值来了。当然，这里的“均”并不是搞“平均主义”，将所有教育财政经费均分，而是将经费放置在一个公平的平台上，在统一的制度保证下作合理的分配，高校结合自身实力和在国家教育大格局下的地位，作平等竞争，至于最终获得多少，有凭有据。而如果真的如此的话，各校间所谓的“贫富差距”也就变得没有意义了。但要做到这点并不容易。首先，正如采访中专家所言，政府的财政投入政策必须透明，同时，整体拨款方式也不能再以行政为主导，毕竟“一家之言”难以客观公正地衡量整个教育系统的资金需求情况，而建立一套多方参与的拨款协商制度也许是一条不错的出路。总之，这份或许不应该被如此“重视”的榜单提醒着人们，与其关注我们有多少钱，不如多关注一下，我们该如何分配这笔钱。

Nature Communications：新方法可治疗老年痴呆阿尔茨海默氏症会影响中枢神经系统，淀粉样蛋白块的形成进而导致慢性炎症，最终导致神经损伤。针对这种病症的很多免疫抑制类药物都失败了，还没有很好的方法能够治疗这种疾病。之前的研究已经发现，当将免疫细胞朝向中枢神经系统引导时，这些症状会减轻，在动物模型中这个现象已经得到了验证。也就是说自身免疫系统能够被用来缓解阿尔茨海默氏症带来的症状。但是具体如何引导免疫系统，如何利用自身细胞来消化这些淀粉样蛋白颗粒，一直都是一个难题。以色列魏茨曼科学研究所的科学家们在最近一期《Nature Communications》上发表的一项研究，阐述了一种新方法可能可以治疗阿尔茨海默氏症。他们的这项研究显示，通过以在调控身体免疫系统中起重要作用的特定免疫细胞(调控性T-细胞)为治疗目标，阿尔茨海默氏症的关键症状在小鼠身上可以得到缓解。在这篇研究论文中，Michal Schwartz及同事发现，阻断特定Foxp3+调控的T-细胞(被称为Foxp3+ Tregs)的活性，可以使更多免疫细胞朝着小鼠的脑部区域移动。通过使用Foxp3+调控的T-细胞缺陷的小鼠模型，或者使用药物抑制Foxp3+调控的T-细胞的活性，都发现了，在小鼠中，淀粉样蛋白颗粒逐渐消失。同时，研究人员还观察到，小鼠的炎症反应也减少了，实验中小鼠在认知试验的测试中表现相对于没有抑制Foxp3+调控的T-细胞的情况有了好转。他们还发现，短暂性Foxp3+调控的T-细胞缺陷的小鼠中，免疫细胞运输到中枢神经系统的选择性通路受到了影响，这可能进一步解释了免疫细胞朝着中枢神经系统转移的现象。以色列科学家的这项研究显示了，通过调控性T-细胞活性，能够影响免疫细胞在不同组织器官的转移，进而可能会大脑的神经系统相关疾病的进程。此外，这个研究还证明了，Foxp3+调控的T-细胞是未来治疗阿尔茨海默氏症的可能药物目标，通过抑制这种细胞的活性可能会给阿尔兹海默症的药物研发提供新的希望。

小鼠Ⅰ型胶原C端肽（CTX-Ⅰ）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T0.7 nmol/L -28 nmol/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中Ⅰ型胶原C 端肽（CTX-Ⅰ）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠Ⅰ型胶原C 端肽（CTX-Ⅰ）水平。用纯化的小鼠Ⅰ型胶原C 端肽（CTX-Ⅰ）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Ⅰ型胶原C 端肽（CTX-Ⅰ），再与HRP 标记的Ⅰ型胶原C 端肽（CTX-Ⅰ）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅰ型胶原C 端肽（CTX-Ⅰ）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠Ⅰ型胶原C 端肽（CTX-Ⅰ）浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（48 nmol/L） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。24 nmol/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液12 nmol/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液6 nmol/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液3 nmol/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液1.5 nmol/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

