肌酸与肌酸酐的分析

肌酸与肌酸酐的分析

客户提供肌酸、肌酸酐样品，希望实验室帮忙实现二者的良好分离与保留。

由于肌酸和肌酸酐极性较强，我们首先尝试在酸性条件下（0.05%磷酸），使用高表面极性色谱柱CAPCELL PAK C₁₈ AQ S3与CAPCELL PAK ADME S5两款色谱柱，分别对二者混合样品进行分析，结果如图1所示，肌酸的保留时间分别为2.30 和3.12 min，保留较弱。

图1 肌酸、肌酸酐混合溶液分析色谱图（0.05%磷酸溶液）

*注：峰上标数字为保留时间。

为增强保留，尝试在中性条件下，以200 mmol/L高氯酸钠溶液为流动相对肌酸和肌酸酐进行分析，结果如图2所示。使用AQ S3色谱柱进行分析时，肌酸、肌酸酐的保留时间分别为3.36 min、5.23 min。使用ADME S5色谱柱进行分析时，肌酸、肌酸酐的保留时间分别为3.48 min、6.29 min。ADME 色谱柱较AQ S3 色谱柱整体保留较强。

图2 肌酸、肌酸酐混合溶液分析色谱图（200 mmol/L高氯酸钠溶液）

*注：峰上标数字为保留时间。

进一步将200 mmol/L高氯酸钠溶液的pH调至酸性（pH=2.74），以ADME S5色谱柱对肌酸、肌酸酐混合样品进行分析，结果如图3所示。肌酸、肌酸酐保留时间分别延长至4.45、5.07，二者间分离度为3.12，达到基线分离。

图3 肌酸、肌酸酐混合溶液分析色谱图（200 mmol/L高氯酸钠溶液、pH 2.74）

*注：峰上标数字由下至上依次为分离度与保留时间。

综上所述，使用键合金刚烷基的高表面极性色谱柱CAPCELL PAK ADME S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm，对肌酸和肌酸酐进行分析，可得到较好保留与充分分离，在200 mmol/L高氯酸钠溶液（pH2.74）条件下，肌酸、肌酸酐保留时间分别延长至4.45min、5.07min，且能得到基线分离。

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