SPE部分常见问题及解决方法

固相萃取，简称SPE，是近年发展起来一种样品预处理技术，由液固萃取柱和液相色谱技术相结合发展而来，主要用于样品的分离、纯化和浓缩，与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。广泛应用在医药、食品、环境、商检、化工等领域。

在实验当中，使用SPE的过程中常常会遇到各种各样的问题，如回收率、流速、极性等问题。而具体问题需要具体分析，因为面对不同实验，各个实验室的实验技术、环境及时间都是不一样的，这也导致问题原因也各不相同。

SPE的回收率偏低是最常见的问题，最常见的原因可能就是目标物没有被小柱填料保留，或者目标物没有完全洗脱。

原因1：SPE柱的极性不合适。

解决方法：选择其他低极性或者选择性弱的SPE柱。

原因2：洗脱溶剂不够强，无法将目标物化合物从SPE柱上洗脱。

解决方法：改变洗脱溶剂的pH，以增加其对目标化合物的亲和力。

原因3：洗脱溶剂体积太小。

解决方法：增加溶剂体积。

在同一批SPE产品中，SPE的流速可能会存在快慢不一的情况，而SPE流速过快不利于目标化合物在填料上的保留，也会极大影响溶剂与目标化合物或者填料的相互作用，从而影响保留或者洗脱过程。过慢则会增加实验时间。

原因1：填料量、紧密度等小柱因素会影响流速的快慢。

解决方法：可借助固相萃取装置或者泵流操作架等进行流速控制，流速低于5mL/min时结果较为稳定，部分实验需更慢。流速较慢则可施加外力增速。

原因2：样品存在过多的颗粒，小柱堵塞，导致流速降低。

解决方法：对样品进行过滤或者离心。

原因3：样品溶液粘度太大。

解决方法：可用溶剂对样品进行稀释。

填料存在最大吸附量上限，当超过最大吸附量上限时会造成小柱吸附超载，从而导致目标物流失。同时在未规定SPE规格的情况下，也可根据吸附容量去计算合适的填料规格。

1.硅胶基质：柱容量一般不超过SPE填料质量的5%，例如100mg/mL的C18小柱可以保留5mg的化合物。

2.聚合物基质：柱容量是硅胶基质吸附剂的3倍，一般不超过SPE填料质量的15%，例如100mg/mL的BRP小柱可以保留15mg的化合物。

3.离子交换吸附剂：交换容量为0.25-1mmol/g，1mmol/g表示1g吸附剂能吸附1mmol的一价带电物质。

在使用固相萃取小柱进行样品前处理时，若出现萃取效果重现性差，可能的原因及改进办法如下：

原因1：上样前柱床干涸。

解决办法：重新活化并平衡SPE小柱。

原因2：过柱流速过快。

解决办法：降低流速。

原因3：清洗溶剂洗脱能力太强。

解决办法：先让洗脱液渗入小柱，然后再对小柱进行抽真空或者加压，并控制流速1-2mL/min。

原因4：超出小柱的载样能力。

解决办法：减小载样量，或者换用填料规格更大的SPE小柱。

在使用SPE的过程中，可能会因为小柱、溶剂、实验技术等的选择，导致最终的净化结果达不到预期效果。

原因1：净化模式不适用。

解决办法：可优化净化模式，通常而言采用保留目标化合物的模式会比保留杂质的模式净化效果好，如果正在分析的项目为某一种或某一类化合物分析，可以采用保留目标化合物的净化模式。如果不止一种SPE柱可用于目标化合物的净化时，也可挑选选择性好的吸附剂，一般离子交换>正相>反相。

原因2：淋洗液或者洗脱液不适用。

解决办法：根据实验优化淋洗液或者洗脱液。

原因3：SPE小柱当中存在少量干扰物。

解决办法：对SPE小柱进行合理处理，将SPE柱有效活化。