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微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂一：自备甲苯；
2、 试剂二：临用前取 1 瓶加入 2.7 mL 蒸馏水，充分溶解待用，用不完的试剂 2-8℃保存 4 周；
3、 试剂四：临用前将 A 液和 B 液按体积比 1：4 混合待用；用多少配多少；
4、 试剂五：液体置于试剂瓶内 EP 管中，使用前需先离心。临用前加入 5.7 mL 蒸馏水，混匀，待用；用不完的试剂 2-8℃保存两周；
5、 标准品：1 mg/mL 氮标准液。
产品说明：
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：
一、 样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。
二、 测定步骤
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 630nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、培养
3、将培养结束的上清液稀释10倍（取0.1mL上清液，加入0.9mL蒸馏水）。若最终计算得到的ΔA仍大于1则继续稀释。
4、标准品的准备：吸取适量的标准溶液，用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0（空白管）μg/mL，可参考下表。
备注：实验中每个标准管需 120μL 标准液。
5、测氨量（在微量玻璃比色皿或96孔板中加入下列试剂）
充分混匀，微量玻璃比色皿需要用蒸馏水调零，96 孔板不需要调零，于 630nm 处读取吸光值 A，分别记为 A测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算 ΔA 测定=A 测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管，每个测定管设一个对照管。标准曲线和空白管只需测 1-2 次。
三、S-UE活力计算
1、标曲绘制
标准曲线的建立：根据标准管的浓度（x，μmol/L）和吸光度 ΔA 标准（y，ΔA 标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将 ΔA 测定（y，ΔA 测定）带入公式计算样本浓度（x，μmol/L）。
2、S-UE活力计算
单位的定义：每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。
S-UE活力（U/g 土样）=x×10×V反总÷W÷T=60×x
10：稀释倍数；T：反应时间，1d；V反总：反应体系总体积，0.3mL；W：样本质量，0.05g。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
