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其他参数
细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞基本属性
英文名称 | SW620:SW620 | 细胞名称 | |
货号 | P-X984 | 产品分类 | 人细胞系 |
组织来源 | 结直肠腺癌,来自转移淋巴结 | 培养基 | 90%L15+10% FBS+PS |
商品介绍:
细胞名称:SW620人结直肠腺癌细胞
细胞别称:SW-620; SW 620; SW.620;人肠癌细胞
种属来源:人
年龄性别:男;51岁
组织来源:结直肠腺癌,来自转移淋巴结
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
背景简介:SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌,而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp和直肠抗原3阴性;角蛋白阳性;p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代,309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代;细胞p53蛋白表达水平升高;癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性;未检测到癌基因N-myc的表达;不表达Matrilysin(一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶)。有报道称该细胞表达GM-CSF。ras原癌基
生物安全等级:1
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:Carcinoembryonic antigen (CEA) 0.15 ng/10^6 cells/10 days; transforming growth factor alpha; matrilysin. The cells are negative for expression of CSAp (CSAp-) and colon antigen 3, negative. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, Myb, sis and fos oncogenes.
保藏机构:ATCC; CCL-227 ECACC; 87051203 ;中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
培养基:90%L15+10% FBS+PS
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
倍增时间:~20-26 hours
STR鉴定位点Amelogenin:X;CSF1PO:13,14;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:30,30.2;D2S1338:24;D3S1358:15,16;D5S818:13;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:24;TH01:8;TPOX:11;vWA:16;
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
下列是公司正在出售的产品:
黑色素瘤优先表达抗原抗体 Anti-PRAME | 天青素/肝素结合蛋白抗体 Azurocidin |
液泡蛋白分选蛋白41抗体 VPS41 | 髓样细胞核分化抗原抗体 MNDA |
短链脱氢还原酶12抗体 DHRS12 | 细胞三磷酸肌醇(IP3)含量化学荧光定量检测试剂盒 |
α-葡萄糖苷酶C抗体 | 大鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)elisa检测试剂盒 |
FLJ45825蛋白抗体 FLJ45825 | 血小板反应蛋白抗体 THBS1 |
21号染色体开放阅读框7抗体 MAP3K7CL | 5号染色体开放阅读框36抗体 C5orf36 |
GANC | 山羊白介素12(IL-12/P40)elisa检测试剂盒 |
过氧化物酶(POD)测试盒 | 大鼠核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)elisa检测试剂盒 |
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环指蛋白9抗体 | RNF9 |
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