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其他参数
Endotoxin Removing Magnetic Beads(内毒素清除磁珠)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1063-1ml(50mg/ml) | 1ml(50mg/ml) | Endotoxin Removing Magnetic Beads(内毒素清除磁珠) |
产品介绍:
产品介绍: 内毒素清除磁珠是为快速、高效的一步清除被污染样品中的内毒素(由革兰氏阴性 细菌产生的热原)专门设计的,是表面附着有多粘菌素 B 的超顺磁珠。
产品特点:
1.快速简单的一步高通量操作,仅仅向样品中添加磁珠,混匀后通过磁力吸附去除绑定
有内毒素的磁珠。无需吸附柱及滤器,同时也不需重复的移液和离心过程。(Fig.1)
2.蛋白或 DNA 的回收率可达到 95%
3.宽松的 pH 工作范围(pH5 -9)
4.极高的结合能力: 4500-6000E.U./ml
5.磁珠可被回收利用至少 5 次。
实验程序:
提示:将所有试剂和样品平衡至室温,因为温度、pH 值、离子强度会影响磁珠的性能。
所需材料
·Regeneration Buffer: 1% 脱氧胆酸钠
A.操作程序
提示:
·将所有和样品平衡至室温,因为温度、pH 值、离子强度会影响磁珠的性能。
·尽管磁珠在 pH 值 5-9 时均可与 LPS 结合,但为了减少非特异性结合,请将所有缓冲液 pH 值调节至 7-8, NaCl 盐浓度为 0.1-0.5 M(最终浓度)。
·仅使用无内毒素溶液,以防止将任何内毒素引入样品中。
1. 震荡试剂瓶,使磁珠重新悬浮。
2. 吸取所需体积的磁珠转移到新的离心管中。将试管放在磁力分离器上 1-3 分钟。当磁珠完全沉淀时,去除上清液。
3. 从磁力分离器上取下试管,用 5 倍体积的无内毒素 ddH2O 彻底清洗磁珠三次,如步骤 2 所述。
4. 用 10 倍体积的 Regeneration Buffer 重新悬浮磁珠,并在室温下连续旋转孵育 15分钟。
5. 按照步骤 2 所述清洗步骤,用 5 倍体积的无热原适合缓冲液或无内毒素 ddH2O 清洗磁珠三次。
6. 向磁珠中加入适量的蛋白质或 DNA 溶液,并在室温下连续旋转孵育 15 分钟。
7. 将试管放在磁力分离器上 1-3 分钟,直到上清液变澄清。试管保持在磁力分离器上,将上清液移到无内毒素试管中。
B.磁珠再生
1. 按照 A2 所述清洗步骤,用 5 倍体积的 Regeneration Buffer 清洗磁珠三次,以去除任何结合在磁珠上的内毒素。
2. 再按照 A2 所述步骤,用 5 倍体积的无内毒素 ddH2O 清洗磁珠三次。
3.将磁珠储存在 20-25%乙醇中,在 2-8°C 环境保存。
提示:
·磁珠至少可再生使用 5 次,且不会失去活性
·每次使用前,包括首次使用前,必须对磁珠进行再生清洗
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
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