与Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相比,Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板,该酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性,但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。 在以RNA为模板的LAMP实验中,可实现单酶系统反应。Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶在60-65度之间具有很好的反转录活性,可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录,而Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段无此活性。 | ||
Bst DNA聚合酶性能比较 | ||
主要特征 | ||
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单位定义 | ||
一个活力单位即在65°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。 | ||
应用 | ||
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储存 | ||
-20℃可保存3年。 | ||
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实例 | ||
LAMP实验 | ||
A:以pEasy质粒为模板,应用Bst 3.0 DNA聚合酶和六条引物进行LAMP实验(65℃,30min),1-6分别为:模板0、5ng、2.5ng、1.5ng、1ng、0.5ng,M:DNA Marker2000;B:以140ng human RNA为模板,应用Bst 3.0 DNA聚合酶和六条引物进行LAMP实验(65℃,30min),1-3:140ng human RNA为模板,4:不加模板,M:M:DNA Marker2000; |