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- 用途:仅用于科研研究实验
本司产品仅用于科研，不用于临床诊断和治疗
小鼠骨骼肌微血管内皮细胞
细胞简介：
小鼠骨骼肌微血管内皮细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的最微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7-9微米，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。最细的微血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的微血管由2-3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的微血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现，不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别，而同是微血管内皮细胞，它们又存在器官和组织的特异性。骨骼肌组织是动物体内含量最多的组织，肌肉组织供血丰富，是研究内皮细胞功能和血管生成的理想靶组织。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
注意事项如下：
（1）无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强对无菌操作的观念，以预防为主，一旦污染，通常难以消除。
（2）培养基：所使用的培养基必须满足细胞存活和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同，对培养基的要求也会有一定差异，必要时可通过预实验选择适宜的培养基。
（3）小牛血清：小牛血清对于维持培养细胞的存活和促进细胞增殖起着至关重要的作用。可以选择多个不同批次的小牛血清进行小样分析。一旦确定了某一厂家某一批次的小牛血清，就应坚持使用至实验结束。
（4）胶原酶溶液：必须新鲜配制，贮存时间过长（即使是低温保存在-20℃），也会影响消化效力，导致消化时间过长，增加细胞损伤。
（5）L-谷氨酰胺：几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的需求，细胞需要谷氨酰胺来合成核酸和蛋白质，缺乏谷氨酰胺会导致细胞生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中不太稳定，在4℃冰箱贮存两周以上时，应重新加入相同量的谷氨酰胺。
（6）静置培养：原代细胞在消化分离后，放置于CO2培养箱的前24～48h（必要时达到72小时）内，应处于绝对静止状态，切忌频繁取出培养瓶观察生长情况，这会使原代分离细胞难以附着于壁面，更谈不上伸展和增殖。
（7）消化时间：通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可，因为此时组织颗粒已松散，稍加吹打即可形成细胞团或单个细胞，过长的消化时间往往导致细胞损伤加重，细胞培养成活率降低。
（8）其他生长因子：经过以上处理，一般原代分离细胞培养都可以成功。对于少数特殊类型的细胞，也可以考虑添加一些特殊的生长因子，例如胰岛素可以促进细胞对葡萄糖和氨基酸的摄取。此外，内毒素、EGF、FGF等也具有促进有丝分裂的作用，但费用较高。
原代细胞培养具体步骤如下：
1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30-60分钟。
4、剪切：用眼科剪把组织切成2-3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。
下列是公司正在出售的产品：
| 人神经型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA试剂盒 | Hoechst33342染色液(含封片剂)小鼠骨骼肌微血管内皮细胞 |
| 人神经细胞粘着分子(NRCAM)ELISA试剂盒 | 抑制剂激活剂 |
| 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 | BAY 11-7082(NF-κB抑制剂) |
| 人神经调节素1亚型HRGβ1(NRG1)ELISA试剂盒 | PD 98,059(MAPKK抑制剂) |
| 人神经调节蛋白4(NRG4)ELISA试剂盒 | p38和p38β2抑制剂(SB 202190) |
| 人神经调节蛋白3(NRG3)ELISA试剂盒 | 缺氧诱导因子-1α抑制剂(HIF-1α)(PX-478) |
| 人神经调节蛋白2(NRG2)ELISA试剂盒 | IDO抑制剂(NLG919) |
| 人神经调节蛋白1(NRG1)ELISA试剂盒 | CHK2抑制剂 |
| 人神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒 | Bcl-XL抑制剂 |
| 人神经肽Nesfatin-1ELISA试剂盒 | BMPI型受体激酶抑制剂 |
| 人神经髓鞘蛋白(p2)ELISA试剂盒 | 鞘氨醇激酶2抑制剂(SK2抑制剂)(ABC294640) |
| 人神经丝蛋白M(NF-M)ELISA试剂盒 | LDHA抑制剂(GNE-140 racemate) |
| 人神经丝蛋白L(NF-L)ELISA试剂盒 | 脱乙酰化酶抑制剂(HDAC抑制剂)(TMP269) |
| 人神经丝蛋白H(NF-H)ELISA试剂盒 | 半胱氨酸蛋白酶抑制剂(MG-101) |
| 人神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒 | TRAIL诱导剂(Akt和ERK活性抑制剂)(TIC10) |
| 人神经生长因子受体(NGFR)ELISA试剂盒 | 脯氨酰羟化酶-2抑制剂(PHD2抑制剂)(IOX2) |
| 人神经生长因子前体(proNGF)ELISA试剂盒 | DNA合成抑制剂(Triciribine) |
| 人神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 | TMEM16A chloride通道抑制剂(Shikonin) |
| 人神经母细胞瘤抗体(NB-Ab)ELISA试剂盒 | P-糖蛋白抑制剂 |
| 人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒 | BMX抑制剂(BMX-IN-1) |
