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获取电话二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂三：临用前加入 0.5 mL 蒸馏水充分溶解待用，振荡溶解后若出现浑浊可以离心使用；
2、 试剂四：临用前加入 1 mL 蒸馏水充分溶解待用；
3、 工作液的配制：临用前在试剂二中加入全部试剂一，充分混匀，在 25℃孵育 5min。
产品说明：
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、细菌或细胞样本的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提
取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20%，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；10000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液，冰浴中匀浆。10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。建议选取新鲜的植物样本。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
2、按下表步骤加样：
三、Rubisco 活性计算
实验实例：
1、 取 0.1g 植物叶片，加入 1mL 提取液进行匀浆研磨，取上清之后按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算 ΔA 测定管= A1 测定-A2 测定=1.2647-1.1825=0.0822，ΔA 空白管=A1 空白-A2 空白=0.8649-0.8502=0.0147，ΔA=ΔA 测定管-ΔA 空白管=0.0822-0.0147=0.0675，按样本质量计算酶活得：
Rubisco 活力（U/g 质量）=344×ΔA÷W=344×0.0675÷0.1=232.2 U/g 质量。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
