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其他参数
血清血浆microRNA提取试剂盒
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1317-25T | 25T | 血清血浆microRNA提取试剂盒 |
P-PR1317-100T | 100T | 血清血浆microRNA提取试剂盒 |
产品介绍:
描述:血清血浆 miRNA 提取试剂盒是目前提取小 RNA(<200nt)操作步骤最简单、重复性最好、小 RNA 产 率最高的方法之一。使用该试剂盒通过一步上柱即可获得高 纯度 miRNA,可在 10min 左右完成小 RNA 的提取;且使用 该试剂盒提取的小 RNA(Small RNA)中,长度在 15~200nt 范围的 RNA 在 95%以上,基本不含有大 RNA 和 DNA,可 直接用于后续的反转录、Northern 杂交、测序等应用。
储存:室温可保存 2 年。
使用防护建议:Serum/Plasma miRNA Reagent 溶液中含有胍盐,其具有强烈的腐蚀性,试验时请务必佩戴防护眼镜、手套、口罩等防护措施,如有皮肤接触请立即用大量清水冲洗,再另行就医。
自备试剂:异丙醇、乙醇、75%异丙醇、2ml EP 管
操作方法:
(1) 向 1.5ml EP 管中加入 800μl Serum/Plasma miRNAReagent。将 300μl 血清或血浆样本加入到上述 800μlmiRNA Reagent A 中,用腕力混匀 30s,室温放置 5min。
(2) 13,000rpm 离心5min,将上清约 1ml 吸入到新的 2ml EP管中。加入 1ml 异丙醇,上下颠倒混合均匀。
(3) 将上述溶液分三次加至吸附柱中(每次约 700μl),13,000rpm 离心 15s,倒掉过柱液。
(4) 向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇洗涤一次,13,000rpm离心 15s,倒掉过滤液。
(5) 向吸附柱中加入 500μl 无水乙醇洗涤一次,13,000rpm离心 15s,倒掉过滤液。
(6) 吸附柱 13,000rpm 空离心 2min,去掉残留的乙醇。
(7) 将吸附柱放入到新 1.5ml EP 管中,室温放置 2min,使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入 30μl RnaseFree H2O,室温静置 2min,13,000rpm 离心 2min,洗脱产物即为提取的 miRNA。
注意事项:
(1) 由于血清血浆中的 miRNA 含量极低,提取的 miRNA 浓度通常在 5 ng/μl 以下,因此难以用常规的 NanoDrop 测量浓度,建议直接使用 10 μl 进行下游反转录。由于本试剂盒提取的是小 RNA,该浓度下的 miRNA Copy 数足以进行下游检测。
(2) 由于血清血浆中 miRNA 的含量低,为了获得更可靠的实验数据,建议使用特异性和灵敏度更好的 TaqMan 探针法进行 miRNA 的下游检测。本试剂盒提取的 miRNA 并不限于其它检测方法和用途,包括 SYBR Green 法检测、二代测序、芯片等检测领域。
(3) 血清血浆 TaqMan miRNA 反转录试剂盒为血清血浆专用,不可用于细胞和组织的 miRNA 检测实验。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
植物叶绿素(chlorophyll)含量试剂盒 | SLAP2抗体 SLAP2 |
大量蛋白样品液相法去内试剂盒 | Toll蛋白相互作用蛋白抗体 Tollip |
大鼠生长调节致癌基因γ(GROγ)elisa检测试剂盒 | 透明质酸及粘蛋白4抗体 HAPLN4 |
细胞内核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)比色法测定试剂盒 | G蛋白偶联受体82抗体 GPCR GPR82 |
细胞过氧化酶活性染色试剂盒 | HERPUD蛋白家族成员2抗体 HERPUD2 |
人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa分析检测试剂盒 | 晚期糖基化终末产物特异性受体抗体 RAGE |
蛋白激酶Cε型抗体 phospho-PKC Epsilon (Ser729) | 平滑肌细胞相关蛋白4抗体 MFSD1 |
蛋白质磷酸酶2调节亚基5D/PP2A-B56-δ抗体 PPP2R5D | 鸟嘌呤核苷酸交换因子RGNEF抗体 RGNEF |
非霍奇金瘤重复蛋白3抗体 NHLRC3 | 小鼠催乳素(PRL)elisa检测试剂盒 |
富含亮氨酸重复蛋白15抗体 LRRC15 | 原钙粘蛋白γA8抗体 PCDHGA8 |
乙醛脱氢酶1型重组兔单抗了抗体 ALDH1A1 | 大鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)elisa分析检测试剂盒 |
磷酸化周期素E2抗体 phospho-Cyclin E2 (Thr396) | 鳞状细胞癌增强蛋白1抗体 GASC1/KDM4C |
总胆固醇(TC)含量测试盒 | PTB结合核蛋白2抗体 RAVER2 |
冰冻切片组织化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗) | 受精卵抑制蛋白1样蛋白抗体 ZAR1L |
PE标记人CD57单克隆抗体 human CD57/PE | 血清血浆microRNA提取试剂盒FITC标记人CD117 (c-kit)单克隆抗体 human CD117 (c-kit)/FITC |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MST4抗体 MST4 | FAM63A蛋白抗体 FAM63A |