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直接胆红素(DBIL)含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
规格:50T/48S
产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
产品说明:
直接胆红素(Direct bilirubin,DBil)又称结合胆红素,是由间接胆红素进入肝后受肝内葡萄糖醛酸基转移酶的作用与葡萄糖醛酸结合生成的。直接胆红素增高对临床诊断阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸、肝癌、胰头癌、胆石症、胆管癌等有重要意义。直接胆红素能被亚硝酸钠氧化,生成胆绿素。通过检测 450nm 下波长变化,可计算出直接胆红素的含量。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、超声波细胞破碎仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
血清、血浆等液体样本:直接测定。若有浑浊可离心后取上清进行测定。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 450nm,蒸馏水调零。
2、 按下表步骤加样(在 EP 管中加入下列试剂):
三、DBIL 含量计算
1、 计算公式
DBIL 含量(μmol/L)=1099.7×(ΔA 测定-ΔA 空白)-10.73
注意事项:
1、胆红素见光易分解,测定时要尽量避光。
2、如果 ΔA<0 或过低,建议增加样本量后再进行测定;如果 ΔA>0.5,建议稀释样本后再进行测定。
实验实例:
1、 取非正常小鼠血清按照测定步骤操作,用 1mL 玻璃比色皿测得计算 ΔA 测定=A1 测定-A2 测定=0.236-0.169=0.067,ΔA 空白=A1 空白-A2 空白=0.006-0.004=0.002,计算含量得:
DBIL(μmol/L)= 1099.7×(ΔA 测定-ΔA 空白)-10.73=60.75 μmol/L。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!