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血氨含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、试剂一:临用前将 A 液与 B 液按照体积比 1:4 混匀,根据试验所需量现配现用;
2、标准品:100μmol/mL 氮标准液。
产品说明:
血氨主要来源是内源性氨和外源性氨。氨在血中保持恒定状态,即血氨的来源和去路保持动态平衡。氨是有毒物质,主要在肝脏进行代谢解毒。当肝功能严重损害时,氨不能被解毒。氨在中枢神经系统聚集,从而导致肝性脑病。
本法根据氨的靛酚蓝反应原理,通过蛋白沉淀剂将血清(浆)中蛋白沉淀后,利用酚-次氯酸盐直接显色法测定血氨,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比,在630 nm处有特殊吸收峰,据此可由吸光值计算出样本中血氨的含量。
技术指标:
最 低检出限:0.0258 μmol/mL
线性范围:0.125-3 μmol/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、蒸馏水、EP管。
适用范围:
本试剂盒可测各种动物血清(浆)等样本中血氨的含量。
操作步骤:
一、测定步骤
1、 分光光度计预热 30 min 以上,调节波长至 630 nm,蒸馏水调零。
2、 标准品的准备:将 100 μmol/mL 的氮标准液用蒸馏水稀释至 3、2、1、0.5、0.25、0.125 μmol/mL 的标准溶液备用。
3、 操作表:(在 1.5 mL EP 管中操作)
二、血氨含量计算
1、 标准曲线的绘制:
以各个标准溶液的浓度为 x 轴,其对应的 ΔA 标准为 y 轴,绘制标准曲线,得到标准方程 y= kx+b,将 ΔA 带入方程得到 x(μmol/mL)。
2、 血氨含量的计算:
血氨含量(μmol/mL)= x×V 样÷V 样= x
V 样:加入的样本体积,0.2 mL。
注意事项:
1. 同一批检测样本需配 1-2 个空白管。
2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
3. 试剂一配置后尽快使用,若发现变色则不能使用。
4. 所用器材和取血装置均应无氨;采血后应立即测定,不能立即测定 2-8℃可保留 2h;样本禁止溶血。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!