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保护柱选择和使用指南

月旭

2022/08/15 09:36

阅读:123

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相信小伙伴们都遇到这类情况,遇到基质复杂,比如含油脂类的、蛋白类或者做中药材项目,分析柱很容易出现柱压升高、峰形变差、柱效下降等问题。直接更换分析柱的话成本太高,对色谱柱做异常维护也要花费太多时间,那这种情况,可以加装保护柱,来延缓色谱柱的使用寿命。


# 保护柱有哪些作用呢?

首先,过滤物理污染。HPLC色谱系统长期运行在高压状态,密封垫不可避免会产生细小的物理颗粒,对色谱柱进口处造成永久堵塞。保护柱可以有效阻挡颗粒物对色谱柱的损伤;

其次,延缓化学污染。色谱柱对目标物的分离,主要是化学力的相互作用。随着目标物的复杂程度不同,会对色谱柱有不同强度的吸附。强吸附在柱床上是由进样口处开始随流动相方向缓慢延伸,加在色谱柱前端的保护柱采用和色谱柱完全相同的填料且填装优良,强吸附首先发生在保护柱上,如果定期更换柱芯,色谱柱可以得到极大的保护。

保护柱的工作原理如下:

微信截图_20220815085354.png

保护柱的卡套中放置的是保护柱芯,柱芯内含有填料。这些填料可以拦截样品中的一些强极性、强酸性和强碱性物质,防止它们对色谱柱内填料的污染和损坏。因此使用保护柱,可以对色谱柱进行全方位的保护,是保护色谱柱最佳的方式。

# 怎么选择合适的保护柱呢?

首先,对于大多数分析工作者来说,一支1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是,如果样品非常不清洁,或工作中发现经常要更换1cm的保护柱,那么就应该选用2cm或3cm的保护柱;

其次,大多数人是根据色谱分析柱的填料来选择保护柱的填料,正常情况下可以选择与分析色谱柱一样的色谱填料。

所以选择保护柱的原则是:在满足分离分析要求的前提条件下,尽可能的选择较短的保护柱套,选择与分析柱相同填料的柱芯。

保护柱也有使用寿命的,当柱压升高>10%,柱效下降>10%,以及分离度下降>10%,这些均是提醒我们要维护保护柱。

保护柱的维护方法是:在柱套上做好标记,确认保护柱芯的正反方向;取下保护柱,在不打开卡套的前提下将保护柱反接(注意此时不能接色谱柱),用甲醇:水=20:80以3mL/min流速冲洗10min,然后再用纯甲醇以3mL/min流速冲洗10min。冲洗好后将保护柱正接,打开泵除去保护柱和连接管内的空气,再连接好色谱柱,可以正常使用;如果没有改善,就需要更换保护柱芯了。


微信截图_20220815085402.png

月旭科技目前有独立式保护柱、直连式保护柱、直连式超高压保护柱等,以及对应的保护柱柱芯。产品信息如下:


微信截图_20220815085411.png

直连式UHPLC保护柱柱芯货号

微信截图_20220815085426.png

独立式保护柱柱芯货号

微信截图_20220815085432.png


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