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获取电话土壤多酚氧化酶（S-PPO）活性检测试剂盒说明书
微量法
规格: 100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前加入 12 mL 蒸馏水，用不完的试剂仍 4℃保存；
2、 试剂三：自备乙醚；
3、 标准液：重铬酸钾溶液（5 mmol/L），相当于 0.2 mg/mL 紫色没食子素溶液。
产品说明：
S-PPO 主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素，完成土壤芳香族化合物循环，用于土壤环境修复。
S-PPO 能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素，后者在 430nm 有特征光吸收。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（非聚苯乙烯材质）、
乙醚（不允许快递）、30~50 目筛、0.5mol/L HCL 溶液、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、 样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。
二、测定步骤
1、可见分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 430nm，试剂三调零。
2、标准液稀释：用 0.5mol/L HCL 溶液将标准液稀释至 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0mg/mL。
3、标准曲线的建立：取 0.2mL 稀释好的标准液于比色皿或 96 孔板中在 430nm 处测定吸光值 A，根据吸光度（x，减去浓度为 0 的吸光度的值）和浓度（y，mg/mL）做出标准曲线。
4、样本测定表
振荡数次，室温静置 30min，取 200μL 上层液于 430nm 处测定吸光值 A。
三、S-PPO 活性计算
根据标准曲线，将样本吸光值 A 带入公式中（x），计算出样本浓度 y（mg/mL）。
单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-PPO（U/g 土样）=y×V 提取相÷W÷T =516×y
T：反应时间，1h=1/24d；V 提取相：提取相总体积，0.43mL；W：样本质量，0.02g。
注意事项：
乙醚易挥发，转移至酶标板时建议一次性不要测定太多样本。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
