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酸性土壤速效磷含量检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 试剂一:临用前加入 5 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存一周;
2、 试剂二:临用前加入 5 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存一周;
3、 标准品:10 μmol/mL 标准磷贮备液;
4、 工作液(定磷剂)的配制:按 H2O:试剂一:试剂二:试剂三=2:1:1:1 的比例配制,配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,工作液应现配现用。
注意:配试剂最 好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
产品说明:
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分,包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、易矿化有机态磷以及某些已溶解的沉淀态磷酸盐,土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。
用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷,钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质,通过测定 660nm 光吸收,即可计算磷含量。
技术指标:
最 低检出限:0.0061 μmol/mL
线性范围:0.03125-6 μmol/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震荡仪、研钵、EP管、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样风干,过 30-50 目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为 1:10-20 的比例(建议称取约 0.05g土样,加入 1mL 提取液),振荡提取 1h,10000g,25℃离心 10min,取上清液待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至660nm,分光光度计用蒸馏水调零。
2、 将10μmol/mL标准液用提取液稀释为3、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625μmol/mL的标准溶液备用。
3、 标准溶液稀释表:
4、 样本测定:(在1.5mL离心管中或96孔板依次加入下列试剂)
三、速效磷含量计算
注意事项:
1、工作液(定磷剂)应现配现用,正常颜色为浅黄色,如有变色或变蓝则均为失效。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管或 EP 管等试验器材均要求严格无磷。
3、显色结束后应立即检测。
4、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!