食品中双乙酸钠的测定（GB5009.277-2016）

食品中双乙酸钠的测定（GB5009.277-2016）

双乙酸钠，分子式为C4H7NaO4，又称二乙酸钠、双醋酸钠，商品名为Vita-crop（维他可乐波）是一种性质稳定、价格低廉的新型食品饲料防霉剂、酸味剂和改良剂，被美国食品和药品管理局定为安全物质，具有高效防霉、防腐、保鲜，提高适口性，增加营养价值，助生长等功效，现广泛应用于畜禽饲料。

双乙酸钠结构式

双乙酸钠水解产物为乙酸，属于极性化合物，《GB 5009.277-2016 食品中双乙酸钠的测定方法》使用纯水相作为流动相检测乙酸含量。

因此，我们选择了两款可以耐100%水相的反相色谱柱，CAPCELL PAK C18 AQ和CAPCELL PAK ADME HR，分别对乙酸标准品和馒头样品进行分析，均能得到良好的分离结果。

CAPCELL PAK C18 AQ

图1 乙酸标准品在CAPCELL PAK C18 AQ 上的分析色谱图

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S3;4.6mm i.d.×250mm

流动相：1.5g/L 磷酸氢二铵（pH3.0）

流  速：1.0 mL / min

温 度：25°C

检 测：PDA 214 nm

进样量：20 µL

浓 度：0.05mg/mL

我们用上述方法，对馒头样品进行分析时，发现基质较为复杂，有疏水性物质无法洗脱，影响后续样品检测。

因此，我们在9-14min加入50%乙腈对样品进行洗脱，馒头样品中乙酸峰与其前后相邻杂质分离度分别为2.94、1.98，均可达到基线分离，结果如图2所示。

图2 馒头样品在CAPCELL PAK C18 AQ 上的分析色谱图

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S3;4.6mm i.d.×250mm

流动相：A：1.5g/L 磷酸氢二铵（pH3.0）    B：乙腈

B% 0%（0min）-〉0%（8min）-〉50%（9min）-〉50%（14min）-〉0%（14.1min）-〉0%（25min）

流 速：1.0 mL / min

温 度：25°C

检 测：PDA 214 nm

进样量：20 µL

样品配置：准确称取2g馒头样品至100mL烧杯中，加水8mL，加入1mol/L磷酸溶液200uL，混匀，经超声浸提10min后，用磷酸调pH至3左右，转移至20mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。15000r/min离心10min，取上清液，过0.22um滤膜，即得。

CAPCELL PAK ADME-HR

为了给用户提供更多的选择，我们尝试了键合立体结构金刚烷基的CAPCELL PAK ADME HR色谱柱，将柱温调节至35℃，也能得到良好的分离结果。

图3 馒头样品在CAPCELL PAK ADME HR 上的分析色谱图

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK ADME HR S5;4.6mm i.d.×250mm

流动相：A：1.5g/L 磷酸氢二铵（pH3.0）    B：乙腈

B% 0%（0min）-〉0%（8min）-〉50%（9min）-〉50%（14min）-〉0%（14.1min）-〉0%（25min）

流  速：1.0 mL / min

温  度：35°C

检  测：PDA 214 nm

进样量：20 µL

样品配置：准确称取2g馒头样品至100mL烧杯中，加水8mL，加入1mol/L磷酸溶液200uL，混匀，经超声浸提10min后，用磷酸调pH至3左右，转移至20mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。15000r/min离心10min，取上清液，过0.22um滤膜，即得。