月旭Welchrom ProCot G-25 预装柱的使用方法

a.蛋白溶液1（含柠檬酸钠盐）：Protein G 4FF亲和柱纯化IgG蛋白洗脱液。

b.平衡液1（20mM PB，pH7.0）：取100mL 0.2M PB（A液：B液=31:69）加水稀释至1000mL。

A液（0.2M磷酸二氢钠水溶液）：称取NaH₂PO₄・H₂O 27.6g溶于超纯水中，稀释至1L抽滤保存。

B液（0.2M磷酸氢二钠水溶液）：称取Na₂HPO₄・7H₂O 53.6g (或Na₂HPO₄・12H₂O 71.6g或Na₂HPO₄・2H₂O 35.6g ) 加蒸馏水溶解，加水至1L。

c.平衡液2（150mM NaCl，20mM PB，pH7.0）：称取8.766g NaCl，溶解于20mM PB中，调pH至7.0，定容至1L过水相滤膜抽滤。

d.柱清洗液1（0.5M NaOH）：称取20g NaOH加超纯水溶解至1L。

e.柱清洗液2（10%乙腈）：量取100mL经有机滤膜抽滤好的乙腈，加超纯水定容至1L。

f.保存液（20%乙醇）：取200mL无水乙醇加超纯水稀释至1L。

a.平衡：20mM PB（pH7.0）平衡后再用超纯水平衡至基线稳定

b.上样：取1mL样品溶液，通过A1管路上样，流速0.5mL/min，待到检测器显示UV值出峰时开始收集，收集到峰值下降，电导值急剧增加的节点为①号管，而后收集至出峰结束为②号管。

c.柱清洗：用0.5M NaOH进行柱清洗。

d.脱盐效果色谱检测：收集脱盐前后样品进行色谱检测，评价脱盐效果。