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其他参数
Western一抗二抗通用稀释液
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1344-100ml | 100ml | Western一抗二抗通用稀释液 |
产品介绍:
描述:
生产的 Western 一抗二抗通用稀释液用于做 Western blot 实验时一抗或者二抗的稀释。用本稀释液稀释的一抗或者二抗使用后,可放在 4℃或者-20℃保存,并且可以反复多次使用,节约您宝贵的抗体。按照每个一抗稀释10ml 计算,该 Western 一抗稀释液可以稀释 10 个或 10 次Western Blot 杂交实验。该制品中不含有抑制荧光显色或HRP 显色的成分。应用:Western blot 实验时一抗或者二抗的稀释
储存:-20℃ 可保存 3 年。开始使用后请于 4℃保存,有效期为 1 年。
操作方法:
1. 进行一抗孵育杂交参考所用的一抗说明书,以及样品中目的蛋白的含量,使用本抗体稀释液按照适当比例稀释一抗,如 1:1000、1:500 等,一抗稀释后即可直接用于 Western blot 实验(室温孵育杂交1h 或 4℃杂交过夜)。实验结束后,可以回收稀释的一抗,4℃或-20℃ 保存,以用于下次的 Western blot 实验。
2. 进行二抗孵育杂交进行完一抗孵育后,TSBT 溶液洗涤膜 1~2 次,同样参考二抗说明书,使用本抗体稀释液,进行二抗的稀释,并进行二抗的孵育杂交(通常二抗杂交时间为室温 30min 即可)。杂交完毕后 TBST 洗涤膜 3~4 次,并进行下游显色。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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