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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒

价格: 840

品牌:博尔森

供货周期: 一周

货号:BES-2492BTK

规格:50T/24S

土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒说明书

可见分光光度法

注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。

规格:50T/24S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

QQ截图20220615142154.jpg

溶液的配制:

1、 试剂二:临用前取 1 瓶加入 4 mL 蒸馏水溶解,用不完的试剂-20℃分装保存 4 周;

2、 标准品:5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液。

产品说明:

QQ截图20220615142154.jpg

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛、蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热30min,波长调至400nm,蒸馏水调零。

2、 标准溶液的稀释:临用前取20μL 5 mmol/L的对硝基苯酚溶液,加入980μL试剂一,充分混匀,配制成100 μmol/L标准液使用,现用现配。(实验中每管需要500μL,为减小实验误差,故配制大体积。)

3、 加样表:

QQ截图20220615142154.jpg

三、S-NAG 活力计算

单位的定义:每天每g土样中产生1μmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-NAG活力(U/g 土样)=ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T=1.44×ΔA÷ΔA标准÷W

T:反应时间,1h=1/24d;V反总:反应体系总体积:6×10-4L;C标准:标准溶液浓度,100μmol/L;W:样本质量,g。

注意事项:

当ΔA大于1时,建议将上清液稀释后进行测定;当ΔA小于0.02时,建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。

实验实例:

1、 取两管 0.1g 三叶草土,即为测定管和对照管,按照测定步骤操作,记为 A 测定管、A 对照管。计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.509-0.434=0.075,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.604-0.002=0.602,计算酶活得:

S-NAG 活力(U/g 土样)=1.44×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=1.44×0.075÷0.602÷0.1=1.79402 U/g 土样。

2、 取两管 0.1g 林土样,即为测定管和对照管,按照测定步骤操作,记为 A 测定管、A 对照管。计算ΔA 测定=A测定管-A 对照管=0.574-0.497=0.077,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.604-0.002=0.602,计算酶活得:

S-NAG 活力(U/g 土样)=1.44×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=1.44×0.077÷0.602÷0.1=1.84186 U/g 土样。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!




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