线性不好？峰型拖尾？乳铁蛋白新标准无忧应对(GB 5009.299-2024)

日前，国家卫健委、市场监督局联合发布了《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》（GB 2760-2024）等47项新标准和6项修改单^[1]。

其中，《食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定发布》(GB 5009.299-2024)^[2]是首个适用于乳制品中牛乳铁蛋白含量的测定的国家标准，并将于2024年8月实施。

在实际样品中乳铁蛋白的测试过程中，往往会存在峰型拖尾、曲线线性不佳、回收率不稳定等问题。针对以上问题点，小编将为您带来SGLC的解决方案，“柱”您一臂之力，无忧应对新标准的方法开发。

文末附解决方案下载及产品试用！

01. 样品前处理

采用SHIMSEN肝素亲和柱(3mg/3mL, PN: 380-00930-02) 进行样品处理。

乳粉样品平行测试5次，加标回收率86%，RSD 1.8% (产品标识浓度62.33mg/100g，加标浓度40mg/100g，实测浓度88.07mg/100g)

实验操作及缓冲液配置请按照产品使用说明进行，参考步骤如下

前处理参考步骤——固态样品

1. 缓冲液尽量现用现配，避免pH变化；

2. 滤膜及样品瓶在使用前，应进行吸附测试，亦可采用高速离心代替过膜，取上清液上机，回收率更佳，推荐使用SHIMSEN低吸附PP材质样品瓶(1.5mL瓶盖垫组合，PN：380-00511 & 380-00503)；

3. 亲和柱尽量不要重复使用 (每次使用后，柱容量都会降低，重复使用可能造成检测结果偏低)；

4. 过柱时建议采用重力流出，保证样品与填料充分反应，回收率更有保障。

02.  分析方法
(梯度优化，兼容大体积进样)

仪器：高效液相色谱仪配置二元梯度泵、自动进样器和紫外检测器

色谱柱：ShimNex WP C4-S(5 μm, 4.6×250 mm, PN: 380-01236-19)

(初次使用时，建议采用标准品溶液连续进样，至响应趋于稳定后，再进行测试)

柱温：25 ℃

检测波长：280 nm

流速：1.0 mL/min

进样量：10 μL

流动相

A：0.1%三氟乙酸水溶液

B：乙腈

标准品色谱图

梯度优化后，浓度: 200 μg/mL

*数据来源：“从此新生”挑战赛23号参赛者

曲线线性

低吸附PP样品瓶，浓度范围0~200μg/mL，R2>0.999

样品重复进样谱图（峰型拖尾）

标准一致梯度，乳粉样品，n=3