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其他参数
虾碱性磷酸酶(SAP)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1390-500U | 500U | 虾碱性磷酸酶(SAP) |
P-PR1390-5000U | 5000U | 虾碱性磷酸酶(SAP) |
产品介绍:
描述:
虾碱性磷酸酶(Shrimp Alkaline Phosphatase,rSAP)催化 DNA 和 RNA 的 5’和 3’磷酸单脂的去磷酸化反应。该磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,可使线性载体去磷酸化,防止自连。虾碱性磷酸酶在65°C温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之后,可以不用去除热敏磷酸酶。基于以上特性,该酶是传统去磷酸化酶--小牛肠碱性磷酸酶(CIP)的绝佳替代物。
应用:
DNA 和 RNA 的去磷酸化防止克隆载体的自连制备 5′末端标记模板
储存:-20℃可保存 2 年。
活性定义:1 单位指在 37°C 条件下,每分钟水解 1umol 的pNPP(p-Nitrophenyl Phosphate)到 pNP 所需要的酶量。
注意事项:
注意:1 pmol 的 5’末端 DNA,相当于 1 μg 的单酶切质粒 (3kb 大小)。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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