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获取电话UDPG 焦磷酸化酶（UGP）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
规格: 50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1. 试剂一：临用前加 15 mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存 2 周。
2. 试剂二：临用前加 5 mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后 4℃保存，禁止反复冻融，4℃保存 1 周。
3. 试剂三：临用前加 1.4 mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存 2 周。
4. 试剂四：临用前每支加 1 mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存 2周。
5. 工作液的配制：将试剂一：试剂二：试剂三：试剂四：试剂五：试剂六按体积比=600：100：20：40：100：250混合，现用现配。
产品说明：
尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose pyrophosphosphprylase，UGP，EC 2.7.7.9）在自然界广泛分布。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化，将1-磷酸葡萄糖与UTP分子合成为UDP-葡萄糖（UDPG），UDPG是高等植物和动物中主要活化酶的形式，作为葡萄糖基供体参与糖原、蔗糖、纤维素等的合成代谢。
UGP可逆的催化生成1-磷酸葡萄糖，其在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将NADP转化为NADPH，UGP活性可以用340nm的吸光值的变化来反应。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
血清等液体：直接检测。
二、测定步骤
1、 紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 操作表：
三、UGP 酶活计算
注意事项：
1. 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔，正常情况下，变化不超过0.01。
2. ΔA大于0.6或者A2测定大于1.2时，建议将样本稀释后再进行测定。当ΔA小于0.01时，可以延长反应时间（5min或10min）来测定。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
