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获取电话黄嘌呤氧化酶（XOD）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂三：根据样本量再用试剂二稀释 5 倍后备用。用不完的试剂 2-8℃可保存 1 周。
2、 标准品：10μmol/mL 亚硝酸钠。
产品说明：
XOD（EC 1.17.3.2）催化次黄嘌呤氧化生成黄嘌呤和超氧阴离子，是活性氧主要来源之一；同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心、肺、肝脏等组织中，当肝功能受损时，XOD大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。
XOD催化次黄嘌呤产生超氧阴离子，超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-，NO2-在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下，生成紫红色的偶氮化合物，在530nm有特征吸收峰，根据其生成量可反映XOD活性的大小。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、匀浆器/研钵、细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1. 细菌或细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
3. 血清（浆）样本等液体样本：直接检测。若有沉淀，离心后测定。
二、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至530nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、 标准液的稀释：将标准液用蒸馏水稀释至0.25μmol/mL的标准液（可以吸取25μL 10μmol/mL 亚硝酸钠和975μL蒸馏水混合）。
3、 操作表
三、XOD 活性计算
实验实例：
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
