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微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂一：自备甲苯；
2、 试剂三：临用前取 1 瓶加入 11 mL 蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂 2-8℃保存 2 周；
3、 标准品：含 10 mg 无水葡萄糖（干燥失重<0.2%）。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解备用，2-8℃可保存两周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
产品说明：
S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在 540nm 有特征光吸收，在一定范围内 540nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、30-50目筛、冰、研钵、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，研磨，过 30-50 目筛。
二、测定步骤
1. 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm，分光光度计蒸馏水调零。
2. 标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至 0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/mL，可参考下表。
备注：实验中每个标准管需 85μL 标准溶液。
3. 加样表：
充分混匀，放入沸水浴中煮沸 5min（盖紧，缠封口膜以防止水分散失），流水冷却后充分混匀。
540nm 处蒸馏水调零，取 200μL 至微量玻璃比色皿或 96 孔板中，测定吸光值 A，分别记为 A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算 ΔA=A 测定管-A 对照管（每个测定管需设一个对照管），ΔA 标准=A 标准管-A空白管。标准曲线和空白管只需测 1-2 次。
三、S-SC 活性计算
1、标准曲线的建立：
根据标准管的浓度（y，μmol/L）和吸光度 ΔA 标准（x，ΔA 标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将 ΔA测定（x，ΔA 测定）带入公式计算样本浓度（y，μmol/L）
2、S-SC 活性计算：
单位的定义：37℃，每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。
S-SC 活力（U/g 土样）= y×10×V 反总÷W÷T =100×y
10：稀释倍数；T：反应时间，1d；V 反总：反应体系总体积，0.3mL；W：样本质量，0.03g。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
