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获取电话植物原花青素（OPC）含量检测试剂盒说明书
微量法
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1．试剂二：临用前加 8 mL 提取液，充分溶解。配制好的试剂二应尽快使用，2-8℃保存时间不超过一个月；
2．标准品：10 mg 原花青素。临用前加入 1mL 提取液，充分溶解得到 10 mg/mL 标准液，4℃保存两周；
3．工作液：临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合，现用现配。用多少配多少。
产品说明：
原花色素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。在酸性条件下，植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物，在500nm处有特征吸收峰，测定500nm光吸收值，可计算植物中原花青素的含量。
技术指标：
最 低检出限：0.0513 mg/mL
线性范围：0.078-5 mg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、台式离心机、粉碎仪、超声清洗仪、30-50目筛和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
将样本烘干至恒重，粉碎，过 30-50 目筛之后，称取约 0.1g，加入 1mL 提取液，用超声提取法进行提取（功率 300W，温度 25℃，时间 30min）；12000rpm，25℃离心 10min，取上清，用提取液定容至 1mL，待测。
二、测定步骤
1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至500nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2. 标准溶液制备：将10mg/mL标准液用提取液稀释为4、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625mg/mL的标准溶液。
3. 标准液稀释可参考下表：
4. 操作表
三、OPC 计算公式
1. 根据标准管的浓度（x，mg/mL）和吸光度ΔA标准（y，ΔA标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定（y，ΔA测定）带入公式计算样本浓度（x，mg/mL）。
2. OPC的计算：
（1）按样本质量计算：OPC含量（mg/g 质量）=x×V提取÷W=x÷W
（2）按样本蛋白浓度计算：OPC含量（mg/mg prot）=x×V提取÷（Cpr×V提取）=x÷Cpr
V提取：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1、如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定，注意同步修改计算公式。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