Natue系列综述：线粒体蛋白酶在人类健康衰老和疾病中的新作用近日，来自西班牙的科学家Carlos López-Otín在国际学术期刊发表了一篇综述性文章，就线粒体蛋白酶在人类健康，衰老和疾病中的新作用进行了总结讨论。作者在文中指出，最近一些关于线粒体生物学的研究发现调节线粒体功能的蛋白水解酶存在高度多样性和复杂性。科学家们将线粒体蛋白酶根据其功能和细胞内定位进行了归类，将人类基因组编码的人类线粒体降解组定义为一个完整的线粒体蛋白酶组。虽然线粒体蛋白酶在执行蛋白降解功能方面存在非特异性，但其催化的蛋白质水解反应对于线粒体功能，完整性和平衡具有重要作用，其中包括蛋白质合成，蛋白质量控制，线粒体生成和动态变化，线粒体自噬和细胞凋亡。线粒体蛋白酶发生损伤或功能失调与衰老以及多种病理过程如神经退行性紊乱，代谢综合征和癌症具有密切联系。对线粒体蛋白水解及其调节过程有一个更好的了解能够促进对人类寿命和健康状态的研究。

甘氨酸，简单逆转衰老相关线粒体缺陷衰老过程可以延迟甚至逆转？日本筑波大学的Jun-Ichi Hayash教授领导的研究团队最近发现至少在人类细胞系中确有如此可能。他们还确认了两种特殊的，能够调节最小和结构最简单的氨基酸—甘氨酸生成的基因部分参与了衰老的过程。这篇研究发表在最近的Scientific Reports上。在许多物种（包括人类）中，线粒体功能异常是衰老的标志之一。这种理论来源于线粒体在细胞中扮演的能源站角色，它通过细胞呼吸过程产生的能量，为细胞供能。线粒体DNA损伤会使线粒体DNA改变或者突变。而这些变化的积累与寿命的降低和早发性衰老（例如体重减轻，脱发和骨质疏松症等）相关。然而，与这种理论的相矛盾的证据却越来越多。Jun-Ichi Hayash团队进行了一些令人信服的研究并得出结论——年龄相关的线粒体缺陷并不是由线粒体DNA突变的积累导致的，而是由另一种形式的基因调控来调节。

细胞凋亡试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用概述细胞凋亡是细胞的基本特征之一，在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。在正常细胞中磷脂酰丝氨酸（PS）分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。此磷脂酰丝氨酸可与Annexin V, 一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白以高度亲和力相结合。凋亡后期死亡的细胞与其它因素死亡的细胞，虽都可与A nnexin V结合，但死亡的细胞其细胞膜通透，也可被碘化丙啶（Propidium Iodide, PI），一种核酸染料染成红色。 如将Annexin V标以荧光素（RPE、FITC等)作为荧光探针，结合PI, 利用荧光显微镜或流式细胞仪检测，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。试剂盒组成及试剂配制 1. Annexin V-FITC：保存在Tris-HCl (20mM), NaCl(50mM) 缓冲液中，含1mg/ml BSA和0.09% NaN3。2. Binding Buffer：Hepes(10 mM) /NaOH (pH 7.4), NaCl (140 mM), CaCl2(2.5 mM). 经0.2μm孔径过滤器除菌。 2–8℃保存。3. Propidium Iodida(PI)：50 ug/ml 溶于PBS (pH7.4)中。操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。1. 悬浮细胞离心（350g, 3 min）收集；贴壁细胞用不含EDTA的胰酶消化收集（胰酶消化时间不易过长，以防引起假阳性）；2. 用PBS洗涤细胞二次（350g, 3 min），计数细胞，每样0.1ml 含1~5×105细胞；3. 用400μL Binding Buffer悬浮细胞；4. 加入5μL Annexin V-FITC, 混匀，加入5 μL Propidium Iodide，混匀；5. 室温避光反应10 min；6. 荧光显微镜下观察或用流式细胞仪检测。A 荧光显微镜 观察1. 悬浮细胞染色后，滴一滴细胞悬液于载玻片上，用盖玻片盖上细胞，荧光显微镜下观察。2. 贴壁细胞可以象悬浮细胞那样染色后， 滴一滴细胞悬液于载玻片上，用盖玻片盖上细胞，荧光显微镜下观察。贴壁细胞也可以先在盖玻片上培养（根据盖玻片大小，置于24孔或12孔细胞培养板内），然后诱导细胞凋亡。 染色细胞在细胞培养板内进行。先用PBS冲洗两次，加入400μl Binding Buffer于孔中。再加入5μl Annexin V-FITC与5μl Propidium Iodide，混  匀。避光室温反应10分钟。3. 将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察Annexin V-FITC绿色荧光信号和PI红色荧光信号。B 流式细胞仪分析用流式细胞仪检测，Annexin V-FITC用绿色荧光FITC通道（FL1）检测；PI用红色荧光通道（FL2或FL3）检测，一般选用FL3。注意事项1. 避光保存及使用 Annexin V-FITC，Propidium Iodide（PI）。2. Propidium Iodide（PI）有毒。注意个人保护。3. 本试剂盒适用于检测活细胞， 不适用于检测组织样本。4. 处理细胞时要用温和的条件。防止机械损伤细胞及用酶过分消化细胞。储存   4°C保存，保质期一年。

