仪器信息网 试剂标物 生化试剂 流式试剂/试剂盒 N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒 可见分光光度法
耗材通 3

找不到产品?留下需求帮您找

一键询价
N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒 可见分光光度法

N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒 可见分光光度法

价格: 780

品牌:博尔森

供货周期: 一周

货号:BES-2546BTK

规格:50T/24S

N-乙酰-β-D -葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒说明书

可见分光光度法

注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。

规格: 50T/24S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,

QQ截图20220615142154.jpg

溶液的配制:

1、 试剂二:临用前取一瓶加入 2.5 mL 蒸馏水溶解备用;可-20℃分装保存 4 周,避免反复冻融;

2、 标准品:5 μmol/mL 对硝基苯酚溶液。

产品说明:

N-乙酰-β-D -葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52,N-acetyl-β-D-glucosidase,NAG)广泛分布于各种组织中,是一种细胞内溶体酶,测定NAG活性可用于肾小管间质性肾炎、尿路感染、糖尿病肾病综合症、高血压肾病、肾移植后的排异反应和肾病综合症的早期诊断。

NAG分解N-β-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最 大吸收峰,通过测定400nm下吸光度的变化来计算NAG活性。

QQ截图20220615142154.jpg

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、天平、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、超声破碎仪、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),冰浴匀浆。15000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、细菌、细胞:先收集细胞或细菌样本到离心管内,离心弃上清后,按照细胞数量 104个:提取液体积(mL)500~1000:1 的比例,建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率 200w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3min),然后 15000g,4℃,离心 10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)等液体:直接测定。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。

2、 标准溶液的稀释:取125μL 5 μmol/mL对硝基苯酚溶液,加入875μL蒸馏水,充分混匀,配制成0.625 μmol/mL标准液使用,现用现配。(实验中每管需要50μL,为减小实验误差,故配制大体积。)

3、 操作表 (在1.5mL离心管中依次加入下列试剂) :

QQ截图20220615142154.jpg

三、NAG活性计算

QQ截图20220615142154.jpg

注意事项:

吸光度若大于1.2时,建议将样本用提取液稀释后进行测定。

实验实例:

1. 取 0.1g 大鼠脾脏组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。15000g,4℃离心 10min,取上清稀释 5 倍,按照测定步骤操作,测定计算 ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.798-0.042=0.756,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.364-0.006=0.358,按样本质量计算得:

NAG(U/g 质量)=20.83×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×5(稀释倍数)=2199.3687 U/g 质量。

2. 取 0.1g 玉兰,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。15000g,4℃离心 10min,取上清,按照测定步骤操作,测定计算 ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.543-0.120=0.423,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.364-0.006=0.358,按样本质量计算得:

NAG(U/g 质量)=20.83×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=246.120 U/g 质量。

3. 取兔血清直接检测,按照测定步骤操作,测定计算 ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.542-0.348=0.194,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.364-0.006=0.358,按液体体积计算得:

NAG(U/mL)=20.83×ΔA 测定÷ΔA 标准=11.2878 U/mL。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!




生化试剂 N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒 可见分光光度法由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于流式试剂/试剂盒 N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒 可见分光光度法的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒 可见分光光度法外,上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供: 二安替比林甲烷、 焦硫酸钾、 偶氮甲碱H
推荐专场
同类试剂
该厂商试剂
相关厂商
手机版: