人乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

本产品仅供科研

更多产品详细信息可免费向客服索取

产品名称：人乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。

2. 引物和探针经过优化，灵敏性高。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，不会跟其他微生物的 DNA 发生交叉反应。

5. 既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5个数量级。

6. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。

7. 本产品只能用于科研。

包装规格及成分（具体信息详见说明书）：

人乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒操作过程：

一、稀释标准曲线样品（以 10E1-10E6 拷贝/μL 这6 个10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA 片段作为阳性对照。

1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2，1。

2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。

3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品待提取，最好设置 N+2 个提取，多出的是PC（样品制备阳性对照）和 NC（样品制备阴性对照）。可以取阳性对照的1000倍稀释液10μL 再加上一定量的水，使总体积与待提取样品的规定体积一致，以此作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼容。

三、设置qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）

如果进行定量分析，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于标准曲线样品。如果做定性分析，则6个标准曲线样品只选一个做（可以选4号，其余样品不变）。以下只介绍定量分析的反应设置。

四、数据处理

1. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的log 值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品核酸浓度的 log 值，再推算出其浓度。

2. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲

线，Ct 值应该小于或等于 39。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于40 则为阴性，如果小于或等于 39 则为阳性。如果在 39-40 之间，

则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 40，则为阳性。

成分	样品管N+2个	RT-PCR阴性对照管	标准曲线样品管 （2-7 管）
探针法qPCR缓冲液	各 10 μL	10 μL	各 10 μL
探针法 qPCR 酶混合液	各 2 μL	2 μL	各 2 μL
qRT-PCR探针	各 1 μL	1 μL	各 1 μL
探针qRT-PCR 引物混合液	各 2 μL	2 μL	各 2 μL
待测样品 RNA 模板	各 5 μL	--	--
超纯水	--	5 μL	--
第 7 步所得标准曲线样品稀释液（2-7 号）	--	--	各5 μL（2号样到2号管，3号样到3 号管…）

1. 盖上盖子后上机，按下面参数进行 qRT-PCR：

过程	温度	时间
逆转录	50℃	30 min
预变性	94℃	10 min
qRT-PCR 反应（40 个循环）	94℃	15 sec
	60℃	1 min（采集 FAM 通道的荧光信号）

保存条件：-20℃

保质期：12个月

人乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒检测方法的局限性

A.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；

B.样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

C.阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

D.病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

E.不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

F.试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；

人乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒注意事项

1操作严格按照说明书进行；

2试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；

3反应液应避光保存；

4反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

人乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒更多相关产品如下

Polyoma Virus(Py)多瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒产 1510600 50次 3990

Baculovirus Penaei(BP)对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 1510500 50次 3990

鹧鸪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 15531 50次 3990

White Spot Syndrome Virus(WSSV)白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 1510400 50次 3990

Theileria sergenti瑟氏泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510390 50次 3990

Theileria orientalis东方泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510380 50次 3990

Theileria lowenshuni吕氏泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510370 50次 3990

Theileria lestoquardi莱氏泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510360 50次 3990

Theileria buffeli水牛泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510350 50次 3990

Theileria parva小泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510340 50次 3990

Theileria mutans突变泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510330 50次 3990

Theileria equi马泰勒梨形虫(原Babesia equi)探针法荧光定量PCR试剂盒 1510320 50次 3990

Theileria uilenbergi尤氏泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510311 50次 3990

Theileria annulata环形泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510310 50次 3990

Theileria spp.泰勒属原虫探针法荧光定量PCR试剂盒 1510300 50次 3990

Hepatitis D Virus(HDV)丁型肝炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 1510200 50次 4490

Haemophilus somnus睡眠嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 1510100 50次 3990

Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒cccDNA 探针法荧光定量PCR试剂盒 1510000 50次 3990

细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus）探针法荧光定量PCR试剂盒 1559010 50T 3990

人偏肺病毒RT-PCR试剂盒 1324900 50T 3990

乌梢蛇PCR试剂盒 1390812 50T 2990

中华绒螯蟹螺原体PCR试剂盒 1311802 50T 2990

人乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 153040013 50T 3990

肺炎支原体染料法荧光定量PCR试剂盒 1474180 50T 2990

马杜拉放线菌(Actinomadura madurae)探针法荧光定量PCR试剂盒 1577700 50T 3990

猪滑液支原体(Mycoplasma hyosynoviae)探针法荧光定量PCR试剂盒 1574131 50T 3990

链状带绦虫(Taenia solium)染料法荧光定量PCR试剂盒 1458820 50T 2990

热带念珠菌(Candida tropicalis)染料法荧光定量PCR试剂盒 1460240 50T 2990

内阿米巴(Entamoeba spp.)PCR试剂盒 1382100 50T 2990

Squirrel monkey retrovirus探针法荧光定量PCR试剂盒 1545667 50T 3990

并殖吸虫（Paragonimus）探针法荧光定量PCR试剂盒 1534457 50T 3990

颚口线虫(Gnathostoma)探针法荧光定量PCR试剂盒 1534456 50T 3990

猪圆环病毒2型和3型双重探针法荧光定量PCR试剂盒 2542540 50T 7980

内阿米巴(Entamoeba spp.)染料法荧光定量PCR试剂盒 1482100 50T 2990

广州管圆线虫（Angiostrongylus cantonensis）染料法荧光定量PCR试剂盒 1464000 50T 2990

棘阿米巴属(Acanthamoeba spp.)染料法荧光定量PCR试剂盒 1462300 50T 2990

Bovine Reovirus 3牛呼肠孤病毒3型Reo-3探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 1541130 50T 4490

  Human HerpesvirusType 6(HHV-6)人疱疹病毒6型探针法qPCR试剂盒(中国药典) 01530260Ch.P 50T 3990

Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒rcDNA探针法荧光定量PCR试剂盒 1537081 50T 3990

百日咳杆菌/白喉杆菌/破伤风杆菌三重探针法荧光定量PCR试剂盒 3528160 50T 11970

人巨细胞病毒（HCMV）探针法荧光定量PCR试剂盒 1567743 50T 3990

Epstein Barr Virus(EBV)EB病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 1560810 50T 4490

人巨细胞病毒（HCMV）探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 1528510 50T 4490

斑点热群立克次体探针法荧光定量PCR试剂盒 15241817 50T 3990

大鼠线粒体DNA探针法荧光定量PCR试剂盒 1541924 50T 3990

 Human Immunodeficiency Virus(HIV)人免疫缺陷病毒1型2型双重探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 1588299 50T 8980

羊泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1420123 50T 2990

RANKL探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 1532632 50T 4490

Runx2探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 1532522 50T 4490

Bacteriovorax spp.蛭弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒 1526321 50T 3990

霉菌探针法荧光定量PCR试剂盒 1558901 50T 3990

Cronobacter spp.克罗诺杆菌（fusA基因）探针法荧光定量PCR试剂盒 1580941 50T 3990

嗜肺巴斯德杆菌PCR试剂盒 1345668 50T 2990