Flash柱的固体上样，如何选择合适的方法

Flash柱已经成为天然产物粗品纯化或者有机合成反应体系纯化时最常用的工具之一。而当各位小伙伴在深入了解了Flash柱的纯化方式后又会发现，样品的上样方式是影响分离效果的重要因素之一。

在Flash色谱中，样品可以通过两种不同的方式上样：固体或液体。液体上样，是将样品溶解在溶剂中后，直接注入Flash柱上。固体上样，是将粗样品与载体材料（如硅胶）的固体均匀混合物放在Flash柱前面。

当样品若单次进样量少且在流动相中易溶解时通常我们会选择液体上样的方法。采用液体上样时主要考虑的因素有：

化合物在初始溶剂中的溶解度：样品需要完全溶解。

溶解溶剂的极性：通常正相柱多采用弱极性溶剂，反相柱采用极性溶剂。

样品溶剂的体积：理想的样品体积不应超过Flash柱体积的10%。

样品量：每根色谱柱都有规定的上样量。理想的样品量不应超过Flash柱的最大上样量。

那么当我们遇到进样的样品量较大的时候，或用于分离具有难以溶解的粘性或多杂质样品，就需要考虑采用固体上样了。固体上样通常通过以下步骤完成：

将粗样品溶解在合适的溶剂中。

然后，将该混合物在超声浴中超声几分钟，以提高溶解度。

过滤混合物以除去尚未完全溶解的物质。

将硅胶以粗样品重量的2-3倍添加到上述混合物中。

溶剂通过旋转蒸发仪完全地减压蒸馏干。

最后，将粗样品和硅胶的混合物装入固体装样器或者空柱管中，然后将其安装在Flash柱的上面。连接溶剂洗脱流路。

待分离的组分不断地从固体装样器中洗脱到实际分离Flash柱中。

固体上样可以有效减轻纯化时拖尾的情况，尤其是在洗脱体系或其他弱极性溶剂中溶解度较小的样品，能够得到较窄的色带和峰形，且上样时平铺均匀，样品色带下降时也会平整。

尽管液体上样简单方便，固体上样相对繁琐一些，但当您遇到样品峰型不理想的时候，固体上样往往能提高柱效以及样品纯度。