Multiplex PCR又称多重PCR,是指在同一PCR反应体系里加上两对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,已被广泛应用于科学研究和疾病诊断等多个领域,特别适用于微量样本的多位点检测。
RAPA3G Multiplex PCR Mix(多重PCR Mix)使用具有超强扩增性能的热启动RAPA3G DNA聚合酶和优化的多重PCR反应缓冲液,使其可有效扩增20重以上的PCR,具有极高的灵敏度,最大程度上减少了反应体系优化步骤。
特征
RAPA3G DNA聚合酶,超强扩增性能,极高抗杂质能力
完全封闭的热启动特性,50℃以下100%无活性
优化的反应缓冲体系,避免非特异性扩增
高灵敏度,有效扩增0.1ng的人基因组DNA(20重)
储存
长期储存置于-20°C以下,可保存2年,避免反复冻融;短期使用置于4°C(3个月)保存,一经融化后请放置于4°C,勿再冻存。
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2,结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性,而60℃条件下1min内酶活完全释放,恢复100%活性