9N 2.0 DNA连接酶(又名9oN DNA Ligase)能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸末端和3´-羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶来源于极度耐热的海底超嗜热古菌(Thermococcus sp.)9°N 菌株中克隆的连接酶基因,在 45℃-70℃ 范围内均有活性。该酶进一步经基因工程基因突变,使得耐受更高的温度,在95℃孵育5min后活性几乎无损失,因此其适用于:
(1)高温条件下,连接DNA链上的切刻位点
(2)适用LCR反应(Ligase Chain Reaction)
(3)适用MLPA反应(Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification)
活性定义
1单位指 20μl反应体系中,50℃条件下,15分钟内能使50%的1pmol的接头片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。
储存
-20℃可保存两年。