高通量全自动斑马鱼胚胎显微注射系统

LSM是世界上第一台真正意义上的高通量全自动斑马鱼显微操作注射仪，它的诞生完全可以满足对于高通量胚胎或细胞的注射需求和解放实验操作人员的双手，让显微注射变得更加简单，快速，精准！

高通量全自动斑马鱼胚胎显微注射与传统技术相比优势：

1. 高通量，2500个胚胎/小时，全自动无需手工注射

2. 可定量的注射，重复性高，方便对比研究

3. 快速检测通常需要3 - 7天，而不是使用其他技术的数周时间

4. 精确全自动3D定位，方便快速，可以实现高效的自动成像（兼容共聚焦显微镜等）

5. 可培养细胞3D球状，使用细胞系或原细胞进行培养

6. 可进行肿瘤微环境研究;球状体可以在预先形成的微晶中引入环境，如与胶原凝胶混合的细胞

7. 可细胞间相互作用的研究，如癌症和免疫细胞，细菌和免疫细胞

斑马鱼胚胎显微注射应用领域：

1. 高通量斑马鱼胚胎注射：将琼脂糖凝胶注入模具形成一个琼脂网格，该网格用于将斑马鱼的胚胎对齐。注射时，根据实验所需样品批量不同，可以选择不同规格的网格，如: 2580 个, 1024 个, 9 x 100 个。 将胚胎放入模具中只需要不到5分钟的时间。我们的机器可以在最接近受精卵和卵黄表面处进行注射，从而保证了注射的质量。

2. 3D细胞培养，细胞球类：首先，胶原蛋白，或另一种水凝胶，被吸进一个多孔板，并被允许设置。然后，从细胞培养或初级组织中制备出一种单细胞悬浮体。这种细胞悬浮体与一种惰性聚合物，PVP混合在一起，并被装入针头。最后，细胞悬浮在预先确定的位置被注入到水凝胶中。一种典型的检测方法是培养3-7天，可以使用标准/共焦显微镜进行病理处理,或为流式细胞多色分析制样。可复制的注入位置允许对相同的位置的所有孔进行成像。球体的大小(~300μ，~10k的细胞）和外生长是可复制的，从而成为活性筛查迁移、增殖等的立项选择。

3. 细胞注射：注射是在精确的位置进行的，因此不同的细胞类型可以被注射到可复制的距离上。这些注射可以在不同的时间进行，以适应不同的生长速度或时间依赖的生物相互作用。许多混合培养分析正在发展中。

斑马鱼胚胎显微注射文献链接：

1. Spaink, H. P., et al. Robotic injection of zebrafish embryos for high-throughput screening in disease models. Methods. 62, 246-254 

2. Veneman, W. J., et al. A zebrafish high throughput screening system used for Staphylococcus epidermidis infection marker discovery. BMC Genomics. 14, 255

3. Meijer, A. H., Spaink, H. P. Host-pathogen interactions made transparent with the zebrafish model.Curr Drug Targets. 12, 1000-1017

4. Pardo-Martin, C., et al. High-throughput in vivo vertebrate screening. Nature Methods. 7, 634-636 

5. Stoop, E. J. M., et al. Zebrafish embryo screen for mycobacterial genes involved in the initiation of granuloma formation reveals a newly identified ESX-1 component. Disease Model., & Mechanisms. 4, 526-536

6. Benard, E. L., et al. Infection of zebrafish embryos with intracellular bacterial pathogens. J Vis Exp.