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其他参数
链霉亲和素磁珠
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1060-1ml(10mg/ml) | 1ml(10mg/ml) | 链霉亲和素磁珠 |
产品介绍:
链霉亲和素磁珠是一种高度均匀的超顺磁性微球,表面包覆着高密度的超纯链霉亲和素(>97%)。微球经过专门设计、测试和质量控制,可用于免疫沉淀、细胞分选、快速单步捕获生物素化分子,如 DNA、RNA、抗体或细胞裂解物或杂交反应中的蛋白质等。链霉亲和素(或抗生素多倍体)和生物素之间的相互作用表现出已知的最高非共价相互作用之一。抗生物素、链霉亲和素、单体抗生物素及其类似物已成为探针和亲和配体的有力工具,在生化分析、诊断、亲和纯化和药物传递等领域有着广泛的应用。链霉亲和素是一种四聚体生物素结合蛋白,源于链霉菌亲和素 II,质量为 60000 道尔顿。链霉亲和素不含碳水化合物,pI 较低,非特异性结合程度较低,使链霉亲和素成为许多检测系统的理想试剂选择。
产品特点 :
使用链霉亲和素-生物素结合系统的优点和益处:
·极高的亲和力:链霉亲和素是同源四聚体,具有较高的生物素结合亲和力,具有KD~10−14 米。
·高稳定性:生物素结合复合物具有优异的稳定性,可抵抗极端 pH、温度(2°C 和40°C)、苛刻的有机溶剂、变性剂(如氯化胍)、洗涤剂(如 SDS)和蛋白水解酶。
·突出的选择性和特异性:生物素和链霉亲和素的相互作用具有高度的特异性,确保了较低的非特异性结合。
·高灵敏度:高稳定性和特异性确保了高检测灵敏度。
·非常灵活:生物素的小尺寸和显著稳定性被证明非常适合相对容易地并入各种分子,例如合成聚合物、荧光团、小分子或生物分子中的特定位置,从而对共轭生物分子的结构和功能施加最小的扰动。
链霉亲和素磁性微球的优点:
·快速、简单且一步到位的高通量程序:消除了柱状物或过滤器,或重复费力的移液或 离心(图 1) ·高结合能力 ·表现出较低的非特异性结合 ·可扩展-可轻松调整样本大小和自动化
操作过程:
注: · 该方案是一种通用亲和纯化程序。为了获得最佳结果,每个用户应确定纯化单个目标蛋白的最佳工作条件。
·根据粗样品中目标生物素化分子的数量(基于珠子结合能力),优化每种应用中使用的珠子数量。使用过多的磁珠会导致背景较高,而使用过少的磁珠会导致产量较低。
1. 将最佳量的珠子转移到离心管中。将管放在磁力架上1-3分钟。在管留在分离器上的同时去除上清液。
2. 取下试管,用5倍体积的 1x Binding/Washing Buffer通过涡流清洗珠子30秒。将试管置于室温下1-3分钟。将管放在磁力架上1-3分钟。在管留在分离器上的同时去除上清液。
3. 重复步骤二两次。
向含有目标分子的粗样品中加入洗涤过的珠子,并在室温或所需温度下培养1-2小时(温度越低,培养时间越长)。
注: 强烈建议进行滴定以优化培养时间。更长时间的孵育可能导致更高的背景。
4. 如步骤 2 所述清洗磁珠,直到 280 nm 处洗脱液的吸光度接近背景水平(OD280<0.05)。
注: 添加更高浓度的盐、非离子洗涤剂和还原剂可降低非特异性背景。例如,向洗涤缓冲液中添加NaCl(高达1-1.5 M)、0.1-0.5%的非离子洗涤剂,如Triton X 100或吐温20。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
大鼠褪黑素受体elisa检测试剂盒 | 赖氨酸特异性脱甲基酶4B抗体 KDM4B |
鱼类受精卵细胞冻存试剂盒(低温) | 管内皮透明质酸受体重组兔单克隆抗体 LYVE1 |
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