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植物组织果糖(FT)含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
试剂一:10mg 果糖,临用前加 1mL 蒸馏水溶解,再用蒸馏水稀释为 4mg/mL 的果糖标准液。
产品说明:
果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。在酸性条件下果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。
技术指标:
最 低检出限:0.0141 mg/mL
线性范围:0.25-25 mg/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
称取约 0.1g 样本,常温研碎;加入 1mL 提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于 80℃水浴锅中 10min(盖紧,以防止水分散失),振荡 3~5 次,冷却后,4000g,常温离心 10min,取上清;加入少量(约 2mg)试剂四,80℃脱色 30min(盖紧,以防止水分散失);再加入 1mL 提取液,4000g,常温离心 10min,取上清液测定。
二、测定步骤
1、 可见分光光度计预热30min 以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):
混匀,80℃水浴反应 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却后测定 480nm 处光吸收值,记为 A 空白管、A标准管、A 测定管,并计算 ΔA 测定=A 测定管-A 空白管、ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。
三、果糖含量计算:
1、按样本蛋白浓度计算
果糖含量(mg/mg prot)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V样总÷(Cpr×V样总)=4×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
2、按样本质量计算
果糖含量(mg/g 质量)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V样总÷W=8×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标:标准品浓度,4mg/mL;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;V样总:提取液体积,2mL。
注意事项:
如果样本吸光值大于1.3,建议将样本用提取液稀释后进行测定。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!