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获取电话人子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞永生化细胞；hEM15A
细 胞 完 全 培 养 基 配 制 ： DMEM/F12(1:1): Ham ＇ s F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50%
Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 15%FBS
冻存液配制：90%FBS，DMSO 10%
培养：气象：空气，95% CO2,5% 温度37 ℃
收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有
污染，请拍照后及时联系我们。
1）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片 一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
2） 悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去 上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。
3）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完 全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
1. 将冻存管置于37℃水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染， 确 保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速， 大约2分钟。 2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用70% 酒精喷拭冻存 管表面。从此步开始，后续操 作须在生物安全柜中完成。
2. . 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用70% 酒精喷拭冻存 管表面。从此步开始，后续操作须在生物 安全柜中完成。 3. 将冻存管中的液体转移到含有5 mL完全培养基的离心管中， 心200×g /5 -10 min，用真空 泵去除含有冻存液的上清。
3. 将冻存管中的液体转移到含有5 mL完全培养基的离心管中， 心200×g /5 -10 min，用真空泵去除含有冻存 液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证 细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预 热后使用
5. 将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养
