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获取电话土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）活性检测试剂盒说明书
微量法
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂一：甲苯自备；
2、 试剂三：临用前取 1 瓶加入 5mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存一周，避免反复冻融；
3、 标准品：5mmol/L 的对硝基苯酚溶液。临用前用试剂二将标准品稀释 50 倍得 100μmol/L 的标准溶液。（具体稀释过程见操作步骤）
产品说明：
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物，能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫，在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用，是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
S-ASF能够催化对-硝基苯硫酸钾生成对-硝基苯酚，后者在410nm有特征光吸收。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研钵、冰、30-50目筛、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50 目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至410nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释：取20μL 5mmol/L的对硝基苯酚溶液，加入980μL试剂二，充分混匀，配制成100μmol/L标准液待测，现用现配。（实验中每管需要100μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、 加样表：
三、S-ASF 活力计算
单位的定义：每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF活力（U/g 土样）=ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T =0.456×ΔA测定÷ΔA标准÷W
T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：1.9×10-4L；C标准：标准溶液浓度，100μmol/L；W：样本质量，g。
实验实例：
1、 分别称取两管 0.02g 三叶草土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.401-0.076=0.325，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.395-0.047=0.348，计算酶活得：
S-ASF 活力（U/g 土样）=0.456×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=0.456× 0.325÷0.348÷0.02=21.293 U/g 土样。
2、 分别称取两管 0.02g 土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.262-0.066=0.196，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.395-0.047=0.348，计算酶活得：
S-ASF 活力（U/g 土样）=0.456×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=0.456× 0.196÷0.348÷0.02=12.841 U/g 土样。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
