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获取电话外切 β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（C1）活性检测试剂盒说明书
微量法
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前取 1 瓶加入 3 mL 蒸馏水溶解备用，现用现配；2-8℃保存 4 周；
2、 标准品：5 μmol/mL 对硝基苯酚溶液。
产品说明：
β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（C1，EC3.2.1.91）存在于细菌、真菌和动物体内，是微生物纤维素降解酶系的主要组分，也是水解天然纤维素的必需组分，C1 酶作用于纤维素线状分子的末端，水解 β-葡萄糖苷键，每次切下 1 个纤维二糖分子。
C1 能够催化对硝基苯纤维二糖苷 (PNPC)生成对硝基苯酚，后者在 400 nm 有特征光吸收。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP 管。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、组织：按照组织质量（g）: 提取液体积(mL)为 1 : 5~10 的比例（建议称取 0.1 g 组织，加入 1 mL 提取液）进行冰浴匀浆。10000g，4℃离心 10 min，取上清置冰上待测。
2、细菌、真菌：按照细菌或真菌数量 104个 : 提取液体积（mL）500~1000 : 1 的比例（建议 500 万细菌或真菌加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 200W，超声 3 s，间隔 7s，总时间 3min）然后 10000g，4℃，离心 10 min，取上清置冰上待测。
3、血清（浆）等液体：直接测定。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长至 400 nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释：取 50μL 5 μmol/mL 对硝基苯酚溶液，加入 750μL 蒸馏水，充分混匀，配制成 0.3125 μmol/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要 20μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、 操作表（在 1.5 mL 离心管中依次加入下列试剂）：
三、C1 酶活计算
注意事项：
1、若吸光度大于 1.5 时，建议将样本用提取液稀释后进行测定。计算公式乘以稀释倍数。
实验实例：
1、 取 0.1g 香菇进行样本处理，离心取上清稀释 2 倍后按照测定步骤操作，测得计算 ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=1.454-0.047=1.407，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.292-0.047=0.245，根据样本质量计算酶活得：
C1（U/g 质量）=312.5×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×2（稀释倍数）=312.5×1.407÷0.245÷0.1×2=35893 U/g 质量。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