微囊藻毒素(MC)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T30 ng/L -850 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定水样及其它相关样本中微囊藻毒素(MC)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中微囊藻毒素(MC)水平。用纯化的微囊藻毒素(MC)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入微囊藻毒素(MC)，再与HRP 标记的微囊藻毒素(MC)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的微囊藻毒素(MC)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中微囊藻毒素(MC)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（1600 ng/L） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。800 ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液400 ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液200 ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液100 ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液50 ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

Scientific Reports：禁烟可降低死产及新生儿死亡率研究显示在英国自推出禁烟令以来死产率下降了近百分之八，具这项研究估计新生儿死亡的数量也下降了近百分之八。越来越多的证据表明，禁烟法令对婴儿和儿童的健康有好处。爱丁堡大学的研究人员研究了在英格兰1995年和2011年之间出生的超过一千万新生儿。他们的研究结果表明，在禁止在公共场所吸烟的法律颁布后的前四年中，避免了近1500个死胎和新生儿死亡的发生。该小组还评估了吸烟禁令对低出生体重婴儿数量的影响，低体重初生儿与晚年健康并发症包括心脏病和糖尿病有关。据研究人员估计有超过五千名婴儿出生时是低出生体重儿，体重低于2.5公斤。怀孕期间吸烟或有吸烟史，对胎儿的健康有长期的负面影响，包括会增加糖尿病和心脏病的风险。研究人员之前发现早产率大幅下降的国家都建立了无烟立法。自禁令颁布以来大量因哮喘发作住院以及有严重呼吸道感染疾病的儿童都有所下降。这是第一个研究表明无烟立法有助于减少婴儿产前和产后死亡的风险。这项研究发表在《Scientific Reports》杂志上。 Jasper Been博士说：“目前，世界只有大约18%的人口有全面无烟法律的保护。许多国家加速行动实施禁烟令，这样做可能会拯救相当多的年轻的生命，为我们未出生的孩子提供一个更健康的未来。”Aziz Sheikh教授表示：“这项研究进一步表明，无烟立法可避免吸烟和接触二手烟草烟雾对健康带来的毁灭性后果，它具有保护现在和未来几代人的潜在力量。”

