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获取电话组织总磷含量检测试剂盒说明书
微量法
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂一：强腐蚀性，强氧化性；
2、 试剂三：临用前配制，加入 5 mL 蒸馏水，溶解后再加入 2.5 mL 试剂二，混匀；
3、 标准品：1mmol/L 无机磷标准液。
产品说明：
磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率，进而为合理施肥提供依据。
总磷经消化后，转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法，一定条件下，钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收，即可计算无机磷含量，进而可计算出组织中总磷含量。
技术指标：
最 低检出限：0.0338 mmol/L
线性范围：0.625-8 mmol/L
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、蒸馏水和浓硫酸。
操作步骤：
一、有机磷消化（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
称取约 0.1g 组织于带盖试管中，加浓硫酸 1 mL，盖紧（封口膜封口，防止水分散失）后沸水浴 10min 左右，待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后，加试剂一 200μL，充分混匀，盖紧后继续沸水浴，直到溶液呈透明状，取出室温冷却后，加蒸馏水 3.8 mL，充分混匀；室温，10000rpm，离心 10min，取上清液，待测。
二、测定步骤
1、分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。
2、打开水浴锅，调节温度到 40℃。
3、样本测定：
混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，分别记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管。
三、组织总磷含量计算
注意事项：
1、试剂三需临用前配制，限当天使用。
2、测定前先用 1~2 个样本做预实验，如吸光值大于 1.5 时，需用蒸馏水做相应稀释。
实验实例：
1、 取 0.1g 肾脏按照提取步骤操作，离心取上清之后按照测定步骤操作，使用 96 孔板测得计算 A 测定管=0.191，A空白管=0.051，A 标准管=0.282，按样本质量计算总磷含量得：
总磷含量(mmol/g 质量)= 0.005×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W= 0.005×(0.191-0.051)÷(0.282-0.051)÷0.1= 0.030 mmol/g 质量。
2、 取 0.1g 脾按照提取步骤操作，离心取上清之后按照测定步骤操作，使用 96 孔板测得计算 A 测定管=0.197，A空白管=0.051，A 标准管=0.282，按样本质量计算总磷含量得：
总磷含量(mmol/g 质量)= 0.005×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W= 0.005×(0.197-0.051)÷(0.282-0.051)÷0.1= 0.032 mmol/g 质量。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
