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其他参数
Lambda核酸外切酶
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1355-1000U | 1000U | Lambda核酸外切酶 |
P-PR1355-5KU | 5KU | Lambda核酸外切酶 |
产品介绍:
描述:
Lambda 核酸外切酶作用于双链 DNA,沿 5′→3′方向逐步切去 5′单核苷酸。最适底物是 5′磷酸化的双链DNA,也能缓慢降解单链 DNA 和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA 的切刻或缺口处起始消化。
活性定义:1 单位指在 50 μl 反应体系中,37℃条件下,30分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
操作方法:
1.配置反应体系如下:
DNA 2~5 μg
10×Lambda Exo Buffer 5 μl
Lambda Exonuclease 1 μl
ddH2O upto 50 μl
2. 37℃反应 30min 。
3. 75℃ 10min 进行热失活。
注意事项:
(1)1×Lambda Exo Buffer:67 mM Glycine-KOH(pH 9.4@ 25℃),2.5 mM MgCl2,50 μg/ml BSA,37℃温育。
(2)该酶的最佳反应温度为 37°C,75°C 10min 可失活。
(3)5′-0H 端的切割速度比 5′-PO4端慢 20 倍,单链 DNA 比双链 DNA 慢 100 倍。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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低分子蛋白标准样 | 核小体组装蛋白1样蛋白6抗体 NAP1L6 |
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