本制品是采用 SYBR Green 嵌 合 荧 光 法 进 行
Real-Time PCR 的专用试剂,本 SYBR Green qPCR Mix
将化学修饰的热启动 RAPA3G DNA 聚合酶、反应 Buffer、
dNTP、SYBR Green 染料等试剂预混在一起,是一种 2×浓
度的单组分预混试剂。该制品配有单独的 ROX 内参染料,
可用于需要 ROX 进行孔间校正的定量 PCR 仪。
RAPA3G DNA 聚合酶为第三代 DNA 聚合酶,其具有最
高的杂质耐受性(对乙醇、胍盐、肝素具有极高的耐受性),
因此对于纯度较差的 DNA 模板,该 Mix 仍然可以获得理想
的实验结果。RAPA3G DNA 聚合酶为化学法修饰的 HotStart
版本,其在 50℃以下 100%无活性,只有 95℃条件下加热
5min 后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制
非特异性 PCR 扩增,极大的提高了 PCR 扩增特异性。该试
剂盒独特的反应缓冲液,可在宽范围中得到良好的扩增结
果、检测灵敏度更高、信号更强。
主要特征
杂质高耐受性,使用各种gDNA和cDNA,具有最佳的扩增成功率。
高灵敏度,宽范围的动态检测(>7个数量级)。
反应效率在95-110%之间,高准确度和重现性。
扩增程序40min内完成,具有10s扩增1kb的快速能力。
在不同的富含AT和GC目标物上产生更高的荧光检测。
应用
RNA转录产物cDNA、基因组DNA、DNA病毒等相对定量检测。
储存
请避光置于-20℃可保存3年。请避光置于-20℃以下可保存3年。该试剂经30次冻融后性能无下降,因此不使用时请置于-20℃避光保存。
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Fig. 以人Hela Total RNA的反转录产物进行GAPDH基因的定量PCR检测(7个数量级),模板量分别为100ng、10ng、1ng、100pg、10pg、1pg、100fg。结果可见RAPA3G SYBR Green qPCR Mix在7个数量级的动态检测中表现出卓越的扩增性能。R2=0.999;Eff%=101;Error=0.025. |