特色方案｜中药材薏苡仁中10种真菌毒素的测定

薏苡仁是一种具有营养和药用价值的农产品，但经常受到真菌毒素的污染，这些毒素对人类健康构成潜在风险，长期暴露于真菌毒素可能对健康构成威胁。真菌毒素研究中，研究人员发现对于伏马毒素等分析检测，可能存在峰形差，响应低等问题。

岛津Shim-pack GISS metalfree色谱柱，采用peek内衬材质，惰性化处理柱管以及筛板，有效减弱金属敏感物质与不锈钢柱管之间的吸附，从而有效减弱吸附影响，使得得到的峰形更对称。

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一. 实验部分

1.1 实验仪器及耗材

仪器配置:Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统;

色谱柱:Shim-pack GISS-HP C18 [Metal free column](100×2.1 mm，1.9 μm;P/N:227-30922-02);

固相萃取小柱:SHIMSEN Styra HLB 60 mg/3 mL (P/N:380-00855-03); 混标溶液:SHIMSEN 10 种真菌毒素混标溶液(货号:380-03538) SHIMSEN Arc Disc HPTFE 针式过滤器(P/N:380-00341-05);

LC/MS 认证样品瓶 LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);

SHIMSEN Pipet 移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02); SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);

SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。

1.2 分析条件
UHPLC 条件
色谱柱:Shim-pack GISS-HP C18 [Metal free column](100×2.1 mm，1.9 μm;P/N:227-30922-02) 流 速:0.3 mL/min
进样量:5 μL
柱 温:50 °C
流动相: A:0.01%甲酸水溶液 B:乙腈-甲醇(1:1)
梯度洗脱程序如下:

质谱条件

离子化模式:ESI，正负离子同时扫描 

碰撞气:氩气

雾化气:氮气 2.5 L/min
接口温度: 400°C 

加热模块温度:500 °C

扫描模式:多反应监测(MRM)

加热气:空气 3.0 L/min

干燥气:氮气 3.0 L/min

DL 温度:150 °C

各化合物 MRM 参数见下表

1.3 样品前处理

二.结果讨论

一. 混合对照品溶液色谱图

二.标准曲线

将0.2、0.4、1.0、2.0、4.0ng/mL 系列薏苡仁基质混合对照品溶液(以黄曲霉毒素 B1 计)进样分析， 以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制校准曲线，结果见表 4。薏苡仁基质中 10 种真菌毒素线性相关性良好，r 均大于 0.995，准确度在 93.4%~108.9%之间。

三. 回收结果

对薏苡仁空白样品进行高、中、低浓度(以黄曲霉毒素 B1 计，分别为 0.4 ng/g、1.0 ng/g、2.0 ng/g)加 标后，按照上述前处理方法处理后上机，各添加浓度平行 3 份样品考察回收率，结果显示，加标回收率 为 61.3%-97.4%。

结论

本研究建立了中药材薏苡仁中 10 种真菌毒素同时测定的 LS-MS/MS 检测方法。参照 2020 版 《中国药典》通则 2351 中的多种真菌毒素测定法，采用岛津的 SHIMSEN Styra HLB 产品对薏苡仁样品进行净化，Shim-pack GISS-HP C18 [Metal free column]色谱柱进行分离，岛津串联质谱 LCMS-8050 检测分析。对薏苡 仁空白样品进行高、中、低浓度(以黄曲霉毒素 B1 计，分别为 0.4 ng/g、1.0 ng/g、2.0 ng/g)加标后，按照 上述前处理方法处理后上机，各添加浓度平行 3 份样品考察回收率，结果显示，加标回收率为 61.3%-97.4%， 回收率高，满足药典要求。该方法可为中药材中 10 种真菌毒素同时测定提供参考。

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