Porcine epidemic diarrhea virus(PEDV)ELISA KitFOR RESEARCH USE ONLY. Not for clinical diagnosis useCATALOG #:11256INTRODUCTION? This kit allows for the determination of PEDV concentrations in Porcine serum? Detection of species: Porcine? Detection medium: serum, cell culture supernates.PRINCIPLE OF TESTThe kit assay PEDV level in the sample，use Purified PEDV antibody to coat microtiter platewells, make solid-phase antibody, then add PEDV to wells, Combined With PEDV, after washingand removing non-combinative antibody and other components ,then Combined PEDV antibodywhich with HRP labeled become antibody – antigen - enzyme- antibody complex, after washingCompletely, Add TMB substrate solution,, TMB substrate becomes blue color At HRPenzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the colorchange is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. Compared with theCUTOFF value, according to this to judge PEDV exist in the sample or not.IDEXX Laboratories, Inc.One IDEXX DriveWestbrook, Maine 04092United StatesCOMPOSITION OF THE KITReagent Quantitywash solution 20ml×1bottleHRP-Conjugate reagen 6ml×1 bottleMicroelisa stripplate 12well×8stripsSample Diluent 1×6ml bottleChromogen Solution A 1×6ml bottleChromogen Solution B 1×6ml bottleStop Solution 1×6ml bottlePositive control 0.5ml×1 bottleNegative control 0.5ml×1 bottleClosure plate membrane 2Sealed bag 1Instruction 1STORAGE CONDITIONS? The unopened kit shall be stored at [2-8 ℃] .? For opened kit can be stored at [2-8 ℃] for up to 1 month. If not be used recently,the standard should be kept in -20 ℃.WASHING METHOD? Manually washing method: shake away the remained liquid in the enzymeplates; place some bibulous papers on the test-bed, and flap the plates on theupside down strongly. Inject at least 0.35ml after-dilution washing solution into thewell, and marinate 1~2 minutes. Repeat this process according to yourrequirements.? Automatic washing method: if there is automatic washing machine, it shouldonly be used in the test when you are quite familiar with its function andperformance.IDEXX Laboratories, Inc.One IDEXX DriveWestbrook, Maine 04092United StatesSAMPLE PREPARATION1. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature,and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can bekept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.2. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.ASSAY PROCEDUREStep 1: Number: to sample correspond microtitration well and Number Sequence, each plateshould be set feminine comparison 2 wells, masculine comparison 2 wells, blank comparison 1well(don’t add sample and HRP-Conjugate reagent to blank comparison well, other each stepthe operation are same).Step 2: add sample：separately add Positive control and Negative control 50μl to the Positiveand Negative well . add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl.add sample to the bottom of ELISA plates coated well , don’t touch the well wall as far as possible,and Gently mix.Step 3: Incubate: Cover with the adhesive strip provided, incubate for 30 min at 37℃.Step 4: Configurate liquid: Dilute wash solution 30-fold (or 20-fold) with distilledwater.Step 5: Washing: Uncover the adhesive strip, discard liquid, Pipette washing buffer toevery well, still for 30s then drain, repeat 5 times.Step 6: Add enzyme: Pipette HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blankwell.Step 7: Incubate: Operation with 3.Step 8: Washing: Operation with 5.Step 9: Color: Pipette Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to eachwell, avoid the light preservation for 15 min at 37℃Step 10: Stop the reaction: Pipette Stop Solution 50μl to each well, Stop the reaction(the blue change to yellow).IDEXX Laboratories, Inc.One IDEXX DriveWestbrook, Maine 04092United StatesStep 11: Calculate: take blank well as zero, Read absorbance at 450nm after PipetteingStop Solution within 15min.CALCULATION OF RESULTTest validity: the average of Positive control well≥1.00; the average of Negative control well≤0.10.Calculate Critical(CUT OFF) : Critical= the average of Negative control well + 0.15.Negative control: sample ODPositive control: ample OD≥ Calculate Critical(CUT OFF) is PEDV Positive control.EXPIRATIONSix months [see label on the outer box for the specific date].ATTENTION? The kit takes out from the refrigeration should be balanced 15-30 minutes in theroom temperature, if the coated ELISA plates have not been used up after opening,the plate should be stored in sealed bag.? washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolvewhen dilute . Washing does not affect the result.? Pipette sample with pipettors each step, and proofread its accuracy frequently toavoid the experimental error. Pipette sample within 5 min, if the number of sampleis big, recommend using multichannel pipettor.? The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard, when usedual-wavelength to assay, Reference wavelength is 630nm.? Adhesive Strip only limits the disposable use to avoid cross-contamination.? The substrate should evade the light to be preserved.IDEXX Laboratories, Inc.One IDEXX DriveWestbrook, Maine 04092United States? Please refer to the user instruction strictly, the test result determination must takethe microtiter plate reader as a standard.? The preparation of samples and all the reagents should refer to infective materialprocess.? Do not mix reagents with those from other lots.